PRODUCCION DE AMONIACO A PARTIR DE ARGININA

Sustrato: Arginina (caldo)

Enzima: Hidrolasa o Descarboxilasa

Producto: Amoniaco

Revelador: Reactivo Nessier

Fundamento: Detecta la hidrólisis de la arginina mediante la enzima que transforma este

aminoácido en citrulina, con liberación de amoniaco.

Reacción:

FERMENTACION DE AZUCARES

Sustrato: Carbohidrato

Enzima: Deshidrogenasa

Producto: Ácidos orgánicos

Revelador: Indicador de pH

Fundamento: Diferenciación de enterobacterias en base a su capacidad fermentativa de

carbohidratos.

Reacción:
MIO

Sustrato: Orinitina

Enzima: Descarboxilasa

Producto: Movilidad, producción de indol y descarboxilación de ornitina

Revelador: Visible

Fundamento: Para la identificación de Endobacterias. Este medio sirve para observar la movilidad,
la producción de indol y descarboxilación de la ornitina.

Reacción:

PRODUCCION DE ACETOINA

Sustrato: Glucosa fosfato (caldo)

Enzima: Varias (ruta metabolica)

Producto: Acetoína

Revelador: Alfa naftol y KOH 40%

Fundamento. Determinar la capacidad de algunos organismos de producir un producto final

neutro de acetilmetilcarbinol (acetoína); a partir de la fermentación de glucosa.

Reaccion:
Prueba bioquímica: Actividad reductora (Leche tornasolada)

Sustrato: Lactosa

Enzima – analito: β-galactosidasa

Producto: Ácido lactico

Revelador: cambio de pH por acumulación de ácido láctico (Tornasol)

Fundamento: Las bacterias hidrolizan la lactosa en glucosa y galactosa por medio la enzima β-
galactosidasa, posteriormente la glucosa es fermentada obteniendo como productos CO2 , H y
ácido láctico el cual acidifica el medio y provoca un vire en el medio por medio del indicador
tornasol de azul a rojo.

Prueba bioquímica: Hidrolisis de esculina

Sustrato: Esculina (β – D – glucosa -6,7- dhidroxicumarina)

Enzima – analito: β – Galactosidasa

Producto: Glucosa y 6,7 dihidroxicumarina (Esculetina)

Revelador: iones hierro

Fundamento: La esculina es hidrolizada a glucosa y esculetina, la esculetina reacción con los iones
de hierro presentes en el medio de cultivo para formar un compuesto de color negro.

Prueba bioquímica: Hidrolisis de gelatina

Sustrato: Gelatina (proteína)

Enzima – analito: gelatinasa (proteasa exoenzima)

Producto: Aminoácidos

Revelador: no requiere, puede emplearse el carbón activado

Fundamento: La gelatina es uan proteína que tiene la capacidad de gelificar, cuando es hidrolizad
se descompone en sus aminoácidos y pierde su característica de gelificar, la gelatina se adhiere a
el carbón activado por lo que al ser hidrolizada se pierde su adherencia.

Prueba bioquímica: Tolerancia a la sal

Sustrato: Cloruro de sodio

Enzima – analito: No hay

Producto: No hay

Revelador: No hay

Fundamento: capacidad de desarrollarse en cantidades variables de cloruro de sodio, dado que las
bacterias no pueden la actividad del agua de su citoplasma más a alto que su exterior por lo que
estos microorganismos en concentraciones relativamente altas de sal mantengan su citoplasma
isosmótico.
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