UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

Facultad de Ingeniería Química

Facultad de Ingeniería Química

TEMA: AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS

CURSO: Química Orgánica II

TÍTULO: Informe de la práctica N°7 de laboratorio
PROFESORA: Stanciuc Stanciuc, Viorica
ALUMNOS:
 Camara Rojas, Liseth
 Montaño Pairazamán, Gabriela
 Zapata Rodríguez, Erick
CICLO: IV
GRUPO HORARIO: 91G

2018
OBJETIVOS:

 Reacciones de reconocimiento de aminoácidos.

 Reacciones de reconocimiento de proteínas.

INTRODUCCIÓN

En el presente trabajo se quiere dar a conocer las diversas reacciones de reconocimiento

tanto de aminoácidos como de proteínas. Para ello emplearemos la prueba de Biuret
(para el reconocimiento de proteínas) , La prueba Xantoproteica ( la cual nos forma un
nitroderivado aromático de color amarillo con las proteínas) , la prueba de Millon , la
prueba con la Nihidrina (que se usa pare detectar aminoácidos, formándose compuestos
coloreados violeta con la nihidrina).
MATERIALES

 11 tubos de ensayo
 Gradilla
 3 pipetas de 5ml
 1 vaso de precipitado
 Termómetro
 Mechero
 Trípode


REACTIVOS

 NaOH
 Albúmina
 CuSO4
 HNO3(cc)
 NH4OH
 Reactivo de millón
 Reactivo de ninhidrina
 AgNO3
 Acetato de plomo
 Ácido pícrico
 Reactivo de Nessler
 Ácido acético
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

 Prueba de Biuret : (positivo para proteínas)

En un tubo de ensayo colocar dos ml de albúmina y 3 ml de NaOH al 10% y
agregar gota a gota la solución de CuSO4 al 5% hasta obtener un color violeta
púrpura.

 Prueba Xantoproteíca
El grupo fenilo de la molécula de proteína con HNO3 (cc) da nitroderivados
aromáticos de color amarillo, que por adición de un álcali cambia a un color
anaranjado. En un tubo de ensayo colocar 3 ml de una solución de albúmina,
luego agregarle 1 ml de HNO3 (cc), calentar suavemente y observar el
precipitado amarillo que se forma y luego se disuelve. Se enfría exteriormente y
se añade gota a gota NH4OH tornándose anaranjado.
 Prueba de Millon
A una solución de 3ml de clara de huevo se añade 5 gotas del reactivo de Millon
(1gr de Hg + HNO3(cc), se calienta y se deja enfriar y completar hasta 60 ml) ,
luego se calienta y se observa el color. Cuando se obtiene una coloración rojo
naranja en la proteína existe un resto de grupos hidroxifenilos (HO-C6H5) como
la tirosina, fenilamina o triptófano.

 Prueba de color con la Ninhidrina(tricetohidrindeno)

Una reacción específica de los aminoácidos que se usa para detectar su presencia
, consiste en el tratamiento con la nihidrina formándose complejos coloreados
violetas. Esta reacción es positiva para todos los aminoácidos que tienen el
grupo α-amino primario.
La prolina que tiene el grupo amino secundario da un color naranja al reaccionar
con la nihidrina.
  Con sales metálicos
En tres tubos de ensayo agregar 3 ml de solución de albúmina y al primer tubo
añadir un ligero exceso de AgNO3, CuSO4 y (CH3COO)2Pby 5 gotas de NaOH,
y observar los precipitados.

 NaOH


CuSO4  AgNO3  (CH3COO)2 Pb

 Con reactivo alcaloide

a) Ácido pícrico: En un tubo agregar 3 ml de solución de clara de
huevo y añadir 6 gotas de solución de ácido pícrico hasta obtener
precipitado.
 b) Reactivo de Nessler

 Pruebas de coagulación
a) Ácido acético

b) Solo albúmina(Temperatura de coagulación 82°C-83°C)

CONCLUSIONES

 En la prueba de Biuret nos dio positivo donde observamos una coloración

violeta purpura, puesto que las proteínas (albúmina) dan positivo por tener el
grupo amida.
 En la prueba xantoproteica nos dio positivo donde observamos un precipitado
de color amarillo y al agregar NH4OH, se torna naranja.
 En la prueba de millón observamos un precipitado ligeramente naranja
indicándonos la presencia de un resto de grupos hidroxifenilos.
 En la prueba de la ninhidrina observamos un precipitado ligeramente amarillo.
 En las reacciones con las sales metálicas, con AgNO3 vemos un precipitado
blanco, con CuSO4 un precipitado blanquecino celeste, con acetato de plomo un
precipitado blanco.
 En la prueba con el ácido pícrico observamos un precipitado amarillo y en la
prueba con el reactivo de Nessler observamos un precipitado naranja-mostaza.
 Concluimos en la experiencia que la temperatura de coagulación de la albúmina
está entre 82°C- 83°C.
CUESTIONARIO
1. Indique las estructuras de las proteínas de la albumina.
ESTRUCTURA PRIMARIA
Cuenta con la secuencia de 585 aminoácidos. Es la proteína con mayor cantidad
de leucina y con escaso contenido en glicina, pero contiene todos los
aminoácidos esenciales que son: fenilalanina, isoleucina, leucina, lisina,
metionina, treonina, triptófano, valina, arginina e histidina; y además
aminoácidos no esenciales.
ESTRUCTURA SECUNDARIA
Plegado local. La albúmina en su estructura secundaria es en su mayoría de la
forma α-hélice.
ESTRUCTURA TERCIARIA
 GLOBULAR.- La cadena se encuentra plegada localmente formando una
estructura secundaria (hélice α), a su vez estas regiones se pliegan unas
sobre otras, para formar la estructura terciaria.
En esta proteína la estructura terciaria (e incluso la cuaternaria) tienen
una extraordinaria importancia en sus propiedades.

2. Explique las diferencias entre las estructuras primarias y secundarias o

terciarias de una proteína. De ejemplo.

 ESTRUCTURA PRIMARIA
La estructura primaria es la secuencia de aminoácidos de la proteína. Nos
indica qué aminoácidos componen la cadena polipeptídica y el orden en que
dichos aminoácidos se encuentran. La función de una proteína depende de su
secuencia y de la forma que ésta adopte.

EJEMPLO:
 Hemoglobina, proteína con una estructura primaria. Se encuentra en los
glóbulos rojos, ayuda a proporcionar los tejidos de todo el cuerpo con un
 suministro constante de oxígeno. La estructura primaria de la hemoglobina es
importante porque un cambio en un solo aminoácido puede interrumpir la
función de la hemoglobina.
 Hexosaminidasa, una proteína que contribuye a la función de los
compartimentos celulares llamados lisozimas. Mantenimiento de la función
lisozima es importante para su salud, ya que estos compartimentos ayudan a las
células disponen de moléculas que podrían dañar la célula. Una mutación en la
estructura primaria de hexosaminidasa puede interrumpir la función de
lisozima en el cerebro, dando lugar a la enfermedad de Tay-Sachs fatal.
 La distrofina, proteína con una estructura primaria. La presencia de distrofina
contribuye al funcionamiento de los músculos, y la proteína ayuda a mantener
la estructura de las fibras musculares. Las mutaciones genéticas que cambian la
estructura primaria de distrofina - tal como la sustitución de un aminoácido por
otro, o deleciones de aminoácidos - puede dañar sus fibras musculares, que
conducen a enfermedades tales como la distrofia muscular de Duchenne.

 ESTRUCTURA SECUNDARIA

La estructura secundaria es la disposición de la secuencia de aminoácidos en

el espacio. Los aminoácidos, a medida que van siendo enlazados durante la
síntesis de proteínas y gracias a la capacidad de giro de sus enlaces, adquieren
una disposición espacial estable, la estructura secundaria.
Existen dos tipos de estructura secundaria:
1.- La a(alfa)-hélice. - Esta estructura se forma al enrollarse helicoidalmente
sobre sí misma la estructura primaria. Se debe a la formación de enlaces de
hidrógeno entre el -C=O de un aminoácido y el -NH- del cuarto aminoácido
que le sigue.

 Ejemplo: Un ejemplo particular es la Hélice de colágeno: una variedad

particular de la estructura secundaria, característica del colágeno, proteína
presente en tendones y tejido conectivo.

2.- La conformación beta. - En esta disposición los aminoácidos no forman

una hélice sino una cadena en forma de zigzag, denominada disposición en
lámina plegada.
 Ejemplo; presentan esta estructura secundaria la queratina de la seda o
fibroína.

 ESTRUCTURA TERCIARIA

Es la disposición tridimensional de la cadena polipeptídica completa.

Esta conformación globular facilita la solubilidad en agua y así realizar
funciones de transporte, enzimáticas, hormonales, etc.
 Se mantiene estable gracias a la existencia de enlaces entre los radicales R de
los aminoácidos. Aparecen varios tipos de enlaces:
1.- El puente disulfuro entre los radicales de aminoácidos que tienen azufre.
2.- Los puentes de hidrógeno.
3.- Los puentes eléctricos.
4.- Las interacciones hidrófobas.
Ejemplo: Mioglobina, Quimiotripsina, Cadena beta de la hemoglobina,
Carboxipeptidasa, Citocromo C, Insulina, entre otras.
3. Explique las diferencias entre aminoácidos esenciales y no esenciales e
indique cuáles son los esenciales (presente sus estructuras).

ESENCIALES NO ESENCIALES

Son aquellos que el propio organismo no
puede sintetizar por sí mismo, es decir,
que no los elabora y se deben obtenerse a
través de la dieta diaria, estos son;
arginina, histidina, isoleucina, leucina,
lisina, metionina, fenilalanina, treonina,
triptófano y valina.
Son los que puede fabricar o sintetizar
el propio cuerpo, estos son: alanina,
asparagina, aspartato, cisteina, glutamato,
glutamina, glicina, prolina, serina y
tirosina.

Aminoácidos esenciales
 4. Indique cómo se realiza la coagulación de la albumina. De ejemplo.

COAGULACIÓN DE PROTEÍNAS:
Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones
coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de coágulos al ser
calentadas a temperaturas superiores a los 70°C. o al ser tratadas con soluciones salinas,
ácidos, alcohol, etc. La coagulación de proteínas es un proceso irreversible y se debe a
su desnaturalización por los agentes indicados, que al atacar sobre la proteína la
desordenan por la destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria.
 Reconocer la presencia de proteína mediante la coagulación

 Numerar 2 tubos de ensayo

 Agregar 2 ml de albúmina de huevo a cada uno de los tubos
 Calentar lentamente el tubo 1, y observar la reacción
 Agregar 3 gotas de HNO3 conc. Al tubo 2 y observar la reacción.

Resultados del experimento:

 Exposición a temperaturas elevada y adición de HNO3(cc) o NaOH(cc) Las

cadenas de proteínas que hay en la clara de huevo se encuentran enrolladas
adoptando una forma esférica. Se denominan proteínas globulares.
Al freír o en este caso someter a calor la solución de albúmina de huevo, el calor
hace que las cadenas de proteína se desenrollen y se formen enlaces que unen
unas cadenas con otras. Asimismo, al añadir a esta albúmina de huevo a ácido
nítrico (HNO3) o hidróxido de sodio (NaOH) ocurre la misma reacción de
coagulación, pero en diferentes proporciones dependiendo del método utilizado
y del reactivo añadido.
Este proceso que se conoce con el nombre de desnaturalización se puede
producir de muy diversas maneras:
 Calentando: cocer o freír.
 Batiendo las claras.
 por medio de agentes químicos como alcohol, sal, acetona, HNO3(cc), NaOH(cc) ,
etc.

A TEMPERATURAS ALTAS CON 3 GOTAS DE HNO3 cc

SOLUCIÓN
DE En la albúmina la proteína presente Hubo una coagulación menor a la
ALBUMINA se comienza a agrupar formando sometida a altas temperaturas.
DE HUEVO una coagulación color blanco.