UNIVERSIDAD PERUANA UNION

FACULTAD DE INGENIERIA Y ARQUITECTURA

E.P- INGENIERIA AMBIENTAL

CURSO:
Microbiología ambiental

TEMA:
Informe del antibiograma

DOCENTE:
Blgo.Mblgo.Prstlgo.Mg: Oscar Rojas Sánchez

ALUMNO:

Mark Gabriel Pinchi del Aguila

Tarapoto, Morales, 2018

Para obtener el antibiograma se debe seguir los siguientes pasos:

ESTERILIZACIÓN DE MATERIALES

1) En primer lugar, para poder esterilizar los materiales, se debe lavar los materiales
con detergente o jabón líquido.

2) Después se los seca, por dos formas bien manualmente o metiéndolos al horno
esterilizador en una temperatura de 121C° durante 20 min.

3) Una vez secos los materiales, se los envuelve en papel kraf y se los mete al horno
esterilizador en una temperatura de 121C° durante 1 hora.
PREPARACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVOS (AGARES).

1) Para la preparación de los medios de cultivos, se necesitó pesarles de acuerdo al

agar que vamos a utilizar, se mezcla con agua destilada, luego paquearlos en la
placa Petri para que se solidifique. Se preparó agar MacConkey y EMB.
TOMA DE MUESTRAS

1) Para la toma de muestra, se debe buscar una persona que esté enfermo, ya que la
muestra debe ser patológica, pueden ser obtenidos en un laboratorio clínico, en
mi caso mi muestra fue de heces.

SIEMBRA DE LA BACTERIA

1) Para la siembra de bacteria, se utilizó un método que se llama siembra por estría,
primero se esteriliza el asa bacteriológica en el mechero.
2) Después se toma la muestra con el asa y se siembra en el Agar MacConkey,
después del sembrado se esteriliza nuevamente el asa bacteriológica, para que no
se contamine.

3) Después se envuelve con papel kraft la caja Petri con la siembra y colocarlo boca
abajo se los pone a encubar, a una temperatura de 37C° durante un día, para
obtener colonias microbianas, se tiene que definir si es lactosa (+): color rosado,
o lactosa (-): color translucida.
TINCIÓN GRAM

1) Para la tinción gram, se saca una colonia de tu muestra en la caja Petri.

2) Después se coloca una gota de en la lámina porta objetos y encima de

ello la colonia, se le agita a la colonia para que quede mejor en la lámina y
luego se deja secar.

3) Una vez seca, se hecho cristal violeta y se espera 2 min para luego ser lavado.
4) Se añade lugol, esperar 1 min para luego ser lavado con agua.

5) Después se decolora con alcohol-acetona durante 20 segundos y lavar con agua.

6) Se añade Safranina, esperar 1 min. Después se lava y se lo deja secar.

 7) Una vez todo el procedimiento, se procede a observar en el microscopio (100x).

DETERMINACIÓN DE COLIFORMES TOTALES

1) Primero se prepara el caldo peptona, para ponerlo en un tubo de ensayo tapa

rosca.

2) Ahora se coge un asa bacteriológica y un mechero para pasar una colonia de la

placa Petri con el agar MacConkey a otra placa Petri con el Agar EMB, y se
hace un sembrado por estría, recordar que la asa se esteriliza antes y después del
sembrado. Para ser incubado durante un día, en una temperatura de 37C°.
3) Despues de las 24 hrs, se procede a observar las colonias verdes metalicos( E.
coli) en la placa Petri.

4) Se utliza nuevamente el mechero y el asa bacteriologica para sacar una colonia

de E. Coli.

5) Luego se le coloca en el caldo peptona y se agita para que quede la colonia.

6) Se incuba el tubo de ensayo con el caldo peptona y las colonias mezcladas. Se los
incuba por 24 hrs.

7) Despues se prepara el Agar Muller-Hinton, para plaquearlo en la placa Petri.

8) Despues se hace el sembrado por Hisopado, para eso tenemos los hisopos
esterilizados, se sumerge en el caldo peptona y se empieza a frotar por todo el
medio de cultivo, se incuba en posicion invertida a 37C° por 24 hrs.
9) Al dia siguiente, se pone los antibioticos para el antibiograma, con una pinsa
esteril se coloca los discos de los antibioticos hacia la superficie del agar. Los
discos no deben estar a menos de 15 mm de los bordes de la placa, luego se
envuelve en papel kraf y se incuba en el horno a 37C° de 18 a 24 hrs .

10) Una vez completado las horas, se procede a observar los resultados
RESULTADOS

COLOR TAMAÑO CATEGORIAS

Blanco No hubo presencia de Resistente

halo

Amarillo 1,2 cm Intermedio

Verde 1,5 cm Intermedio

Morado 2 cm Moderadamente
sensible

Azul 2,6 cm Sensible

BIBLIOGRAFIA

 Josefa, M., & Yunta, R. (2009). El cuade r no de laboratorio.

 Qu, I. D. E. L., Roman, T. N., Informe, E., & La, E. (n.d.). Informes de laboratorio
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 Plan, E. (2016). Sobre La Resistencia a Los Antimicrobianos.
 Informe de laboratorio guía tipo (*). (2013), 1–2.
 Cercenado Emilia, C. R. (2008). Metodos Especiales Para Evaluar S uceptibilidad
Microbiana. Seimc.Org, 40. https://doi.org/10.1016/j.eimc.2016.05.008
 Vivar, N. (2010). Manual de procedimientos en anatomía patológica, 1–49.
 MAYE BERNAL R. MIGUEL GUZMAN U. (1984). ANTIBIOGRAMA E
DISCOS NORMALlZAClON DE LA TECNICA DE KIRBY-BAUER. Biomedica,
4(3 y 4). https://doi.org/10.7705/biomedica.v4i3-4.1891