ARTIKEL ILMIAH

PRAKTIKUM BIOKIMIA

IDENTIFIKASI ASAM AMINO PADA ALBUMIN TELUR DAN SAMPEL UNKNOWN

Oleh:

Ni Putu Fitria Atrisa (1213031068)

JURUSAN PENDIDIKAN KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS PENDIDIKAN GANESHA
SINGARAJA
2015
 IDENTIFIKASI ASAM AMINO PADA ALBUMIN TELUR DAN SAMPEL UNKNOWN
Ni Putu Fitria Atrisa*, 1213031068

*Mahasiswa Jurusan Pendidikan Kimia, Fakultas MIPA, Undiksha Singaraja

Jalan Udayana, Singaraja 81117 Telepon (0362) 25072

ABSTRAK

Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi jenis asam amino yang terdapat dalam larutan albumin telur,
mengidentifikasi asam amino tirosin, triptofan, glisin, fenilalanin, sistin dan sistein, serta mengidentifikasi asam-
asam amino yang terdapat dalam sampel unknown. Metode yang digunakan adalah metode pengujian secara
kualitatif melalui uji Millon, uji Hopkins-Cole, uji Ninhidrin, uji PbS dan uji Nitroprusida. Berdasarkan percobaan
diperoleh bahwa albumin telur ayam mengandung asam α-amino atau peptida yang memiliki gugus α-amino bebas,
asam amino tirosin, asam amino triptofan, dan asam amino yang mengandung unsur belerang yaitu sistein. Asam
amino yang memberikan hasil uji positif pada uji millon hanya asam amino tirosin. Asam amino yang memberikan
hasil uji positif pada reaksi uji Hopkins-Cole adalah asam amino triptofan. Asam amino tirosin, triptofan, glisin,
fenilalanin memberikan hasil uji positif dengan reaksi uji ninhidrin. Asam amino sistein yang mengandung gugus
sulfidril memberikan hasil uji positif dengan uji PbS dan nitroprusida. Sampel unknown yang digunakan dalam
percobaan ini adalah sampel A, F dan G. Berdasarkan uji yang dilakukan diperoleh bahwa sampel unknown A
merupakan asam amino sistein karena memberikan hasil positif pada uji nitroprusida. Sampel unknown F
merupakan asam -amino bebas atau peptide yang mengandung asam -amino tetapi bukan asam amino tirosin,
triptofan, prolin, hidroksi prolin, maupun sistein, karena hanya memberikan hasil positif pada uji ninhidrin. Sampel
G merupakan sampel yang tidak mengandung asam amino karena memberikan hasil uji negatif pada semua uji
identifikasi yang dilakukan.

Kata kunci : identifikasi, asam amino, albumin, zat unknown

ABSTRACT

This experiment purpose to identify the types of amino acids contained in the egg albumin solution, identifying the
amino acid tyrosine, tryptophan, glycine, phenylalanine, cystine and cysteine, as well as identifying the amino acids
contained in the unknown sample. The method used is qualitative testing methods by the Millon test, Hopkins-Cole’s
test, Ninhydrin test, PbS and nitroprusside test. Based on the experiments results showed that albumin solution
containing α-amino acids or peptides that have free α-amino group, amino acid tyrosine, tryptophan, and amino
acids containing sulfur element is cysteine. Amino acids which give a positive test result on the test millon is only
tyrosine. Amino acids which give a positive test result on Hopkins-Cole’s test reaction is tryptophan. Amino acid
tyrosine, tryptophan, glycine, phenylalanine give positive results with ninhydrin test reaction. Cystein have free
sulfydryl groups provide a positive test result with PbS and nitroprusside test. Unknown samples used in this
experiment is sample unknown A, F and G. Based on tests conducted showed that the unknown sample A is the
amino acid cysteine because it gives a positive result in the nitroprusside test. Unknown sample F is free -amino
acid peptide containing or -amino acids but not the amino acid tyrosine, tryptophan, proline, hydroxy proline, and
cysteine, because its only give positive results in the ninhydrin test. Samples G is a sample that does not contain the
amino acid because it gives a negative test results on Millon test, Hopkins-Cole test, Ninhydrin test, PbS test and
Nitroprusside test.
Keywords: identification, amino acids, unknown samples.

PENDAHULUAN

Protein merupakan polimer yang sangat Secara umum, kekurangan protein akan
panjang yang terdiri dari asam-asam amino mengakibatkan terhambatnya pertumbuhan sel
yang bergabung membentuk ikatan peptida. dan jaringan tubuh sehingga sistem tubuh tidak
akan berjalan optimal. Kekurangan asam
amino spesifik juga akan menimbulkan
dampak yang berbeda bagi tubuh. (Anonim,
2014)
Asam amino dalam tubuh manusia
dikelompokkan menjadi dua, yaitu asam
amino non-esensial dan asam amino esensial.
Asam amino non-esensial dapat disintesis oleh
tubuh manusia. Contoh asam amino non-
esensial adalah asam amino Tirosin, Sistein,
Serin, Prolin, Glisin, Asam Glutamat, Asam
aspartat, Arginin, Alanin, Histidin, Glutamin
dan Asparagin. Asam amino esensial tidak
dapat disintesis oleh tubuh. Contoh asam
amino esensial : asam amino Triptofan,
Treonin, Metionin, Lisin, Leusin, Isoleusin,
Fenilalanin dan Valin. baik asam amino non-
esensial maupun esensial keduanya sama-sama
diperlukan oleh tubuh. Asam amino esensial
tidak dapat disintesis oleh tubuh. Oleh karena
itu asupan asam amino dapat diperoleh dari
makanan yang kita makan sehari-hari.
Makanan yang banyak memiliki kandungan
CH 3
H O
N C
H OH
R
Gambar 1. Struktur Umum Asam -Amino
Gugus karboksil menyebabkan asam α-amino
memberikan sifat asam dan gugus amino
memberikan sifat basa. Asam-asam amino
Tabel 1. Pengelompokan asam amino berdasarkan sifat gugus R
Sifat Gugus R
Polar bermuatan (-/+)
Polar tidak bermuatan
Non Polar
Selain klasifikasi berdasarkan kemiripan
sifat rantai sampingnya, asam amino juga
dapat diklasifikasikan menjadi delapan
asam amino antara lain kacang kedelai,
yoghurt, tahu, tempe, susu, daging sapi, daging
ayam, dan telur ayam. (Harjana, 2013).
Asam amino merupakan monomer dari
protein dengan massa molekul rendah (100-
200 Da) yang setidaknya mengandung satu
gugus karboksil (-COOH) dan satu gugus
amino (-NH2). (Redhana & Siti, 2004). Protein
dari semua spesies tersusun atas 20 asam
amino standar, yang hampir semuanya
merupakan asam α-amino kecuali prolin dan
hidroksiprolin. Perbedaan asam amino terletak
pada gugus R (rantai samping) yang terikat
pada atom C-α selain gugus karboksil dan
gugus amino. Perbedaan gugus R ini dapat
digunakan untuk meramalkan sifat-sifat suatu
asam amino, begitu juga sebaliknya
berdasarkan sifat-sifat yang teridentifikasi
akan dapat ditentukan gugus R yang
terkandung dalam asam amino tersebut
sehingga jenis asam amino dapat diketahui
(Redhana & Siti, 2003).
C
dapat diklasifikasikan menjadi beberapa
kelompok berdasarkan kemiripan sifat-sifat
rantai sampingnya yaitu,
Contoh Asam Amino
Lys (+), Arg (+), His (+), Asp (-), Glu(-)
Ser, Thr, Asn, Gln,Tyr, Cys
Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Met, Pro, Phe, Trp
(Redhana dan Siti , 2004)
kelompok berdasarkan strukturnya (tabel
2). Klasifikasi ini didasarkan pada sifat
kimia dari gugus R-nya sehingga akan
memudahkan dalam mengingat sifat-sifat umum dari setiap asam amino.

Tabel 2. Klasifikasi asam amino berdasarkan strukturnya

Sifat Gugus R Contoh Asam Amino

Alifatik Gly, Ala, Val, Leu, Ile
Aromatik Phe, Try, Trp
Hidrosiklik Ser, Thr
Karboksiklik Asp, Glu
Mengandung Sulfur Cys,Met
Imino Pro, Hyp
Amino Lys, Arg
Amida Asn, Gln
(Redhana dan Siti , 2003)

Asam α-amino dan turunannya ikut serta
dalam beragam fungsi sel, seperti transmisi
saraf dan biosintesis porfirin, purin,
pirimidin, dan urea. Polimer pendek asam-
asam amino yang disebut peptida
melaksanakan peran menonjol dalam sistem
neuroendokrin sebagai hormon, hormone-
releasing factors, neuromodulator atau
neurotransmitter (Murray, 2009). Asam
amino juga memiliki peranan yang penting
bagi kehidupan dalam proses metabolisme,
pembentukan bagian coenzymes seperti di S-
adenosilmethionine, atau sebagai precursor
untuk biosintesis dari molekul seperti
hemoglobin (Tika, 2010).
dalam metabolisme. Oleh karena itu, perlu
dilakukan suatu analisis tentang keberadaan
asam-asam amino di dalam protein. Analisis
keberadaan asam amino dalam suatu protein
dapat dilakukan berdasarkan sifat-sifat asam
amino dan rantai sampingnya. Analisis ini
dapat dilakukan dengan metode kualitatif
maupun kuantitatif. Metode analisis kualitatif
dilakukan untuk mengetahui keberadaan
suatu asam amino dalam suatu protein.
Metode kuantitatif dilakukan untuk
menentukan kuantitas atau jumlah kandungan
asam amino di dalam suatu protein. Metode
analisis yang biasanya digunakan disajikan
dalam tabel berikut.

Berdasarkan uraian di atas dapat dilihat

bahwa asam amino berperan sangat penting
 Tabel 3. Uji Kualitatif Asam Amino

Asam amino yang

Reaksi Uji Reaksi/Reagen Warna
dideteksi
Millon HgNO3 dalam asam nitrat Tirosin (Tyr) Merah
Asam Glioksilat dalam H2SO4 Cincin
Hopkins-Cole Triptofan (Trp)
pekat ungu
Asam -amino dan
Ninhidrin Ninhidrin peptide yang memiliki Biru
gugus -amino bebas.
Asam amino yang dapat Endapan
PbS Pb-Asetat
melepaskan unsur S hitam
Natrium nitroprusida dalam
Nitroprusida Sistein (Cys) Merah
NH3 encer
(Tika, 2010)

Pada uji Millon, reagen yang digunakan adalah
larutan ion merkuri dan ion merkuro dalam asam
nitrat dan asam nitrit. Warna merah yang terbentuk
adalah garam merkuri dari tirosin yang ternitrasi.
Reagen Hopkins-Cole berupa asam glioksilat. Pada
uji Hopkins-Cole, terjadi reaksi yaitu triptofan
berkondensasi dengan aldehid dari asam glioksilat
dalam suasana asam sulfat membentuk kompleks
berwarna (Tika, 2010).
Uji ninhidrin positif untuk semua asam amino.
Reaksi asam -amino dengan ninhidrin
menghasilkan menghasilkan kompleks berwarna
biru, sedangkan reaksi asam amino prolin dan
hidroksi prolin menghasilkan kompleks berwarna
kuning.
Uji PbS menggunakan reagen Pb-Asetat dan
NaOH. Ketika bereaksi dengan asam amino yang
mengandung unsur S, reagen ini menghasilkan
endapan berwarna hitam.
Uji nitroprusida menggunakan reagen natrium
nitroprusida dalam ammonium hidroksida encer.
Ketika reagen nitroprusida bereaksi dengan asam
amino sistein, akan dihasilkan kompleks berwarna
merah.
MATERI DAN METODE
Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan adalah tabung reaksi
(pirex), pipet tetes, corong, gelas kimia (25 mL,
100 mL, 250 mL) pipet volume, gelas ukur (10
mL), labu Erlenmeyer (100 mL, 250 mL), spatula,
batang pengaduk, pembakar spritus, korek api, dan
kaca arloji. Bahan-bahan yang digunakan adalah
albumin telur, larutan Pb-asetat, reagen Millon,
reagen Hopkins-Cole, reagen Ninhidrin, larutan
natrium nitroprusida, larutan amonia, asam sulfat
pekat, aquades, sampel unknown A, F dan G (telah
disediakan laboran), asam amino tirosin,
tryptophan, glisin, fenilalanin, sistein, dan sistin.
Prosedur kerja
Uji Millon
Tiga mililiter larutan protein, asam amino
tirosin, tryptophan, glisin, fenilalanin, sistein,
sistin dan sampel unknown A, F dan G
ditambahkan 5 tetes reagen Millon kemudian
dipanaskan. Perubahan warna yang terjadi
kemudian diamati.
Uji Hopkins-Cole
Dua mililiter larutan larutan protein, asam
amino tirosin, tryptophan, glisin, fenilalanin
dan sampel unknown A, F, G ditambahkan 2
mL reagen Hopkins-Cole kemudian
ditambahkan 5 mL H2SO4 sedikit demi sedikit.
Tabung reaksi diputar perlahan sampai
terbentuk warna ungu.
Uji Ninhidrin
Sebanyak 0,5 mL larutan ninhidrin 0,1 %
ditambahkan pada 3 mL larutan larutan
protein, asam amino tirosin, tryptophan, glisin,
fenilalanin dan sampel unknown A, F, G
kemudian dipanaskan sampai mendidih.
Larutan protein, asam amino tirosin,
tryptophan, glisin, fenilalanin dan sampel
unknown A, F, G ditambahkan 10 tetes larutan
natrium nitroprusida 1% dan 0,5 mL amonium
hidroksida.perubahan warna yang terjadi
diamati.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Uji PbS
Sebanyak 2 mL larutan NaOH ditambahkan
pada 5 mL larutan protein, asam amino tirosin,
tryptophan, glisin, fenilalanin dan sampel
unknown A, F, G kemudian ditambahkan 2
tetes Pb-asetat dan dipanaskan pada penangas
air. Perubahan warna yang terjadi diamati.
Berdasarkan percobaan yang dilakukan pad
alarutan protein, asam amino tirosin,
tryptophan, glisin, fenilalanin, sistin, sistein dan
sampel unknown A, F, G, yang telah dilakukan,
diperoleh hasil yang disajikan dalam tabel
berikut.
(tabel 4).

Uji Nitroprousida

Tabel 4. Hasil Uji Identifikasi Asam Amino

Sampel Uji Millon Uji Hopkins- Uji Ninhidrin Uji PbS Uji natrium
Cole nitroprusida
Albumin + + + + +
(endapan (cincin ungu) (larutan biru)
merah)
Tirosin + - + - Tidak dilakukan
(endapan (larutan biru)
merah)
Triptofan - + + Tidak Tidak dilakukan
(cincin ungu) (larutan biru) dilakukan
Glisin - - + Tidak Tidak dilakukan
(larutan biru) dilakukan
Fenilalanin - - + Tidak Tidak dilakukan
(larutan biru) dilakukan
Sistin - Tidak dilakukan Tidak Tidak Tidak dilakukan
dilakukan dilakukan
Sistein - Tidak dilakukan Tidak + +
dilakukan
A - - - - +
F - - + - -
G - - - - -

Uji Millon
Uji Millon merupakan uji yang identik untuk
asam amino tirosin (Tyr). Hal ini disebabkan
hanya asam amino tirosin yang memiliki rantai
samping yang berupa gugus fenolik. Jika
kedalam larutan yang mengandung asam amino
dengan rantai samping gugus fenolik (Tirosin)
ditambahkan reagen Millon (HgNO3 dalam
asam nitrat) maka akan segera terbentuk
endapan putih yang jika dipanaskan akan
berubah menjadi warna merah. Endapan yang
terbentuk merupakan garam kompleks dari
tirosin yang ternitrasi (Frieda et al.,2002). Uji
Millon terhadap asam amino tirosin,
menunjukkan hasil positif dengan terbentuknya
endapan merah setelah dipanaskan (gambar 2c).
Sementara itu, larutan fenilalanin, glisin,
triptofan, sistin dan sistein menunjukkan hasil
negatif dengan tidak terbentuknya endapan
merah setelah dipanaskan dan larutan tetap
bening tak berwarna.(gambar 2a, 2b, 2d, 2e dan
2f).

a b c d e f
Gambar 2. Terbentuk endapan merah pada reaksi reagen Millon dengan tirosin (c), tidak terbentuk
endapan merah pada glisin (a), fenilalanin (b), triptofan (d), sistin (e) dan sistein (f).

Uji Millon terhadap albumin pada percobaan dan dipanaskan (gambar 3). Hal ini
didapatkan hasil positif yaitu menghasilkan menunjukkan bahwa pada albumin telur
endapan merah dari garam kompleks tirosin terdapat asam amino tirosin.
ternitrasi setelah ditambahkan reagen Millon

Gambar 3. Terbentuk endapan merah pada reaksi reagen Millon dengan larutan albumin
telur

Uji terhadap sampel unknown A, F dan G menandakan bahwa diantara ketiga sampel ini
menunjukkan hasil negatif dimana tidak tidak ada sampel yang mengandung asam
diperoleh endapan merah (gambar 4). Hal ini amino tirosin.

a b c

Gambar 4. Tidak terdapat endapan merah pada reaksi reagen Millon dengan sampel
unknown A (a), F (b) dan G (c)
 Penambahan reagen Millon pada zat yang yang merupakan garam kompleks dari tirosin
mengandung asam amino tirosin akan yang ternitrasi serta HgO yang terbentuk sesuai
menyebabkan terbentuknya endapan merah persamaan reaksi berikut :

H H H H
O O
HO C C + Hg + HO C C Hg +
(aq)

H NH 2
OH O-
H NH 2
Tirosin (aq) kompleks garam tirosin dan Hg +(s)
(endapan putih)

H H H H
O O
HO C C + Hg + + HNO 3 O 2N C C Hg 2+
(aq)
O- O-
H NH 2 H NH 2

kompleks garam tirosin dan Hg +(s) asam nitrat (aq) kompleks garam tirosin tirosin ternitrasi (s)
(endapan merah)
Gambar 5. Persamaan Reaksi Uji Millon

Uji Hopkins-Cole

Uji Hopkins-Cole digunakan untuk pekat. Warna ungu tersebut merupakan hasil
mengidentifikasi ada atau tidaknya asam amino kondensasi triptofan dengan gugus aldehida
triptofan dalam larutan sampel yang dari asam glioksilat dalam suasana asam sulfat.
diidentifikasi. Uji ini akan bernilai psotif jika Reaksi pada uji Hopkins-Cole dapat dilihat
terbentuk cincin ungu setelah sampel pada gambar 6.
ditambahkan reagen hoppkins-cole dan H2SO4

H2 COOH H H
C H H
C H O
C C H2SO4 COOH
NH 2 H 2O (l)
+ NH +
C
N HO O H
N
H H
H
Triptof an(aq) asam glioksilat(aq) (cincin ungu)

Asam 2,3,4,5-Tetrahidro--
Karbolnil-4-Karboksilat(aq)

Gambar 6. Persamaan Reaksi Uji Hopkins-Cole

 Hasil uji pada larutan asam amino cincin ungu (gambar 7b). sementara itu pada
tirosin,triptofan, glisin dan fenilalanin hanya larutan tirosin, glisin, dan fenilalanin tidak
menunjukkan hasil uji positif pada asam amino terbentuk cincin ungu dan larutan tetap bening
triptofan. Pada asam amino triptofan terbentuk tak berwarna (Gambar 7a, 7c dan 7d).

a b c d
Gambar 7. Terbentuk cincin ungu pada reaksi antara reagen Hopkins-Cole dengan triptofan (b), tidak
terbentuk cincin ungu pada tirosin (a), glisin (c) dan fenilalanin (d)

Hasil uji pada albumin telur ayam terbentuknya cincin ungu setelah direaksikan
menunjukkan hasil positif terhadap uji dengan reagen Hopkins-cole dan asam sulfat
Hopkins-Cole yang ditunjukkan dengan pekat (gambar 8).

Gambar 8. Terbentuk Cincin Ungu pada Reaksi antara Reagen Hopkins-

Cole dengan Larutan Albumin Telur

Hal ini mengindikasikan bahwa dalam negatif karena tidak terbentuk cincin ungu
albumin telur ayam mengandung asam amino (gambar 9). Dengan demikian dapat
triptofan. Sedangkan untuk pengujian sampel - disimpulkan bahwa sampel unknown A, F dan
unknown A, F dan G menunjukkan hasil yang G bukan asam amino triptofan.

a b c

Gambar 9. Tidak Terbentuk Cincin Ungu pada Reaksi antara Reagen Hopkins-Cole dengan
Sampel Unknown A(a), F (b) dan G (c)
 .

Uji Ninhidrin

Uji ninhidrin positif untuk semua asam -  molekul ninhidrin yang bereaksi dengan
amino yang diindikasikan dengan terbentuknya amonia yang dilepaskan pada oksidasi asam
kompleks berwarna biru atau ungu. Kompleks amino. Persamaan reaksinya dapat dilihat pada
berwarna yang terbentuk mengandung dua gambar 10.

O O
NH 2 O H
OH
+ R C C + NH 3(aq) + CO2(g) + RCHO(aq)
OH OH OH (aq)
(aq) H (aq)
O O
ninhidrin ninhidrin tereduksi

O O O O
OH H H HO
+ N N
+
OH H (aq)
H (aq)
(aq)
O (aq) O O O
ninhidrin amoniak ninhidrin tereduksi kompleks berwarna biru

Gambar 10. Persamaan Reaksi Uji Ninhidrin

Hasil uji ninhidrin terhadap asam amino tirosin, berwarna biru. (gambar 11). Hal ini
triptofan, glisin dan fenilalanin menunjukkan menunjukkan bahwa keempat sampel asam
hasil positif dengan terbentuknya larutan amino memiliki gugus -amino bebas.

a b c d

Gambar 11. Terbentuk Larutan Biru pada Reaksi Ninhidrin dengan Asam Amino Tirosin (a), Triptofan (b),
Glisin (c) dan Fenilalanin (d)
Hasil uji ninhidrin pada albumin menunjukkan berwarna biru (gambar 12 a). Pengujian sampel
uji positif dengan terbentuknya kompleks F menunjukkan hasil yang positif yang
 diindikasikan dengan terbentuknya larutan (gambar 12 b, c dan d). Hal ini menunjukkan
berwarna biru tua, sedangkan untuk sampel A sampel F mengandung asam -amino
dan G uji bernilai negatif karena larutan tetap sedangkan sampel A dan G tidak.
berwarna bening dan tidak berubah warna

a b c d
Gambar 12. Terbentuk Larutan Berwarna Biru pada reaksi Ninhidrin dengan Albumin Telur (a) dan Sampel Unknown F (c),
Tidak Terbentuk Larutan Berwarna Biru pada Reaksi Ninhidrin dengan Sampel Unknown A (b) dan Sampel
Unknon G (d).

Uji PbS

Uji PbS merupakan uji yang identik untuk asam
amino sistein. Asam amino sistein merupakan
asam amino yang memiliki gugus sulfidril (-
SH) yang bebas sehingga dapat dengan mudah
dibebaskan dengan kehadiran NaOH. NaOH
akan membebaskan gugus sulfidril (-SH)
menjadi ion-ion Sulfida. Penambahan larutan
Pb-asetat ditujukan agar ion-ion sulfida yang
terbebas berikatan dengan ion Pb2+ dari Pb-
asetat membentuk PbS yang berwarna hitam
(Redhana & Siti,2003). Uji positif ditandai
dengan terbentuknya endapan hitam PbS.
Persamaan reaksinya sebagai berikut.
Pb2+(aq) + S2-(aq)  PbS(s)
Uji terhadap larutan albumin menunjukkan
hasil positif yang ditandai dengan terbentuknya
endapan hitam PbS (gambar 13a). Hal ini
berarti dalam albumin terdapat asam amino
sistein. Uji terhadap sampel A, F dan G
memberikan hasil negatif yang ditandai dengan
tidak terbentuknya endapan hitam (gambar 13b,
13c dan 13d).

a b c d
Gambar 13. Terbentuk Endapan Hitam setelah larutan albumin telur direaksikan dengan NaOH, Pb-asetat dan
dipanaskan (a), tidak terbentuk endapan hitam setelah sampel unknown A(b), F(c) dan G(d) direaksikan
dengan NaOH, Pb-asetat dan dipanaskan.
 Uji Nitroprusida
Uji natrium nitroprusida merupakan uji yang
digunakan untuk mengidentifikasi asam amino
sistein, peptida, maupun protein yang
mengandung gugus -SH (Redhana &
[Fe3+(CN)5NO]2-(aq) + 2NH4OH(aq) + HS CH2 CH COOH
NH2
Dari reaksi di atas dapat dilihat penambahan
amonia berfungsi sebagai kation kompleks
yang nantinya menggantikan posisi Na+ sebagai
kation. Penambahan amonia hendaknya
berlebih karena penambahan amonia secara
kurang berlebih dapat membuat amonia
bertindak sebagai ligan. Dalam albumin telur
didapatkan hasil uji positif terhadap
nitroprusida yang ditunjukkan dengan
terbentuknya larutan berwarna merah keunguan
(gambar 14a). Hal ini mengindikasikan bahwa
a b
Gambar 14. Terbentuk larutan merah pada reaksi antara natrium nitroprusida dengan larutan albumin telur (a) dan sampel
unknown A(b), tidak terbentuk larutan merah pada reaksi antara natrium nitroprusida dengan sampel unknown F
(c) dan G (d).
SIMPULAN
Berdasarkan pembahasan di atas dapat
disimpulkan bahwa asam amino yang
memberikan hasil uji positif pada uji Millon
adalah asam amino tirosin. Asam amino yang
memberikan hasil uji positif pada uji Hopkins-
Siti,2003). Asam amino sistein jika direaksikan
dengan natrium nitroprusida akan
menghasilkan kompleks yang berwarna merah
menurut persamaan reaksi berikut.
(aq) →(NH4)2+[Fe2+(CN)5NOS-CH2-
CH(NH2)COOH]2-(aq) (kompleks
berwarna merah) + 2OH-(aq)
dalam albumin terdapat asam amino sistein.
Uji sampel F dan G memberikan hasil
negatif dengan natrium nitroprusida karena
tidak terbentuk kompleks berwarna merah
(gambar 14c dan 14 d). Sedangkan untuk
sampel A memberi hasil positif yang ditandai
dengan terbentuknya kompleks berwarna merah
(gambar 14b). Dengan demikian dapat
disimpulkan bahwa sampel F dan G bukan
asam amino sistein. Sedangkan sampel A
adalah asam amino sistein.
c d
Cole adalah asam amino triptofan. Albumin
telur mengansung asam amino tirosin, triptofan,
sistein dan asam amino yang memiliki gugus -
amino bebas atau peptide yang memiliki gugus
-amino bebas. Sampel unknown A merupakan
asam amino sistein yang ditunjukkan dengan
hasil uji positif pada uji nitroprusida. Sampel
unknown F adalah asam amino yang memiliki
gugus -amino bebas atau peptide yang
memiliki gugus -amino bebas. Sampel
unknown G tidak mengandung asam amino
karena memberikan hasil uji negatif pada uji
Millon, Hopkins-Cole, Ninhidrin, PbS dan
Nitroprusida.
UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada
Dr. I Nyoman Tika, M.Si., sebagai dosen
pengampu mata kuliah Praktikum Biokimia,
Kadek Dewi Wirmandianthy, S.Pd selaku
asisten dosen, dan I Dewa Subamia selaku
laboran di Jurusan Pendidikan Kimia atas
masukan dan sarannya sehingga percobaan ini
dapat dilaksanakan dengan baik.
DAFTAR PUSTAKA
Anonym. 2014. Manfaat Asam Amino dalam
Pembentukan Otot Tubuh. Dapat
diakses pada : Singaraja: IKIP Negeri Singaraja.
http://duniafitnes.com/supplement/manf
aat-asam-amino-dalam-pembentukan-
otot-tubuh.html . diakses pada tanggal
28 Februari 2015.
Ariwulan, Dyah R. 2012. Reaksi Uji terhadap
Asam Amino. Dapat diakses pada :
http://nightray13-
kuro.blogspot.com/2012/01/biokimia-
perc2-reaksi-terhadap-uji.html. diakses
pada tanggal 1 Maret 2015.
Fessenden, Ralph J., Fessenden, Joan S. 2010.
Dasar-Dasar Kimia Organik terjemahan
dari Fundamental of Organic Chemistry
oleh Sukmariah Maun, Kamianti Anas,
dan Tilda S. Sally. Tangerang:
BINARUPA AKSARA.
Frieda Nurlita, dkk. 2002. Kimia Organik II.
Singaraja : Institut Keguruan dan Ilmu
Pendidikan Negeri Singaraja.
Harjana, Dadan. 2013. Sumber Protein. Dapat
diakses pada :
http://manfaatnyasehat.blogspot.com/20
13/06/sumber-protein.html. Diakses
pada tanggal 28 Februari 2015.
Redana, I Wayan. 2004. Buku Ajar Biokimia
jilid I. Singaraja: IKIP Negeri Singaraja.
Redana, I Wayan & Siti Maryam. 2003.
Penuntun Praktikum Biokimia.
S, Agus. 2013. Uji Asam Amino. Dapat diakses
pada :
http://sanzdinger.blogspot.com/2013/05/
uji-asam-amino.html. diakses pada
tanggal 28 Februari 2015.