GUÍA DE PRÁCTICAS

LABORATORIO x TALLER SIMULACIÓN CAMPO

CARRERA: Ingeniería Bioquímica

ASIGNATURA: Microbiología II
ALUMNOS: Aldair Arrobas, Elizabeth Falcón
DOCENTE: Dr. Carlos Rodríguez
NIVEL: 4 PARALELO: U
CICLO ACADÉMICO: MARZO – AGOSTO 2018
PRÁCTICA N°: 2
TEMA: TIPOS DE SIEMBRA Y AISLAMIENTO DE MICROORGANISMO.

1. OBJETIVOS:

GENERAL:

 Familiarizarse en la preparación de medios de cultivo y aislamiento de

microorganismos.

ESPECÍFICOS:
 Obtener un cultivo puro utilizando la técnica de aislamiento por estría simple y
compuesta reconociendo las diferencias entre estas.
 Evidenciar el cultivo aislado a partir de una muestra preexistente y su
importancia.
 2. RESULTADOS

Tabla 1: Difusión en placa agar natural

DILUCION Imagen Nº colonias UFC\g

𝟏𝟎−𝟒

276 2,76 x106

𝟏𝟎−𝟓

42 4,2 x106

𝟏𝟎−𝟔

8 No calculable

Tabla 2: Vertido en placa agar natural

DILUCION Imagen Nº colonias UFC\g

𝟏𝟎−𝟒

>300 No calculable

𝟏𝟎−𝟓

>300 No calculable

𝟏𝟎−𝟔

34 34 x106
 Tabla 3: Estría simple y compuesta

Estría simple Estría compuesta

3. DISCUSIÓN

El crecimiento de los microorganismos se manifiesta de diferentes formas, dependiendo

del tipo de dilución y siembra realizada nos permite cultivar los microorganismos ya que
posee los nutrientes necesarios para su desarrollo ya que se encuentra en un medio
favorable para su crecimiento (Carpenter, 2012).

En el experimento realizado se observó que a mayor concentración aumenta el

desarrollo de los microorganismos como se visualiza en tabla Nº 1 y Nº 2 tanto para el
vertido en placa como para difusión, las formas observadas fueron muy variadas
(circular, irregular), mayor tamaño y de color amarillento más acentuado y otras menos,
estas también varían según el tipo de siembra ya que en los resultados se puede
apreciar aquellas que están en la superficie tienen distintas características a las colonias
que se desarrollan en el interior, bajo la superficie del agar como es el caso del vertido
en placa en las que se desarrollaron colonias muy pequeñas incluso en las imágenes es
difícil de observarlas es posible que los microorganismos presentes sean anaerobios ya
que esta técnica es ideal para microorganismos de este tipo (Calderón, 2011).

Según un análisis cualitativo se observa claramente que las diluciones permiten obtener
cada vez menos colonias y más separadas unas de otras y en el análisis cuantitativo a
realizar el reconteo de las colonias tal vez existieron errores mínimos que algunas
colonias eran muy pequeñas por lo cual su se dificultó su visualización sin embargo el
cálculo de UFC/g se realizó sin dificultad, cabe recalcar que el cálculo no fue posible en
todas ya que no se encuentran en el rango de 30 a 300 descritas en la tabla 1 y 2.

Al aislarse las colonias de un cultivo mixto por estría simple y compuesta durante un
tiempo de incubación de 24 a 48 horas, se logra observar un crecimiento satisfactorio
obteniéndose un cultivo puro, según (De la Torre, 2014) el cual nos dice los cultivos
puros son aquellos que contienen un solo tipo de microorganismo, que provienen de una
sola célula que al microscopio deben tener un aspecto común, ser bioquímica y
fisiológicamente iguales como se visualiza en la tabla Nº 3, sin embargo la estría simple
2 no se observó crecimiento posiblemente debido a que el aza no estaba completamente
fría al tomar la biomasa por lo que el microorganismo pudo morir.

En la inoculación por estría simple se observó la formación de colonias de la muestra,

no hay diferencia de los colores pero si de la forma de las colonias. En la inoculación por
estría compuesta cada célula asilada se multiplicó formando una colonia independiente,
cada colonia representa un cultivo puro (Quiroga, 2010)

4. CONCLUSIONES
 Se ha podido asimilar en la preparación de medios de cultivo y aislamiento de
microorganismos con sus respectivas disoluciones, teniendo en cuenta las
condiciones fisiológicas para el crecimiento de microorganismos.
 En esta práctica se logró obtener colonias separadas y reconocer las técnicas de
aislamiento, mediante estriado simple aprendiendo a utilizar las diferentes
técnicas de aislamiento siendo una de ellas la estría simple que es una
inoculación en zig-zag tomada de la muestra patrón en cambio en la inoculación
por estría compuesta se diferencia se extendiendo formando un pentágono sobre
la superficie.
 El crecimiento fue satisfactorio obteniéndose un cultivo puro lo cual es importante
ya que estos ayudará posteriores estudios como conocer las caracteristicas
morfologicas, propiedades de tinción, actividad bioquimica, etc.

5. RECOMENDACIONES
 Evitar que se formen burbujas pipeta, y luego de inocular eliminar las puntas ya
que el líquido que queda en ella producirá errores.
 Observar que el medio y el inóculo se encuentren completamente
homogenizados, adicional a esto flamear el tubo para dilución antes y después de
tomar la alícuota.
  Tener cuidado al momento de esterilizar el aza ya que debe enfriarse antes de
coger la muestra debido a que si no está completamente fría se puede matar al
microorganismo.

6. BIBLOGRAFIA

Calderón, M. (2011). “Cómo se desarrollan las colonias en microbiología”. Recuperado

el 25 de abril del 2018 de: http://www.ehowenespanol.com/desarrollan-colonias-

microbiologia-info_305023/

De La Torre, H. (2014). Cultivo-puro. Recuperado el 25 de abril del 2018 de:

https://es.scribd.com/doc/110903216/Cultivo-puro

Quiroga, J. (2010). Introducción a la Microbiología. Recuperado el 25 de abril del 2018 de

de: http://www.monografias.com/trabajos16/microbiologia/microbiologia.shtml

Carpenter, P.(2012).MICROBIOLOGIA. Recuperado el 25 de abril del 2018 de

http://www.bdigital.unal.edu.co/4999/1/albertorojastrivino.2011.pdf

7. ANEXOS

𝑼𝑭𝑪 𝑵𝒄 𝒙 𝑭𝑫
=
𝒈 𝑽𝒊
𝑵𝒄: Número de colonias
𝑭𝑫: Factor de dilución
𝑽𝒊: Volumen inoculado

VERTIDO EN PLACA 10-6 DIFUSIÓN EN PLACA 10-4

𝑈𝐹𝐶 34 𝑥 106 𝑈𝐹𝐶 276 𝑥 104

= =
𝑔 1𝑚𝐿 𝑔 1𝑚𝐿
𝑈𝐹𝐶
= 3,4x109 𝑈𝐹𝐶
𝑔
= 2,7x107
𝑔