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[DETERMINAION DE FOSFATOS DE EL SUELO] 4 de mayo de 2015

Determinación del fosforo disponible en el suelo


Método de olsen (bicarbonato de sodio de 0.5 N, PH 8,5)

Objetivos

 Comprender la determinación del fosforo disponible, p asimilable por las


plantas.

 Interpretar los resultados obtenidos.

Generalidades

La determinación del fosforo del suelo resultan de gran interés, dada la importancia
de este nutriente para las plantas. El fosforo es absorbido por las plantas como
unión de h2po4- y/o h2po4-2. Para estimar las fracciones de los nutrientes en el
suelo que se consideran asimilables por las plantas, se han propuesto numerosas
soluciones extractoras. Sin embargo, estas soluciones no tienen una aplicación
universal para todos los tipos de suelos, ya que además de sufrir interacción con
diferentes propiedades de estos, no extraen una forma química definida del
nutriente que se está analizando. En consecuencia, antes de adoptar el uso de una
solución determinada se recomienda efectuar estudios de correlación de métodos,
es decir conducir una investigación integrada de invernadero y laboratorio con el
propósito de seleccionar aquel método que para los suelos predominantes en el área
de influencia del laboratorio, estime en forma proporcional los niveles de los
elementos que van a ser utilizados por las plantas.
Actualmente existen una gran variedad de soluciones extractoras, las cuales
extraen cantidades diferentes de los nutrientes en una misma muestra de suelo
según sea la composición química de la solución extractora. En función de lo anterior,
es absolutamente indispensable que al reportar resultados de análisis de suelo se
cite o señale la solución extractora usada.
Existen soluciones extractoras que permiten determinar, en un mismo extracto, más
de tres nutrientes. Por ejemplo, la solución extractora de Morgan es conocida como
solución extractora universal ya que en el extractora universal ya que en el extracto
obtenido a partir de ella se puede determinar P, Ca micro elementos, entre todos.
También existen las llamadas soluciones extractoras específicas, ya que en el
extracto de suelo obtenido a partir de ellas se puede determinar solamente uno, dos
y hasta tres nutrientes.
Se citan, por ejemplo, la solución extractora de olsen, el acetato de amonio, etc.

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El basamento teórico de todos los métodos usados para la determinación de los


elementos nutritivos en el suelo, en forma “DISPONIBLIDADO ASIMILANTE” para
las plantas, consiste en mezclar una determinada cantidad de suelo, con un volumen
conocido de una solución extractora. Agitar y filtrar. Posteriormente, determinar el
filtrado, el elemento o elementos de nutrientes objeto de la determinación. Este
filtrado se denomina “EXTRACTO DE SUELO” .una vez obtenida la cantidad de
nutriente en el extracto de suelo, esta deben ser trasformada a CANTIDAD DEL
NUTRIMENTO EN EL SUELO”

METODOS PARA LA DETERMINACION DE FOSFORO EN LOS SUELOS

En el caso del fosforo, se utilizan varias soluciones extractoras, siendo las más
utilizadas, la mezcla de NH4F 1N + HCL 0.5N (método de bray kurtz) y el NAHCO3
(Método de olsen).

BASAMENTO TEÓRICO DEL MÉTODO DE OLSEN

El fosforo en los suelos proviene, probablemente, de la intemperización de las rocas


que contienen el mineral apatito Ca10 (PO4)6 (P, CL OH)2; pudiendo presentarse en
los suelos como flúor, cloro, o hidroxiapatito, respectivamente. También se puede
encontrar el fosforo de hierro y aluminio, en combinación con la fracción arcilla o en
combinación orgánicas. Debido a la diversidad de los compuestos de fosforo y a los
tipos de reacciones que sufren, el comportamiento del mismo varía según se trate de
suelos ácidos suelos calcáreos.
El método de olsen es usado en suelos neutros a alcalinos y utilizan como solución
extractora el NaHCO3, el cual tiene la función de separar el calcio como carbonato
de los fosfatos que las contienen, dejando el fosforo en solución. Es necesario
obtener un extracto trasparente e incoloro, por lo cual se le añade carbón activado
a la suspensión de suelo y luego se filtra sobre papel watman n° 40. En el extracto o
filtrado así obtenido se encuentra, en solución iones fosforo y de potasio.
Para cuantificar el fosforo disponible se hace uso de técnicas foto colorimétricas,
las cuales se basan en su mayoría, en la reacción de deniges. En esta, el ortofosfato,
en presencia de molibdato, da origen al compuesto fosfomolibdato, el cual por la
acción de un agente reducto (cloruro estannoso o ácido ascórbico) produce una
coloración azul, cuya intensidades directamente proporcional al fosforo presente en
la muestra de suelo en la muestra de suelo y se puede leer en el fotocolorímetro.

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Muestra suelo + (NH4) M07024. 4H2O---------------------------FOSMOLIBDATO

FOSFOMOLIBDATO + AGENTE REDUCTO --------------Solución final de color azul

El fosforo se expresa en ppm

MATERIALES Y EQUIPOS:

• Fotocolorímetro o spectronic 20
• Balanza
• Agitador eléctrico
• Pisetas plásticas
• Balones aforados (25, 50, 100, 500,100ml)
• Beakers (25, 100, 500,1000ml)
• Fialas o Erlenmeyer (125,50ml)
• Frascos plásticos
• Soporte para embudos
• Cilindros graduados de 100 ml
• Pipetas (1, 2, 5, 10,50 ml)
• Papel filtro

Reactivos
- Solución extractora de bicarbonato de sodio (NaHCO2) 0.5N, pH 8.5:
disolver 42gr. De NaHCO3 en agua destilada y diluir a 1 litro. Ajustar el PH a
8.5 con NaOH 2N o NaOH 1M.
- Molibdato de amonio: Disolver 15 gr. de esta sal en 300ml de agua destilada
previamente calentada a 600 grados C. Deje enfriar y añada lentamente 342
ml de HCL concentrado. Mezcle y lleve a 1 litro con agua destilada
- Solución de Ácido Ascórbico
- Solución de trabajo 2ml de molibdato de amonio +1ml de ácido ascórbico y
completar volumen a 100ml.
- Solución patrón de fosforo: disuelva a 0.4393gr. de KH2PO4 en 5’’ ml de agua
destilada y complete el volumen a 1 litro. Añada 5 gotas de tolueno para
disminuir la actividad microbiana. Esta solución contiene 0.1mg de P por ml.
Preparar patrones de 0.08 a 1ppm

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Procedimiento

El procedimiento para determinar fosforo disponible en el suelo se realiza en 2


etapas o fases: en la primera se obtiene el extracto de suelo y en la segunda se
efectuá la determinación analítica de los elementos fosforo y potasio.

Primera Etapa: Obtención Del Extracto

Se pesan 1gr. de suelo fino (pasante por tamiz de 2mm) y se colocan en una fiola de
125 ml o en un envase plástico adecuado. Añada 20 ml de la solución de bicarbonato
de sodio, agitar durante 30 minutos y filtre la suspensión sobre papel filtro. Si el
filtrado obtenido no es transparente filtre de nuevo.

Segunda Etapa: Determinación Analítica del fosforo Disponible

Transfiera una alícuota de 2ml del filtrado a un balón aforado de 25 ml, añada
lentamente 20 ml de la solución de trabajo y complete el volumen.

Deje reposar 10 a 20 minutos, con la finalidad de que ocurra la generación de la


coloración azul característica

Proceda a medir la transmitancia de la solución en un fotocolorímetro con filtro rojo


(882 de longitud de onda). Anote la lectura obtenida. Con ese valor entre en la curva
patrón respectiva y ubique la concentración de P en la solución.

Cálculos
Ppm de P en el suelo= ppm de P en solución* factor

Factor= Volumen final aforado/alícuota del filtrado* Volumen


solución Extractora/Peso del suelo seco

Valores interpretativos para P( Solución extractora de olsen)

Grupos Textuales MB B M A MA
Gruesa(a,Af, Fa) 0-9 10-18 19.36 36-108 +108

Media( FAa, 0-5 6-12 13-25 26-75 +75


F,FL,Aa,L)
Fina(A, AL y FAL) 0-5 6-12 13-25 26-75 +75

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Introducción

Encontramos un grupo de elementos que las plantas consumen en menor proporción


que los estructurales pero en mayor proporción que otros elementos menores del
suelo. A estos se les denomina macroelementos o macronutrientes y reciben ese
nombre ya que son los que las plantas absorben del suelo en mayor cantidad; a este
grupo pertenecen el nitrógeno (N), el fósforo (P), el potasio (K), el calcio (Ca), el
magnesio (Mg) y el azufre (S). Los micronutrientes o microelementos son absorbidos
en menor proporción que los anteriores pero son igual de vitales para la planta; aquí
encontramos al hierro (Fe), el cobre (Cu), el molibdeno (Mo), manganeso (Mn), boro
(B), zinc (Zn) y cloro (Cl).

Para determinar la proporción de estos elementos en el suelo se utilizan los análisis


químicos que mediante procedimientos en laboratorio extraen el elemento en estudio
mediante agentes extractantes.

En este informe se estudiarán los distintos métodos de laboratorio para extraer el


elemento fósforo, ya que es uno de los elementos más importantes para la planta y
es el que se encuentra en el suelo, por lo general, en menores proporciones en forma
asimilable.
El fósforo en el suelo se encuentra en dos formas: como fósforo orgánico en forma
de ésteres del ácido fosfórico que son moléculas complejas componentes de la
materia orgánica; y como fósforo inorgánico (Pi) formando parte de las apatitas
(fluorapatitas en mayor cantidad, hidroxiapatitas y cloroapatitas), en forma ocluida
(combinado con otros compuestos de forma insoluble), en forma lábil (absorbido por
las arcillas) o en la solución del suelo en forma de ortofosfatos primarios (H2PO4-)
y ortofosfatos secundarios (HPO42-), las cuales son las formas asimilables por las
plantas. La disponibilidad de estas dos formas va a depender del pH del suelo. En
suelos ácidos predominan las formas de ortofosfato primario mientras que en los
suelos básicos predominan los ortofosfatos secundarios. Es de acotar también que la
solubilidad del P en el suelo va a depender del pH. En suelos con pH ácido y presencia
de hierro (Fe3+) y aluminio (Al3+) el fósforo se combina con ellos volviéndose
insoluble, mientras que a pH básico el fósforo se combina con el calcio o el magnesio
volviéndose igualmente insoluble. El rango de pH en el que el fósforo se encuentra
soluble es a pH entre 5,5 y 7,0.

El fundamento de la extracción del fósforo disponible del suelo se basa en la


disociación de cualquiera de las formas insolubles de éste en el suelo, liberándolo en
forma de fosfato. Existe una gran variedad de métodos para determinar el P
disponible, condicionados principalmente al tipo de suelo que contiene el elemento y
al pH del mismo.

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Marco teórico

El fosforo en los suelos proviene, probablemente, de las interpretación de las rocas


que contienen el mineral apatito Ca10 (PO4)6(P, Cl, OH)2; pudiendo representarse en
los suelos como flúor, cloro o hidroxipatito, respectivamente. También se puede
encontrar como fosfato de hierro y aluminio, en combinación con la fracción arcilla o
en combinación orgánicas. Debido a la diversidad de los compuestos de fosforo y a
los tipos de reacciones que sufren, el comportamiento del mismo varía según se
trate de suelo ácidos o suelos calcáreos.
Para cuantificar el fosforo disponible se hace uso de las técnicas foto
colorimétricas, las cuales se basan, en su mayoría, en la reacción de deniges. Él está
en orto fosfato en presencia de molibdato, da origen al compuesto fosfomolibdato,
el cual por acción de una agente reductor (cloruro estanos o ácido ascórbico).

Materiales

Fotocolorímetro o spectronic 20

El fotocolorímetro es una variedad de colorímetro (medidor de


color). Es un instrumento usado en las Química para
determinar la concentración de sustancias disueltas en
líquidos o sólidos mientras sean transparentes a la luz
visible, ultravioleta o infrarroja, midiendo y comparando sus
colores. La ciencia o arte de su uso se
denomina fotocolorimetría y está regida por leyes físicas
muy estudiadas. Para ello se introduce en el aparato un testigo
o patrón con una concentración de sustancia conocida y la
muestra a determinar.

Balanza

Es una palanca de primer género de brazos iguales que,


mediante el establecimiento de una situación de equilibrio
entre los pesos de dos cuerpos, permite medir masas. Para
realizar las mediciones se utilizan patrones de masa cuyo
grado de exactitud depende de la precisión del
instrumento. Al igual que en una romana, pero a diferencia
de una báscula o un dinamómetro, los resultados de las
mediciones no varían con la magnitud de la gravedad.

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Agitador eléctrico

Un agitador, a veces llamado mezclador, es un dispositivo


que se utiliza en los laboratorios de química y biología
para mezclar líquidos o
preparar disoluciones y suspensiones.
Un agitador típico tiene una placa o superficie que oscila
horizontalmente, propulsado por un motor eléctrico. Los
líquidos que van a ser agitados están contenidos
en vasos, tubos o matraces Erlenmeyer que se colocan
sobre la superficie vibrante o, a veces, en tubos de
ensayo o viales que se insertan en los agujeros de la placa.

Balones aforados (25, 50, 100, 500,100ml)

Un matraz aforado se emplea para medir con exactitud un


volumen determinado de líquido. La marca de graduación
rodea todo el cuello de vidrio, por lo cual es fácil
determinar con precisión cuándo el líquido llega hasta la
marca. La forma correcta de medir volúmenes es llevar
el líquido hasta que la parte inferior del
menisco sea tangente a la marca. El hecho de que el cuello
del matraz sea estrecho es para aumentar la exactitud, de
esta forma un cambio pequeño en elvolumen se traduce en un
aumento considerable de la altura del líquido del Matraz
aforado.

Erlenmeyer (125,50ml)

Consiste en un frasco de vidrio transparente de forma


cónica, de base ancha y alargada, cuello muy estrecho,
con una abertura en el extremo estrecho, generalmente
prolongado con un cuello cilíndrico. Se los encuentra de
diversas capacidades, colores y con algunas variaciones.
Suelen incluir unas pocas marcas para saber
aproximadamente el volumen contenido.

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Cilindros graduados de 100 ml

Está formado por un tubo generalmente transparente de


unos centímetros de diámetro y tiene una graduación
desde 0 ml hasta el máximo de la probeta, indicando
distintos volúmenes. En la parte inferior está cerrado y
posee una base que sirve de apoyo, mientras que la
superior está abierta (permite introducir el líquido a
medir) y suele tener un pico (permite verter el líquido
medido). Generalmente miden volúmenes de 25 o 50 ml,
pero existen probetas de distintos tamaños; incluso
algunas que pueden medir un volumen hasta de 2000 ml.

Pipetas (1, 2, 5, 10,50 ml)

La pipeta es un instrumento volumétrico de laboratorio


que permite medir la alícuota de líquido con bastante
precisión. Suelen ser de vidrio. Está formada por un
tubo transparente que termina en una de sus puntas
de forma cónica, y tiene una graduación (una serie de
marcas grabadas) con la que se indican distintos
volúmenes.

Papel filtro

El papel de filtros es un papel que se corta en forma


circular y se introduce en un embudo de filtración, con
el fin de ser filtro para las impurezas insolubles y
permitir el paso a la solución a través de sus poros.
El "papel filtro" se usa principalmente en laboratorios
|analíticos para filtrar soluciones heterogéneas.
Normalmente está constituido por derivados de
celulosa y permite el manejo de soluciones con pH
entre 0 y 12 y temperaturas de hasta 120°C.

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Reactivos

- Solución extractora de bicarbonato de sodio


(NaHCO2) 0.5N, pH 8.5: disolver 42gr. De
NaHCO3 en agua destilada y diluir a 1 litro.
Ajustar el PH a 8.5 con NaOH 2N o NaOH 1M.

- Molibdato de amonio: Disolver 15 gr. de esta sal


en 300ml de agua destilada previamente
calentada a 600 grados C. Deje enfriar y añada
lentamente 342 ml de HCL concentrado. Mezcle
y lleve a 1 litro con agua destilada.

- Solución de Ácido Ascórbico

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- Solución de trabajo 2ml de molibdato de amonio +1ml de ácido ascórbico y


completar volumen a 100ml.

- Solución patrón de fosforo: disuelva a 0.4393gr. de KH2PO4 en 5’’ ml de agua


destilada y complete el volumen a 1 litro. Añada 5 gotas de tolueno para
disminuir la actividad microbiana. Esta solución contiene 0.1mg de P por ml.
Preparar patrones de 0.08 a 1ppm

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Procedimiento

Agarramos 4.2 g de bicarbonato aun sin preparar.

Se le agregan 100 ml de agua destilada al vaso


precipitado.

Después se le agrega 50 ml de H2SO4 en una fiola.

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En u vaso precipitado medir 10 ml de H2O al cual se le


agregan los 4.2 g de bicarbonato.

Mover con una varilla para mezclarlo bien agregar agua


hasta 30 ml.

Después el profesor preparo la solución extractora


de molibdato de amonio con ayuda de una pipeta.

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Luego llevamos la muestra seca al agitador en un vaso


precipitado y colocamos un magneto dentro de este.

Lo siguiente fue calibrar la máquina de 600 a 700


revoluciones por minuto (rpm) por 30 minutos.

Pasado los 30 minutos sacamos la magneto de la


solución y lo pasamos a una bomba de vacío.

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Después encendemos la bomba de vació y esperamos a


que termine de filtrar.

Después de filtrarlo se le quita el filtro de seguridad


y le echamos 1 cucharada de carbón activado.

Llevar la muestra en un vaso precipitado de 100 ml.

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Limpiamos la bomba de vacío para después agregarle


2 papeles filtro.

Filtrar la muestra con carbón activado.

Lo filtrado se hecha a un vaso precipitado.

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Tomar la muestra con una bureta con una bureta y


llevarlo a una probeta, solo 2 ml

A eso se le agregan 20 ml de solución extractora

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Nota: si hay presencia de fosfatos tomara el color azul dependiendo de la intensidad.

Poner la muestra en el espectrofotómetro a 0.063


RECOMENDACIONES

 Se debe realizar esta descripción para


cada unidad de suelo diferenciada en el
muestreo.

 Debe tenerse presente que la fertilidad del suelo


está determinada por un conjunto de factores que abarcan todo el perfil de
suelo.

 Toma de muestras suficientes, en cantidad y calidad.

 Tanto la calidad como la cantidad de muestras son fundamentales para


obtener datos analíticos de características y propiedades químicas y físicas
del suelo, que sirvan de apoyo al diagnóstico.

de absorción

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Calculo

Para los materiales

Bandeja = 0.8964 g

Muestra = 1.0348 g

𝑊𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜
M= θxN 0.5 = 1 x
𝑀 𝑥 𝑉𝑥 𝐿

0.5 (84) (0.020) = Wsto

0.84 g = Wsto

0.5 (84) (0.1) = W

W = 4.20 g

estufa Alic. Cc Abs V (ml)


B 0 0 0
I 0.1 0.2 0.030
II 0.4 0.4 0.013
III 0.8 0.8 0.0115
M1 1.6 0.062 25
M2 3.2 0.119
M3 6.4 0.310

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M4 12.8 0.313
M5 25.4 0.439

P(mg/kg) = 3.5 mg x (25mg/2ml)

P = 875 mg/kg

Recomendaciones

Realizar un previo análisis de fosforo en la clase de terreno que se desea utilizar


para cultivos u otras actividades

En el momento de realizar el análisis tener presente los cálculos realizados para los
distintos tamaños de muestra.

Bibliografía

 MASIO G. (1999). Estudio desuelo por fosforo. VENESUELA: CARACAS.


Editorial: caracas.
 GORE O. (2003). Estudio del suelo y su análisis. ESPAÑA: MADRID.
Editorial: Madrid. PAG. (25-42)
 PENNY J. (1989). Edafología para la agricultura. U,S,A: MISURI. editorial:
LUX

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