HEMOGRAMA DE SHILLING ANALISIS CLINICO I

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

E. A. P. DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE BIOQUIMICA

AÑO ACADÉMICO 2015

SEMESTRE ACADÉMICO: 2015 - I

ASIGNATURA: ANÀLISIS CLINICO I

PRÁCTICA N°4: HEMOGRAMA DE SCHILLING

MESA 2: DÍA: VIERNES HORARIO: 10 A.M. – 2 P.M.

ESTUDIANTE:
 QUIÑONEZ SOLIS LIZET LUZ

PROFESOR:
 DR. JUAN MANUEL PARREÑO TIPIAN

AÑO: 2015
 HEMOGRAMA DE SHILLING ANALISIS CLINICO I

INTRODUCCIÓN
La fórmula leucocitaria se define como el recuento porcentual de las diferentes subpoblaciones
leucocitarias. El hemograma incluye la fórmula leucocitaria y la determinación de otras
magnitudes celulares sanguíneas, tales como recuento de leucocitos, hematíes y plaquetas,
concentración de hemoglobina, hematocrito y volumen medio de los hematíes entre otras. La
determinación de los parámetros hematológicos básicos mediante contadores hematológicos
especializados, junto al examen morfológico de los elementos sanguíneos en sangre periférica, son
de gran utilidad para la detección de alteraciones cuantitativas y cualitativas de dichas células
sanguíneas, lo que contribuye al diagnóstico de enfermedades hematológicas y no hematológicas.
El término hemograma tiene su origen en la clasificación de los neutrófilos en sub grupos en
función del número de lobulaciones realizada por J Ameth en el año 1904. Posteriormente, en
1930 J. Schilling definió la desviación a la izquierda del hemograma como aumento de los
neutrófilos juveniles o en banda, así como el procedimiento para el recuento de las diferentes
subpoblaciones leucocitarias. Por ello, la fórmula leucocitaria realizada a 100 elementos se conoce
con el término de “Hemograma de Schilling”. A partir de 1980, con la llegada de los analizadores
hematológicos automatizados, que determinan otras magnitudes importantes de las células
sanguíneas (como concentración de las diferentes células sanguíneas y de hemoglobina [Hb],
hematocrito [Hto], volumen corpuscular medio [VCM], etc., se ha denominado hemograma a toda
la información que proporcionan estos instrumentos.
El hemograma, junto al recuento diferencial manual de los diferentes leucocitos o fórmula
leucocitaria, es una de las pruebas diagnósticas más solicitadas, dado que forma parte del estudio
inicial de la gran mayoría de pacientes y tiene una gran utilidad diagnóstica no sólo en la
hemopatías, sino también en muchos otras enfermedades. (1)
Las causas más frecuentes del hallazgo de una leucocitosis son los procesos infecciosos e
inflamatorios agudos y crónicos. Determinadas infecciones muy graves, como neumonía,
meningitis o tuberculosis, pueden incluso dar lugar a lo que se denomina como reacción
leucemoide. En una reacción leucemoide se observa: una leucocitosis (cifra de leucocitos superior
a 20 X 109/l), un aumento del número absoluto de neutrófilos y una desviación a la izquierda y/o
mielemia (presencia en sangre periférica de precursores granulocíticos, como metamielocitos,
mielocitos, promielocitos, e incluso algún elemento blástico).(2)
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I. OBJETIVOS
 Determinación de la morfología de las células sanguíneas de una muestra de sangre.
 Determinar la fórmula leucocitaria.
 Diagnosticar posibles hemopatías u otras enfermedades.

II. MARCO TEORICO

La fórmula leucocitaria se define como el recuento porcentual de las diferentes subpoblaciones

leucocitarias. El hemograma , conocido usualmente como “Cell Blood Count” o CBC, por sus siglas
en inglés, es una prueba común de sangre que incluye la fórmula leucocitaria y la determinación
de otras magnitudes celulares sanguíneas, tales como recuento de leucocitos, hematíes y
plaquetas, concentración de hemoglobina, hematocrito y volumen medio de los hematíes entre
otras. La determinación de los parámetros hematológicos básicos mediante contadores
hematológicos especializados, junto al examen morfológico de los elementos sanguíneos en
sangre periférica, son de gran utilidad para la detección de alteraciones cuantitativas y cualitativas
de dichas células sanguíneas, lo que contribuye al diagnóstico de enfermedades hematológicas y
no hematológicas. (2)
El recuento diferencial manual o estudio citológico de la sangre periférica sigue siendo en la
actualidad una herramienta imprescindible para el diagnóstico. La sangre constituye un fluÍdo
orgánico fácilmente accesible, por lo que es el punto de partida más idóneo para el estudio de las
enfermedades y procesos hematológicos que tienen expresión periférica.

VALORES NORMALES DE LEUCOCITOS

LEUCOCITOS PORCENTAJE
NEUTRÓFILOS CAYADO 3-5%

SEGMENTADO 55-65%

EOSINÓFILOS 2-4%

BASÓFILOS 0-1%

LINFOCITOS 20-25%

MONOCITOS 3-8%
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Granulocito neutrófilo

En individuos sanos, representan alrededor del 1% de la sangre. 1 El recuento normal de glóbulos

blancos es por lo general entre 4000 y 11000/μL para un adulto y entre 9000 y 30000/μL para un
recién nacido. El hemograma completo es un análisis de sangre que incluye el recuento de
glóbulos blancos en general. La proporción de leucocitos en la sangre se puede utilizar como un
diagnóstico de muchos tipos de enfermedades.

LEUCOCITOS ALTOS. Es el aumento en el recuento total de leucocitos. Las leucocitosis más

frecuentes son las neutrofílicas, seguidas de las linfocitosis. En niños suelen ser secundarias a
infecciones, fármacos y enfermedades sistémicas. El aumento desproporcionado y acompañado de
importante desviación izquierda se llama reacción leucemoide y a veces puede ser difícil de
diferenciar de una leucemia. Las leucocitosis persistentes no etiquetadas deben ser derivadas al
hematólogo para estudio.

LEUCOCITOS BAJOS. Estas células se reducen en número y puede ser debido a una enfermedad,
exposición a la radiación, o deficiencia de la médula ósea. Esta condición se conoce como
leucopenia.

 TIPOS DE LEUCOCITOS

Hay cinco tipos diferentes de leucocitos, cada uno con funciones específicas. Se pueden dividir en
dos tipos principales: los granulocitos y agranulocitos.
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GRANULOCITOS
Los granulocitos tienen pequeños gránulos de material dentro de sus membranas celulares, que
desempeñan un papel importante en su función, ya que las células pueden liberar los gránulos
para matar las bacterias, hongos y otros invasores. Hay tres tipos de granulocitos: eosinófilos,
neutrófilos y basófilos.

 Eosinófilos. Están diseñados para atacar a los parásitos, y también desempeñan un papel en las
reacciones alérgicas.
 Neutrófilos. Son los más abundantes y son el primer tipo de célula inmune que responde y llega
al sitio de la infección.
 Basófilos. Representan menos del uno por ciento. Desempeñan un papel en la respuesta
inmune.

AGRANULOCITOS
Los agranulocitos carecen de gránulos en sus membranas celulares. Los agranulocitos pueden ser
divididos en linfocitos y monocitos.

 Linfocitos. Constituyen alrededor del 20-40% del recuento total de leucocitos, e incluyen los
linfocitos B, linfocitos T y células NK. Los linfocitos pueden defender el cuerpo contra las
infecciones, ya que distinguen las células del propio cuerpo de las extranjeras.
 Monocitos. Conforman del 2 al 9% de la cantidad de glóbulos blancos, y están diseñados para
presentar antígenos a los linfocitos para estimular la respuesta inmune. Estas células
eventualmente maduran a macrófagos, leucocitos especializados que tragan material extraño para
neutralizarlo. 3

SIGNOS DE ALARMA DEL HEMOGRAMA

Existen ciertos indicadores o signos de precaución que deben tenerse en cuenta en un
hemograma para los que esté indicado la realización de la valoración morfológica de los
elementos formes de la sangre.
Algunos hallazgos dentro de un hemograma y su interpretación diagnóstica, son:
 Ante la detección de una leucocitosis junto a plaquetopenia y anemia debe descartarse una
hemopatía.
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 Una leucocitosis acompañada de trombocitosis sugiere un posible síndrome

mieloproliferativo crónico.
 El hallazgo de una leucopenia aislada puede ser el primer signo de una enfermedad
hematológica maligna (leucemia aguda o síndrome mielodisplásico).
 Frecuentemente el diagnóstico de una leucemia linfática crónica se realiza por el hallazgo
casual de un aumento de linfocitos en sangre periférica (>5 x 10/L). Los leucocitos suelen registrar
cifras superiores a 10 x (10)9 /L y, en ocasiones, pueden ser muy elevados (300 x (10)9/L).
 En la leucemia mielomonocítica crónica se observa una monocitosis superior a 1 x (10)9/L en
sangre periférica.
 Una plaquetopenia aislada puede ser el único signo anómalo en el hemograma de un
paciente con malaria.1

III. FUNDAMENTO DE LOS PROCEDIMIENTOS

El HEMOGRAMA DE SCHILLING llamado también fórmula leucocitaria o recuento diferencial,
utiliza la TINCIÓN DE WRIGHT. Esta técnica de tinción deriva del método de Romanowsky que se
utiliza principalmente para el coloreo de un frotis sanguíneo. Esta técnica nos ayuda de diferenciar
cualitativamente y cuantitativamente los principales elementos formes de la sangre.
El fundamento de la coloración se basa en el colorante Wright, que es un colorante de tipo
policromático es decir, que está compuesto de dos colorantes; el primero un colorante aniónico
que es la eosina y el segundo un colorante catiónico que es el azul de metileno, ambos disueltos
en metanol. Estos colorantes se encuentran en estado no ionizado mientras se mantienen en
solución alcohólica, al agregar el agua destilada de ionizan y se unen selectivamente a los
componentes celulares precipitando como sales insolubles.
La base de la coloración es que los componentes celulares de naturaleza aniónica (ácida)
presentan tendencia a unirse a los tintes catiónicos, generando como resultado una coloración en
varias tonalidades de azul. A estos componentes se les denomina BASÓFILOS (ADN, mitocondrias,
ribosomas, etc.).
Por el contrario los componentes celulares de naturaleza catiónica (básico) se unen
selectivamente al tinte ácido que es la eosina, dando como resultado una coloración en varias
tonalidades de anaranjado y rojo. A estos componentes se les denomina ACIDÓFILOS o
EOSINÓFILOS (hemoglobina, etc.)
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Pero existen aquellos componentes celulares que presentan afinidad por ambos tipos de
colorantes, a estos elementos se les denomina NEUTRÓFILOS, los cuales se tiñen en diferentes
tonalidades de violeta.

COLORACIÓN DE WRIGHT:

- Colorante de Wright 0.3 gr

Azul de metileno + eosina Tiozina eosinato

- Metanol 97 ml
- Glicerol 3 ml

Tabla: Componentes del colorante de Wright.

o Las coloraciones obtenidas son dependientes del pH de las soluciones de tinción y de las
soluciones de lavado, lo cual podría generar variaciones en las tonalidades. Cuando el pH final que
se tiene es cercano a pH =5, presente una coloración más verdosa y en cambio cuando el pH es
cercano a 9, se dará un tono rojizo. Para prevenir estos efectos se suelen utilizar soluciones
amortiguadoras de pH neutro para preparar las soluciones de tinción y las soluciones de lavado. 4.5

COLORACIONES OBTENIDAS DE LOS COMPONENTES CELULARES

NÚCLEOS Tonalidades de color azul a púrpura – negro.

CITOPLASMA DE LAS CÉLULAS
MADURAS
ERITROCITOS RICOS EN
HEMOGLOBINA
GRÁNULOS DE NEUTRÓFILOS
GRÁNULOS DE EOSINÓFILOS
Color violeta muy pálido o marrón muy pálido
Tonalidades de color rosado y beige.
Colores entre violeta y marrón.
Color anaranjado.

GRÁNULOS DE BASÓFILOS Colores entre azul y negro.

GRÁNULOS DE LINFOCITOS Color púrpura.
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RESULTADOS
PACIENTE: LIZET QUIÑONEZ SOLIS
HEMOGRAMA DE SCHILLING
I. FORMULA RELATIVA: %
Formula Leucocitaria o Recuento diferencial.

LEUCOCITOS PORCENTAJE

NEUTRÓFILOS CAYADO 4%

SEGMENTADO 58%
EOSINÓFILOS 2%

BASÓFILOS 0%
LINFOCITOS 30%

MONOCITOS 6%

II. FÓRMULA ABSOLUTA:

Recuento de Leucocitos x % (Formula Relativa)

100

Los leucocitos totales fueron de 6800 / mm3

LEUCOCITOS FORMULA ABSOLUTA

6800 X 4 = 272 mm3

CAYADO
100
NEUTRÓFILOS
6800 X 58 = 3944 mm3
SEGMENTADO
100
6800 X 2 = 136 mm3
EOSINÓFILOS 100
6800 X 0 = 0 mm3
BASÓFILOS
100
6800 X 30 = 2040 mm3
LINFOCITOS
100
6800 X 6 = 408 mm3
MONOCITOS
100
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CONCLUSIONES
Las morfologías de las células sanguíneas demostraron ser normales ya que son parecidas a las
formas que la literatura menciona.
Se determinó la formula Leucocitaria , encontrándose valores Normales para los leucocitos
tanto granulocitos como agranulocitos
Debido a la obtención de Valores Normales en la formula leucocitaria puedo decir que la
paciente se encuentra aparentemente sana libre de Hemopatías u otras enfermedades

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Merino A. Criterios para la realización de la fórmula leucocitaria manual, Servicio de

Hemoterapia-Hemostasia. . Universidad de Barcelona. España 2010; 13: 49-58
2. Merino A. Interpretación de resultados: Valores normales del hemograma. Servicio de
hemoterapia-hemostasia. Universidad de Barcelona. España 2008; 1: 42-43.
3. Boletín educativo para el paciente. National Institutes of Health Clinical Center.
4. Esau L. Hernández M. Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología.
Investigación en discapacidad 2014; 3; 1 :10-18
5. TINCIÓN DE WRIGHT . (Accesado el 18 de Abril del 2014 ) . Disponible en :
https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigmaaldrich/docs/Sigma/General_Informa
tion/1/insert_es_ws.pdf