Penyerapan (absorpsi) sinar UV dan sinar Aspek Kualitatif dan Kuantitatif
tampak pada umumnya dihasilkan oleh eksitasi Spektofotometri UV-Vis
elektron-elektron ikatan akibatnya panjang 1. Aspek Kualitatif gelombang pita yang mengabsorbsi dapat Data spectra secara tersendiri tidak dapat dihubungkan dengan ikatan yang mungkin ada digunakan untuk identifikasi kualitatif obat dalam suatu molekul. atau metabolitnya, tetapi bila digabung Ada 3 macam proses penyerapan energy UV dengan spektroskopi infra red, resonansi dan sinar tampak yaitu: magnet inti, dan spektroskopi massa maka 1. Penyerapan oleh transisi electron ikatan dapat digunakan untuk identifikasi / analisis dan ekletron anti ikatan kualitatif. Data yang dapat diperoleh dari 2. Penyerapan transisi elektron d dan f dari spektrofotometri UV-Vis yaitu: panjang molekul kompleks; dan gelombang maksimal, intensitas, efek pH, 3. Penyerapan oleh perpindahan muatan dan pelarut yang dapat dibandingkan dengan data yang sudah dipublikasikan 2. Aspek Kuantitatif Analisis kuantitatif dengan metode Suatu berkas radiasi dikenakan pada spektofotometri UV-Vis dapat digolongkan cuplikan (larutan sampel) dan intensitas atas 3 macam pelaksanaan, yaitu: sinar radiasi yang diteruskan diukur 1. Analisis komponen tunggal besarnya. Radiasi yang diserap oleh 2. Analisis kuantitatif campuran 2 macam cuplikan ditentukan dengan menbandingkan zat atau analisis 2 komponen; dan intensitas sinar yang diteruskan dengan 3. Analisis kuantitatif campuran 3 macam intensitas sinar yang diserap jika tidak ada atau lebih jenis penyerap lainnya.
Hal-hal yang harus diperhatikan dalam
analisis spektrofotometri UV-Vis 1. Pembentukan molekul yang dapat menyerap sinar UV-Vis 2. Waktu operasional 3. Pemilihan panjang gelombang 4. Pembuatan kurva baku 5. Pembacaan absorbansi sampel atau cuplikan