PRÁTICA N° 5

FUNCIONES CELULARES: MECANISMOS DE TRANSPORTE: DIFUSIÓN Y ÓSMOSIS

1. INTRODUCCIÓN
Es de capital importancia para la nutrición celular el poder transportar
moléculas hacia afuera y adentro de ella misma.
Dado la importancia del transporte a través de la membrana la célula utiliza
un gran número de mecanismos de transporte. Estos mecanismos caen
dentro de una de estas dos categorías: transporte pasivo (difusión simple,
difusión facilitada y ósmosis) y transporte activo.

TRANSPORTE PASIVO
DIFUSIÓN
Difusión simple, significa que la molécula puede
pasar directamente a través de la membrana.
La difusión es siempre a favor de un gradiente
de concentración. Esto limita la máxima
concentración posible en el interior de la célula
(o en el exterior si se trata de un producto de
desecho). La difusión es un mecanismo de
transporte efectivo para algunas moléculas
pero la célula debe utilizar otros mecanismos de
transporte para sus necesidades.

La ósmosis es una forma especial de difusión

llevada a cabo por las moléculas de agua.
Depende del gradiente de concentración
que se observe en el espacio extracelular, es
decir, si depende de si la célula se encuentra
en un medio Isotónico, Hipotónico o
Hipertónico.

DIFUSIÓN FACILITADA
La difusión facilitada utiliza canales (formados por proteínas de membrana)
para permitir que moléculas cargadas (que de otra manera no podrían
atravesar la membrana) difundan libremente hacia afuera y adentro de la
célula. Estos canales son usados sobre todo por iones pequeños tales como
potasio, sodio y cloro.

La velocidad del transporte facilitado está limitada por el número de

canales disponibles.
TRANSPORTE ACTIVO
El transporte activo requiere un gasto de energía para transportar la
molécula de un lado al otro de la membrana, pero el transporte activo es
el único que puede transportar moléculas contra un gradiente de
concentración, al igual que la difusión facilitada el transporte activo está
limitado por el número de proteínas transportadoras presentes.

Transporte Grueso
Algunas sustancias más grandes como polisacáridos, proteínas y otras
células cruzan las membranas plasmáticas mediante varios tipos de
transporte grueso:

 Endocitosis: es el proceso mediante el cual la sustancia es

transportada al interior de la célula a través de la membrana. Se
conocen tres tipos de endocitosis
 Fagocitosis: en este proceso, la célula crea una proyección de la
membrana llamada seudópodos que rodean la partícula sólida. Una
vez rodeada, los seudópodos se fusionan formando una vesícula
alrededor de la partícula llamada vesícula fagocítica o fagosoma. El
material sólido dentro de la vesícula es seguidamente digerido por
enzimas liberadas por los lisosomas. Los glóbulos blancos constituyen
el ejemplo más notable de células que fagocitan bacterias y otras
sustancias extrañas como mecanismo de defensa

 Pinocitosis: en este proceso, la sustancia a transportar es una gotita

o vesícula de líquido extracelular. En este caso, no se forman
 pseudópodos, sino que la membrana se repliega
creando una vesícula pinocítica. Una vez que el
contenido de la vesícula ha sido procesado, la
membrana de la vesícula vuelve a la superficie
de la célula.

 Exocitosis: Durante la exocitosis, la membrana de la vesícula

secretora se fusiona con la membrana celular liberando el contenido de la
misma. Por este mecanismo las células liberan hormonas (p.ej. la insulina),
enzimas (p.ej. las enzimas digestivas) o neurotransmisores imprescindibles
para la transmisión nerviosa.

2. OBJETIVOS

 Observar y describir los fenómenos de difusión , ósmosis en la célula

animal y vegetal en respuesta a diferentes concentraciones salinas
 Comprobar y observar el fenómeno de la permeabilidad en una
membrana artificial

3. MARCO TEÓRICO

La célula, para llevar a cabo sus funciones vitales,

requiere de un intercambio consiente de materia y
energía con su entorno. Para esto, las moléculas,
requieren atravesar la membrana que la recubre.
La membrana plasmática, por el tipo de moléculas
que la componen, es de naturaleza apolar. Las
moléculas no polares tendrán libre paso a través de
ella, dependiendo de su grado de solubilidad en los lípidos y de su tamaño;
a mayor liposolubilidad, la penetración es más rápida. Una molécula puede
ser permeable a un soluto determinado porque pasa directamente a través
de la bicapa de lípidos, o porque es capaz de atravesar por medio de
transportadores.
El agua se mueve rápidamente a través de una membrana semipermeable
desde una región de baja concentración hasta otra de alta concentración
de soluto. Este proceso se denomina ósmosis y puede demostrarse
fácilmente colocando una célula en una solución con una concentración
de soluto diferente de la presente en el interior de ella. Cuando se colocan
las células en una solución con una concentración salina similar a la de su
 medio (isotónica), al concentración de agua permanece constante dentro
y fuera de la célula por lo que su volumen y forma no se alteran.

4. MATERIALES

Biológico

o Catáfilo de cebolla
o Gota de sangre
o Beterraga

Equipos

o Probeta
o Baño María
o Tubos de ensayo
o Gradilla
o Pipeta
o Microscopio óptico
o Bisturí y Lanceta
o Vasos de precipitado
o Láminas portaobjetos y cubreobjetos

Reactivos

o Solución de NaCl 0,9% y 1,5%

o Agua destilada saturada de cloroformo
o Solución de lugol
o Solución de almidón con hidróxido de amonio
o Fenolftaleína
 5. ACTIVIDADES
i. Fenómenos de ósmosis en eritrocitos
o Con una lanceta estéril pique la yema de cualquiera de sus
dedos y deposite unas gotas de sangre en 3 láminas
portaobjetos limpias y etiquetadas. Añada con un gotero la
solución de NaCl 0.9%, NaCl 1.5% y agua destilada. Deje
reposar un minuto. Después coloque el cubreobjetos y
observe. Enfoque con el objetivo de 10 x y pase al objetivo de
40x para hacer sus observaciones.

Deposite unas gotas de sangre en Con agua destilada está en

3 láminas portaobjetos medio hipotónico

Con NaCl 0.9% está en medio Con NaCl 1.5% está en medio
Isotónico Hipertónico
ii. Fenómenos de ósmosis en célula vegetal
o En 3 láminas portaobjetos limpias y
etiquetadas, coloque un trozo de
catáfilo de cebolla y añada con un
gotero la solución de NaCl 0.9%,
NaCl 1.5% y agua destilada. Deje
reposar un minuto. Después coloque
el cubreobjetos y observe. Enfoque
con el objetivo de 10 x y pase al
objetivo de 40x para hacer sus
observaciones.

Con NaCl 1.5% está en medio Con agua destilada está en

Hipertónico medio hipotónico

Con agua destilada está en

medio hipotónico
iii. Propiedades de la membrana celular
o Efecto de la temperatura:
 Cortar 10 trozos de raíz de Beterraga lo más uniformes.
 Lavar con gua durante 3 minutos para eliminar el
pigmento de las células cortadas y dejar los trozos en
agua.
 Marcar 4 tubos de ensayo como: Control, 5°C,
37°C,70°C.
 Colocar un corte en cada uno de los tubos marcados,
añadir 10 ml de agua destilada a cada uno de los
tubos marcados y ubicarlos en los diferentes baños de
temperatura, durante 90 minutos.
 Transcurrido el tiempo agitar los tubos para que se
difunda en el agua todo el pigmento que haya salido
de las células.
 Realizar una escala de pigmento difundido, tomar el
valor de 10 para el tubo de 70°C.
 Indicar los valores arbitrarios para la cantidad de
pigmento en los demás tubos.

o Efecto de los solventes orgánicos

 Colocar un trozo de Beterraga lavada en un tubo con
15 ml de agua destilada saturada con cloroformo.
 En otro tubo colocar un trozo de Beterraga lavada en
un tubo con 15 ml de agua destilada.
 Dejar reposar ambos tubos durante 90 minutos a
temperatura ambiente. Comparar la cantidad de
pigmento con el experimento anterior.

iv. Estudio macroscópico con una membrana artificial

En un vaso de precipitado coloque agua de la llave, ponga
en él un cuadro de papel celofán de 20 x 20 cm por equipo y
hiérvalo por 15 minutos. Sáquelo y déjelo enfriar.
Una todas las orillas del papel celofán y coloque en su interior
15 ml de la solución de almidón con hidróxido de amonio y
amárrelo con hilo de tal manera que la bolsa que se forme
quede perfectamente cerrada.
 Enjuague la bosa con agua de la llave. Agite la bolsa dentro
de un vaso de precipitado de 500 ml. Que contenga agua de
la llave y 5 gotas de fenolftaleína durante 5 minutos. Observe si
cambia su color el agua.
Abra la bolsa y agregue 4 gotas de solución de lugol, observe
si aparece color.
Agregue 4 gotas de lugol al agua del vaso de precipitado y
compare con la coloración observada en el punto anterior.

6. RESULTADOS

 En el fenómeno producido en los eritrocitos observamos claramente

que con la administración de NaCl en concentración de 1.5% los
eritrocitos están en medio Hipertónico; por lo tanto se vio el
fenómeno de la Crenación, ya que las células se arrugaron.
 En el fenómeno producido en los eritrocitos observamos claramente
que con la administración de NaCl en concentración de 0.9% los
eritrocitos están en medio Isotónico
 En el fenómeno producido en los eritrocitos observamos claramente
que con la administración de agua destilada los eritrocitos está
en medio hipotónico, se vio la presencia del fenómeno
Hemólisis, ya las células explotaron.
 En el fenómeno producido en las células vegetales observamos
claramente que con la administración de NaCl en concentración
de 0.9%
 En el fenómeno producido en las células vegetales observamos
claramente que con la administración de NaCl en concentración
de 1.5% está en medio Hipertónico, ya que se muestra la
plasmólisis, fenómeno que nos muestra como la célula ha
perdido agua.
 En el fenómeno producido en las células vegetales observamos
claramente que con la administración de Agua destilada está en
medio hipotónico, y nos muestra la presencia de la Turgencia,
fenómeno que nos deja observar como la célula se empieza a
llenar de agua.
  Para que las células vegetales de la epidermis no pierdan ni ganen
agua deben vivir en un ambiente de la misma concentración salina
que su interior (medio isotónico). Cuando la concentración
extracelular se hace mayor que la del citoplasma (medio
hipertónico), la célula se deshidrata y encoge su citoplasma
sufriendo una plamólisis que puede suponer la muerte celular. Si la
concentración salina extracelular se hace menor que la del
citoplasma (medio hipotónico) la célula se hincha aumentando
su turgencia, pudiendo estallar si no existe una pared suficientemente
resistente.

7. CUESTIONARIO

¿Cuál es la diferencia entre el fenómeno de ósmosis en células

vegetales y células animales?

CELULA ANIMAL

 Crenación: ocurre cuando la célula está expuesta a un ambiente

hipertónico y se arruga al perder agua.
 Hemólisis: ocurre cuando la célula está expuesta a un ambiente
hipotónico y explota al llenarse de agua

CELULA VEGETAL

 Plasmolisis: ocurre cuando la célula está expuesta a un ambiente

hipertónico y pierde agua. Se observan áreas blancas.
 Turgencia: ocurre cuando la célula está expuesta a un ambiente
hipotónico y esta comienza a llenarse de agua, pero no explota
porque la pared celular la protege.

¿Cuál es el efecto de la temperatura y solventes orgánicos sobre el

mecanismo de difusión de la membrana plasmática?

 Efecto de temperatura: Con un descenso de las temperaturas,

tanto la membrana celular como las proteínas pueden verse
afectadas. Las colas de ácidos grasos de la bicapa fosfolípida
pueden "derretirse" a altas temperaturas, lo que significa que se
vuelven más fluidas, posibilitando un mayor movimiento. Esto
modifica la permeabilidad de la célula, lo que puede permitir el
ingreso de moléculas que no deberían ingresar y, por ello, dañar a
la célula. La trans-membrana o las proteínas periféricas pueden
 también verse dañadas por las altas temperaturas, que causan
una desnaturalización de las proteínas o su desmembramiento.
También pueden producir una aceleración de las reacciones que
suceden en el seno de la célula, lo que en algún punto podría ser
aceptable, hasta que la temperatura se vuelva demasiado alta,
momento en el cual se produce la destrucción de la proteína, las
reacciones y las células. Un descenso en la temperatura también
provoca un efecto en las membranas celulares y las células. Las
colas de ácidos grasos presentes en los fosfolípidos se tornan más
rígidas cuando se exponen a temperaturas frías. Esto afecta la
fluidez, la permeabilidad y la capacidad de supervivencia de las
células. Cuando las células pierden fluidez, quedan
imposibilitadas de moverse y de crecer. El descenso de la
permeabilidad implica que moléculas vitales no puedan ingresar
a las células. Además, las temperaturas más frías pueden
provocar una disminución o el freno de las reacciones celulares.

8. BIBLIOGRAFIA

 http://es.slideshare.net/Luzy147/transporte-celular-osmosis-y-difusin
 https://prezi.com/8njlfdf6utvf/soluciones-iso-hipo-e-hipertonicas/
 https://prezi.com/7fihlcpmwtdv/osmosis-en-celulas-vegetales-y-
animales/
 http://biologiapuntocom.blogspot.pe/2012/10/practico-osmosis-en-
celulas-vegetales.html