Departamento de Bioquímica e Biotecnologia – CCE

Curso: Biomedicina - Disciplina: Metodologia Bioquímica

Aluno(a): ...................................................................................................

Prova Prática

DETERMINAÇÃO DE KMnO4

CURVA DE CALIBRAÇÃO
a) Preparar uma série de tubos contendo de 0,0 a 8,0 mg % de KMnO4 por tubo (volume final de 1 mL),
utilizando um padrão de KMnO4 0,16 g %.
b) Completar o volume de todos os tubos para 10 mL com água destilada.
c) Agitar vigorosamente todos os tubos.
d) Fazer a leitura no espectrofotômetro em 530 nm.

DOSAGEM DA AMOSTRA
a) Determinar a concentração de KMnO4 da Amostra, colocando-a diretamente na cubeta para leitura inicial.

CURVA DE CALIBRAÇÃO DE KMnO4

Tubos KMnO4 (mg %) KMnO4 (0,08 g %) Amostra H2O Destilada Absorvância

(mL) (mL) (mL) (530 nm)
1
2
3
4
5
Amostra

PEDE-SE:
1) Traçar a curva de calibração de KMnO4 em papel milimetrado.
2) Calcular o fator de calibração correspondente à curva de calibração de KMnO4.
3) Calcular a concentração de KMnO4 da Amostra utilizando a curva de calibração E o fator de calibração.
4) Expressar os resultados da concentração de KMnO4 da Amostra em mg % OU g % (p/v). Utilizar a unidade de
concentração mais adequada ao resultado obtido.
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Prova Prática
DETERMINAÇÃO DE PROTEÍNAS PELO MÉTODO DE LOWRY

CURVA DE CALIBRAÇÃO
a) Preparar uma série de tubos, contendo de 0 a 200 µg/0,5 mL de albumina de soro bovino (BSA) por tubo
(volume final de 0,5 mL) utilizando um padrão de BSA 40,0 mg %.
b) Pipetar em cada um dos tubos 5,0 mL de mistura reativa. A mistura reativa deverá ser preparada no
momento do uso (1mL de Solução B; 1 mL da Solução C e 100 mL da Solução A).
c) Agitar vigorosamente todos os tubos.
d) Deixar os tubos em repouso por 10 min.
e) Adicionar em cada um dos tubos 0,5 mL do reativo de Folin-Ciocauteau.
f) Deixar os tubos em repouso por 15 min.
g) Agitar vigorosamente todos os tubos.
h) Fazer a leitura no espectrofotômetro em 660 nm.

DOSAGEM DA AMOSTRA
a) Determinar a concentração de proteínas da Amostra.

CURVA DE CALIBRAÇÃO DE ALBUMINA DE SORO BOVINO (BSA)

Tubos Proteína (BSA) BSA 40 mg % H2O Destilada Amostra Mistura Folin- Absorvância
(µg/0,5 mL) (mL) (mL) (mL) reativa Ciocauteau (660 nm)
(mL) (mL)
1
2
3
4
5
Amostra

PEDE-SE:
1) Traçar a curva de calibração de BSA em papel milimetrado.
2) Calcular o fator de calibração correspondente à curva de calibração de BSA.
3) Calcular a concentração de BSA da Amostra utilizando a curva de calibração E o fator de calibração.
4) Expressar os resultados da concentração de BSA da Amostra em mg % OU g % (p/v). Utilizar a unidade de
concentração mais adequada ao resultado obtido.
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Prova Prática
DETERMINAÇÃO DE PROTEÍNAS PELO MÉTODO DE BIURETO

CURVA DE CALIBRAÇÃO

a) Preparar uma série de tubos, contendo de 0 a 10 mg/mL de albumina por tubo (volume final de 1 mL),
utilizando um padrão de BSA 1 g %.
b) Pipetar em cada um dos tubos 5,0 mL do reativo de Biureto.
c) Agitar vigorosamente todos os tubos.
d) Deixar em repouso por 15 min.
e) Fazer a leitura no espectrofotômetro em 550 nm.

DOSAGEM DA AMOSTRA
a) Determinar a concentração de proteínas da Amostra.

CURVA DE CALIBRAÇÃO DE ALBUMINA DE SORO BOVINO (BSA)

Tubos Proteína (BSA) Albumina 1 g % Amostra H2O Reativo de Absorvância

(mg/mL) (mL) (mL) Destilada Biureto (550 nm)
(mL) (mL)
1
2
3
4
5
Amostra

PEDE-SE:
1) Traçar a curva de calibração de BSA em papel milimetrado.
2) Calcular o fator de calibração correspondente à curva de calibração de BSA.
3) Calcular a concentração de BSA da Amostra utilizando a curva de calibração E o fator de calibração.
4) Expressar os resultados da concentração de BSA da Amostra em mg % OU g % (p/v). Utilizar a unidade de
concentração mais adequada ao resultado obtido.
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Curso: Biomedicina - Disciplina: Metodologia Bioquímica

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Prova Prática

DETERMINAÇÃO DE CARBOIDRATOS PELO MÉTODO DE DNS

CURVA DE CALIBRAÇÃO
a) Preparar uma série de tubos contendo de 0 a 1 mg/mL de glicose por tubo (volume final de 0,5 mL)
utilizando um padrão de glicose 1 mg/mL.
b) Adicionar, em todos os tubos, 1,0 mL de água destilada.
c) Pipetar em cada um dos tubos 1,0 mL de DNS.
d) Agitar vigorosamente todos os tubos.
e) Aquecer os tubos em banho-Maria fervente por 5 min.
f) Resfriar os tubos e adicionar 7,5 mL de água destilada.
g) Agitar vigorosamente todos os tubos.
h) Fazer a leitura no espectrofotômetro em 540 nm.

DOSAGEM DA AMOSTRA
a) Determinar a concentração de açúcares redutores da Amostra.

CURVA DE CALIBRAÇÃO DE GLICOSE

Tubos Glicose Glicose H2O Amostra H2O destilada DNS Absorvância

(mg/mL) (1mg/mL) destilada (mL) (mL) (mL) (540 nm)
(mL) (mL)
1
2
3
4
5
Amostra

PEDE-SE:
1) Traçar a curva de calibração de glicose em papel milimetrado.
2) Calcular o fator de calibração correspondente à curva de calibração de glicose.
3) Calcular a concentração de açúcares redutores da Amostra utilizando a curva de calibração E o fator de
calibração.
4) Expressar os resultados da concentração de açúcares redutores da Amostra em mg % OU g % (p/v). Utilizar a
unidade de concentração mais adequada ao resultado obtido.