ADN - Conceptos Básicos y Aplicaciones - Conogasi

7/5/2019 ADN: Conceptos básicos y aplicaciones – Conogasi
ADN: Conceptos básicos y aplicaciones

Alberto Checa Rojas
Ciencias naturales > Ciencias biológicas > Biomedicina |Bioquímica y biología 8079 AA
molecular | Biotecnología | Genética | Genómica
Conocimiento > Ciencias médicas y de la salud > Medicina forense
10 enero, 2018
Conocimientos previos:
Célula
Organelos
Eucariotas y Procariotas
Introducción
El ADN, o ácido desoxirribonucleico, es el material genético que se encuentra en las células de todos los organismos.
Está compuesto por nucleótidos unidos entre sí (Adenina, Timina, Guanina, Citosina) (figura 1A). El ordenamiento y
secuencia de los nucleótidos forma un polímero de ADN de doble cadena, el cual se traduce en un ARN mensajero
(ARNm), este ARN contiene la información para generar una o varias proteínas utilizando diversos ARNs como
intermediarios como los ARN de transferencia (ARNt) y ARN ribosomales (ARNr) (figura 1B). En células eucariotas
la mayor parte del ADN se localiza en el núcleo que está rodeada por una bicapa lipídica. Sin embargo, una pequeña
cantidad de ADN también se puede encontrar en otras estructuras celulares, como en la mitocondria en animales o
cloroplastos en plantas (figura 1C) (A. Checa, 2016).
Figura 1. A. Molecula de ADN. B. Esquema de la Síntesis de proteínas.

Este proceso se realiza en los ribosomas, el cual está formado por
moléculas de ARNr (azul y verde claro) y dos proteínas (azul y verde
http://conogasi.org/articulos/adn-conceptos-basicos-y-aplicaciones/ 1/12
fuerte). Ribosoma se representan como un par de rectángulos en verde

simulando la subunidad pequeña y en azul la subunidad grande y en su
estructura en 3D. En el proceso de síntesis, los aminoácidos son
transportados por un ARNt correspondiente para cada aminoácido
hasta el ARN mensajero donde se unen en la posición adecuada para
formar las nuevas proteínas. En la estructura de 3D del ARNt se
muestra la posición del aminoácido de Fenilalanina y su anticodón
(AAG). Imágenes 3D modificadas de: https://pdb101.rcsb.org/
Gregor Mendel: leyes de la herencia
Antes del descubrimiento de la molécula de ADN, un monje que estudiaba diferentes aspectos de los chicharos
llamado Gregor Mendel sentó las bases de las leyes de la herencia genética. Efectuó cruzas entre chicharos con
diferentes características (color de la flor, textura de la semilla, etc) y en sus resultados pudo postular las siguentes
leyes (Fraser, 2001).
Leyes de Mendel:
1. Cuando se cruzan dos variedades puras de una misma especie, los descendientes son todos iguales.
2. Al cruzar entre sí los híbridos de la segunda generación, los descendientes se dividen en cuatro partes, de las
cuales tres heredan el llamado carácter dominante y una el recesivo.
3. En el caso de que las dos variedades de partida difieran entre sí en dos o más caracteres, cada uno de ellos se
transmite con independencia de los demás (Fraser, 2001).
El trabajo de Gregor Mendel no fue reconocido cuando lo publicó y no fue sino hasta el año 1900 con los trabajos de
Carl Correns, Hugo de Vries y Erich von Tschermak, que se le dio el crédito que merecía su labor y descubrimiento.
Los avances científicos posteriores pusieron de manifiesto que las leyes de la herencia de Mendel constituyen una
simplificación de procesos que a menudo son mucho más complejos. Sin embargo, estas leyes sirven todavía como
base fundamental para la genética moderna (Dahm, 2008).
Los primeros hallazgos del ADN

El perfil de ADN, es una técnica que analiza los atributos únicos del ADN de una persona. La aplicación de los
perfiles de ADN ha revolucionado las pruebas de maternidad/paternidad, la medicina forense y la identificación de
víctimas en desastres. El término “huellas dactilares de ADN” fue acuñado para aludir al uso tradicional de huellas
dactilares como medio de identificación humana. Las huellas dactilares clásicas están sujetas a interpretación y las
muestras utilizables pueden ser difíciles de obtener. Cuando se lleva a cabo correctamente, las pruebas basadas en el
ADN no sóloPosterior a las leyes propuestas por Mendel se dieron los primeros experimentos para descubrir la
molécula del ADN. Esto inició con los trabajos del biólogo suizo Johan Friedrich Miescher en 1869, el cual aisló
varias moléculas ricas en fosfatos de muestras de pus recuperadas a partir de los vendajes de pacientes. A estos
aislados ricos en fosfatos provenientes de los núcleos de las células blancas de la sangre, los llamó “nucleína”. Sus
hallazgos fueron publicados por primera vez en 1871, pero su importancia no fue reconocida en ese momento (Dahm,
2008). Miescher pudo aislar y caracterizar el ADN debido a su buena elección de las células para sus experimentos.
Después de utilizar los leucocitos provenientes de la pus de vendajes uso espermatozoides de diferentes especies y ya
que este tipo de células no se incrustan en un tejido o matriz extracelular, pueden purificarse fácilmente
especialmente en los espermatozoides, los núcleos son grandes en comparación con el citoplasma, lo que facilita un
enriquecimiento de componentes nucleares (Dahm, 2008). Por otra parte, los estudios realizados por Theodor Boveri,
Walther Flemming, Walter Sutton, y Edmund B. Wilson revolucionaron los campos de la citología y genética y
sentaron las bases de la citogenética. T. Boveri investigó el papel de los cromosomas y su importancia durante el
desarrollo embrionario y como elementos importantes para la herencia. Sus trabajos con erizos de mar mostraron que
era necesario que todos los cromosomas estuvieran presentes para que un desarrollo embrionario correcto tuviera
lugar. Este descubrimiento fue parte importante de la teoría cromosómica de Sutton y Boveri (Maderspacher,
2008).Walther Flemming realizó estudios detallados sobre la división celular en diferentes órganos y organismos,
principalmente del reino animal (Paweletz, 2001). Flemming describió además la morfología y el comportamiento de
los cromosomas durante la mitosis, acuñando los términos “cromatina” y “mitosis” (Figura 2). A finales de los años
1880 y 1890, Boveri y Walter Sutton de manera independiente comenzaron a desarrollar la teoría cromosómica el
cual dicta que los cromosomas llevan material genético y son la base de la herencia mendeliana (Dahm, 2008;
Ramirez, Hulston, & Kovac, 2015).
Si bien la mayoría de estos descubrimientos y conceptos fueron bien recibidos por la comunidad científica en su
momento, el descubrimiento del ADN por Friedrich Miescher fue poco apreciado, ya que la gran mayoría de los
científicos de la época seguían convencidos de que las proteínas por su complejidad eran las portadoras de la
información genética; y no fue sino hasta el siglo XX que se comprendió el verdadero significado de sus hallazgos.
Figura 2. Dibujo de referencia del libro de W. Flemming titulado: Zellsubstanz, Kern und Zelltheilung (Citoplasma, Núcleo y
División celular) el cuál, ilustra los pasos de la división celular (A-J). A este proceso lo llamó Cariomitosis (metamorfosis
filiforme del núcleo) tomado de: http://www.cell.com/pictureshow/cell-cycle.
Uno de los científicos que se interesó por los trabajos de Miescher fue Albrecht Kossel un científico que trabajaba en
el laboratorio de Hoppe-Seyler y que se interesó en las nucleínas como un nuevo elemento funcional de la célula.
Posteriormente se hizo acreedor del Premio Nobel de Medicina en 1910 por descubrir la composición de la nucleína
formado por cuatro bases nitrogenadas y moléculas de azúcar (Jones, 1953). En 1928, se llevó a cabo uno de los
primeros experimentos que demostró el ADN podría transferir la información genética en un experimento en el cual,
las bacterias eran capaces de transferir información mediante un proceso llamado transformación (figura 3). Frederick
Griffith, que investigaba varias cepas de neumococo (Streptococcus pneumoniae), e inyectó dos tipos diferentes de
cepas de neumococo a ratones; la cepa lisa (S) virulenta y la cepa rugosa (R) no virulenta. La cepa S es dañina, ya
que se recubre de una capa de polisacárido que la protege del ataque del sistema inmune, mientras que la cepa R no
produce esa cápsula protectora y es derrotada por el sistema inmune (figura 3). Griffith observó que, cuando la cepa S
moría por calor no afectaba al ratón, pero cuando la combinaba con la cepa R y la cepa S muerta (por calor) la cepa R
era de matar a su hospedero. Griffith llegó a la conclusión de que la cepa R se había “transformado” en una cepa S
virulenta por un “principio de transformación” que de algún modo las baterías de la cepa S muertas virulentas
transformaban a las bacterias R.
Figura 3. Experimento de Frederick Griffith. . En 1928 Frederick Griffith, realizó el primer experimento en el que se
sugiere que las bacterias son capaces de transferir la información genética a través de un proceso conocido como
transformación. Griffith utilizó dos cepas de Streptococcus pneumoniae, una cepa R (rugosa) que no era virulenta y
una cepa S (lisa) que era virulenta. En este experimento, las bacterias de la cepa S murieron por el calor, y sus restos
se añadieron a las bacterias de la cepa R. Aunque esta cepa no es perjudicial, la combinación fue capaz de matar a su
huésped (ratón). Las micrografías ejemplifican la forma lisa (flecha blanca) y rugosa de las colonias en cultivo.
Imagen tomada de: Olga Zaborina, et al Structure–Function Aspects of PstS in Multi-Drug–Resistant Pseudomonas
aeruginosa. Plos Pathogens, 2008.
Este estudio se reavivó hasta a mediados de la década de 1940 y principios de 1950, cuando Oswald T. Avery, Colin
MacLeod, McCarthy Maclyn, (figura 3) y por otra parte, Al Hershey y Martha Chase (figura 4) demostraron de
manera independiente que el ADN es el portador de la información genética (Avery & Macleod, 1994; Hershey &
Chase, 1952). Si bien la existencia del ADN se conocía desde 1869, en aquella época se creía que las proteínas eran
las responsables en transmitir la información que determina la herencia. Avery, MacLeod y McCarty investigaron la
naturaleza química del factor transformador, para determinar si era una proteína o un ácido nucleico. Basándose en
los experimentos de Griffith, transformaron la cepa R en la cepa S incubando la cepa R viva y la S muerta por calor.
Esto lo realizaron basado en un detallado y meticuloso experimento in vitro, realizando pretratamientos a los
componentes celulares de la cepa S muerta por calor con diferentes enzimas que degradaban proteinas, ARN o ADN
específicamente. Con estos experimentos pudieron concluir que el factor transformador era el ADN, ya que las
enzimas rompieron selectivamente cada componente. En sus experimentos, Avery, MacLeod y McCarty encontraron
que ni la proteasa, ni la rnasa afectaron la capacidad de la cepa S muerta por calor para transformar a la cepa R,
únicamente la enzima DNasa (Figura 3).
Figura 4. Experimento Avery-MacLeod-McCarty, da una continuidad al experimento de Griffth. Avery, MacLeod y

McCarty probaron varias variables diferentes, como el recubrimiento de azúcar, las proteínas, el ARN y el ADN.
Para evitar errores, tomaron un producto original (cepa S) y extrajeron sus componentes. Primer eliminaron los
lípidos y carbohidratos (azucares provenientes del polisacárido que recubre a las células). Después, probaron la
capacidad del nuevo producto para transformarse. Cuando descubrieron que podía transformarse, pasaron a
eliminar un componente diferente y lo probaron. Este proceso de eliminación es necesario para un experimento de
calidad porque permite que se prueben varias variables, pero sólo una variable a la vez.
Independientemente, Alfred Hershey y Martha Chase realizaron una serie de experimentos para confirmar si el ADN
o las proteínas son el material hereditario (figura 5). Hershey y Chase insertaron elementos radiactivos en los
bacteriófagos (proteínas y ADN por separado). Cuando los bacteriófagos con el ADN marcado radioactivamente
infectaron a las células bacterianas, las células nuevas contenían el material radiactivo en sus estructuras. Así mismo,
cuando los bacteriófagos con las proteínas marcadas radioactivamente infectaron a las células, las bacterias nuevas no
estaban marcadas. Por lo tanto, el experimento Hershey-Chase, concluyó que el ADN, es el material genético
hereditario. En 1953 Watson y Crick usando los resultados de Rosalind Franklin sin su consentimiento (que estaban
por publicarse) proporcionados de manera desleal por Wilkins, consiguen descifrar y dan la primera visión “teórica”
de la estructura molecular del ADN (Watson & Crick, 1953).
Figura 5. Experimento de Hershey y Martha Chase, utilizando bacteriófagos T2 con proteínas marcadas radioactivamente
(amarillo), y ADN marcado radioactivamente (azul) con este experimento pudieron demostrar que el ADN es el portador de
la información genética ya que solo el ADN conservaba la marca radioactiva, ya que se transmitieron a las generaciones
posteriores. Imagen modificada de: http://www.yourgenome.org
En el mismo volumen de la revista Nature, Rosalind Franklin y Wilkins de manera independiente reportar estructuras
cristalográficas del ADN proporcionado una primera visión experimental de su estructura y aspectos de su posible
función (Franklin & Gosling, 1953; Wilkins, M.H.F., Stokes A.R., Wilson H.R, 1953). Una década más tarde, Robert
W. Holley, Har Gobind Khorana, Marshall W. Nirenberg, y sus colegas consiguen descifrar el código genético (para
más detalles consultar Articulo de Gen) (Singer, 1968). Con esta información se cimientan las bases para la genética
molecular, la biología molecular y la biotecnología, ya que esta descifrar el código permite vislumbrar como a partir
de una molécula compuesta de sólo cuatro diferentes bloques de construcción (A, T, C, G) es posible la riqueza y
abundancia de vida en nuestro planeta.
Primeras aplicaciones del uso del perfil de ADN

Ciencias forenses
El perfil de ADN, es una técnica que analiza los atributos únicos del ADN de una persona. La aplicación de los
perfiles de ADN ha revolucionado las pruebas de maternidad/paternidad, la medicina forense y la identificación de
víctimas en desastres. El término “huellas dactilares de ADN” fue acuñado para aludir al uso tradicional de huellas
dactilares como medio de identificación humana. Las huellas dactilares clásicas están sujetas a interpretación y las
muestras utilizables pueden ser difíciles de obtener. Cuando se lleva a cabo correctamente, las pruebas basadas en el
ADN no sólo proporcionan evidencia excluyente, sino que pueden proporcionar evidencia de la identidad de una
persona sin sesgo. La primera prueba práctica de la huella dactilar del ADN, se realizó en 1983 e implicó una lucha
de dos años por parte de Christiana Sarbah y su hijo, Andrew, para probar al Ministerio de Inglaterra que eran, madre
de Andrew. Andrew llegó a Inglaterra después de una larga estancia en Ghana con su padre (separado de Christiana).
Funcionarios de inmigración lo mantuvieron en el aeropuerto de Heathrow, alegando que su pasaporte era falso o que
se había hecho una sustitución. Sólo después de un perfil de ADN se demostró su parentesco con Christiana Sarbah y
se le permitió a Andrew permanecer en Londres.
En 1994, se creó el Proyecto Inocencia, tomando el caso de Marvin Lamont Anderson, condenado en 1983 por
violación, secuestro, sodomía y robo en Virginia, basado casi en su totalidad en la identificación de la víctima.
Anderson fue sentenciado a 210 años, aunque durante el juicio hubo evidencia de que otra persona pudo haber
cometido el crimen. Anderson cumplió 15 años de su condena en la Penitenciaría del Estado de Virginia y cuatro años
más en libertad condicional. Cuando el Proyecto Inocencia asumió el caso de Anderson, tuvieron dificultades para
obtener la evidencia. La policía, el fiscal y la corte sostuvieron que el estuche de violación con la evidencia había sido
destruido. En 2001, el Dr. Paul Ferrara, Director de la División de Ciencias Forenses de Virginia, localizó algunos
hisopos del kit de violación que quedaron en el cuaderno de laboratorio del científico forense original asignado al
caso de Anderson. Aunque el ADN se encontraba degradado era suficiente para producir un perfil de ADN con cuatro
marcadores cortos de repetición en tándem (STR). El perfil STR de Anderson no coincidía mostrando que él no era el
violador, y obteniendo su libertad (Innocence Project, 2017).
Perfil de ADN en medicina
La aplicación de la ciencia del ADN a la de alud y el bienestar humano está cambiando la investigación médica y
clínica. Uno de las primeras investigaciones que destaco en el área científica fueron los hallazgos de Mary-Claire
King una científica destacada de estado unidos se propuso buscar genes relacionados en el cáncer de mama. Se
dedicó a recolectar datos de familias con una alta incidencia de cáncer de mama de inicio precoz. En 1990 King
demostró que un solo gen del cromosoma 17, conocido como BRCA1, era responsable por varios cánceres de mamas
y ovarios (entre un 5-10% de todos los casos de cáncer de mamas pueden ser hereditarios) (Hall et al., 1990). El
descubrimiento del “gen del cáncer de mamas” revolucionó el estudio de muchas otras enfermedades, y modificó una
posición general entre los científicos contraria a sus hipótesis sobre la existencia de una relación entre la genética y
algunas enfermedades humanas complejas. La técnica desarrollada por la Dra. King para identificar el BRCA1 se ha
probado con valiosos resultados para la detección del cáncer de mama y desde su descubrimiento se ha aplicado su
técnica para el estudio de muchas otros tipos de cáncer como el ovárico, próstata (Barrois et al., 2004; Gallagher et
al., 2010; Wooster & Weber, 2003).
Las aplicaciones del uso del ADN han tenido un gran impacto no solo en las ciencias médicas, sino también, en la
biotecnología, farmacogenómica y en el estudio de la ancestria del humano y otros organismos. El desarrollo de
métodos para su aislamiento y purificación hace posible su manipulación en el laboratorio como el uso de enzimas de
restricción, la clonación de secuencias especificas o la amplificación mediante métodos como la PCR. Además, se
puede generar secuencias de ADN artificiales e insertarlas dentro de plásmidos en otros organismos o mediante
biobalística o vectores virales, entre otros (ver métodos biología molecular) (Sambrook, Fritsch, & Maniatis, 1989).
Los organismos generados con estas técnicas sirven para producir generalmente proteínas recombinantes u otras
biomoléculas de interés. El uso intensivo del ADN es de suma importancia para las investigaciones en biología
molecular, agricultura y ganadería además de la biomedicina (Daniell & Dhingra, 2002; Houdebine, 2007; Liu, Yuan,
& Stewart Jr, 2013).
Recientemente, la revolución genómica (el estudio de todo el material genético: ADN dentro de una célula, tejido u
organismo) ha catapultado a la biología molecular en el campo de la biología de sistemas. Estas dos líneas de
investigación han convergido para formar la biología de sistemas contemporánea. La biología de sistemas implica el
modelado matemático de sistemas biológicos complejos. Uno de los objetivos de la biología de sistemas es modelar y
descubrir propiedades emergentes en células, tejidos y organismos cuya descripción teórica sólo es posible en el
ámbito de competencia de la biología de sistemas. En la última década, este campo se ha desarrollado rápidamente y
aunque se han estado describiendo sistemas cada vez más complejos, realizar una descripción completa es mucho
más importante que simplemente agregar componentes adicionales a un modelo. La posibilidad de realizar este tipo
de estudios (descripciones completas) causará un cambio tanto en el paradigma teórico como a nivel experimental
(Snoep & Westerhoff, 2005). En organismos unicelulares (levaduras y bacterias) y líneas celulares bien definidas de
organismos superiores (humano, ratón, etc.), los enfoques de sistemas están dando pasos importantes hacia
aplicaciones en biotecnológicas (Westerhoff & Palsson, 2004).
Biología de sistemas en cáncer
La biología de sistemas en el estudio del cáncer es un ejemplo del enfoque de biología de sistemas. Se trabaja con los
datos específicos como datos genéticos y epigenéticos, además se analizan las redes de interacción intracelular y
extracelular (Masoudi-Nejad et al., 2015) provenientes de líneas celulares de cáncer, modelos de ratón y muestras de
pacientes.
Uno de los objetivos principales que persigue la biología de sistemas en cáncer es mejorar el diagnóstico, mejorar su
clasificación y predecir los resultados de un tratamiento específico, que son las bases para una medicina
personalizada (Butcher, Berg, & Kunkel, 2004). Aunque los modelos moleculares de la función de las células y
tejidos humanos son aún un objetivo distante, los esfuerzos de biología de sistemas ya están influyendo en el
descubrimiento de fármacos (Butcher et al., 2004).
Se ha propuesto poner un mayor énfasis en los fármacos multicomponentes los cuales son un estándar en la
quimioterapia, y su desarrollo ha requerido pruebas empíricas arduas. La aplicación de modelos matemáticos con
validación experimental ayudan a la formulación de nuevas terapias, particularmente aquellas adaptadas a las
necesidades específicas de cada paciente (Butcher et al., 2004; Fitzgerald, Schoeberl, Nielsen, & Sorger, 2006). Los
análisis a gran escala de genes (transcriptomas), proteínas (proteomas) y metabolitos (metabolomas) conocidas como
las ‘ómicas’; acelerarán dramáticamente la generación de hipótesis y se pondrán aprueba nuevos y mejores modelos
del cáncer. Estas simulaciones por computadora ayudan a priorizar las metas para el diseño de ensayos clínicos. Los
enfoques de biología de sistemas del cáncer son una promesa alentadora que podrá mejorar la toma de decisiones en
el desarrollo farmacéutico (Butcher et al., 2004).
Referencias:
Avery, O. T., & Macleod, C. M. (1994). Studies on the Chemical Inducing

Nature Types of the Substance Transformation. The Journal of Experimental
Medicine, 79(2), 137–158. Retrieved from
http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?
artid=2135445&tool=pmcentrez&rendertype=abstract
Barrois, M., Bièche, I., Mazoyer, S., Champème, M. H., Bressac-de

Paillerets, B., & Lidereau, R. (2004). Real-time PCR-based gene dosage
assay for detecting BRCA1 rearrangements in breast-ovarian cancer families.
Clinical Genetics, 65(2), 131–136. http://doi.org/10.1111/j.0009-
9163.2004.00200.x
Butcher, E. C., Berg, E. L., & Kunkel, E. J. (2004). Systems biology in drug
discovery. Nature Biotechnology, 22(10), 1253–1259.
http://doi.org/10.1038/nbt1017
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Cómo citar: Checa Rojas, A. (2017, 09 de Mayo ) ADN: Conceptos básicos y aplicaciones. Conogasi, Conocimiento
para la vida. Fecha de consulta: Mayo 7, 2019
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Avery, O. T., & Macleod, C. M. (1994). Studies on the Chemical Inducing

Barrois, M., Bièche, I., Mazoyer, S., Champème, M. H., Bressac-de

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