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Asignatura: Biología
Informe de biología # 4
Título de experiencia
Extracción de ácidos nucleicos
Elaborado por:
Cedeño Mónica
Córdoba Dialineth
De León Caroline
Domínguez Gabriel
Esturain Hyalette
Hamilton Allison
Grupo: 1°a
En consideración a: Lurys Martínez
2019
En el campo de la observación, la oportunidad sólo favorece a la mente preparada.
Louis Pasteur
INTRODUCCIÓN
Los ácidos nucléicos constituyen el material genético de los organismos y son necesarios
para el almacenamiento y la expresión de la información genética. Existen dos tipos de ácidos
nucléicos química y estructuralmente distintos: el ácido desoxirribonucléico (ADN) y el
ácido ribonucléico (ARN); ambos se encuentran en todas las células procariotas, eucariotas
y virus. El ADN funciona como el almacén de la información genética y se localiza en los
cromosomas del núcleo, las mitocondrias y los cloroplastos de las células eucariotas. En las
células procariotas el ADN se encuentra en su único cromosoma y, de manera extra -
cromosómica, en forma de plásmidos. El ARN interviene en la transferencia de la
información contenida en el ADN hacia los compartimientos celulares. Se encuentra en el
núcleo, el citoplasma, la matriz mitocondrial y el estroma de cloroplastos de células
eucariotas y en el citosol de células procariotas.
El descubrimiento de los ácidos nucléicos se debe a Johan Friedrich Miescher, que en el año
1869 aisló de los núcleos de las células una sustancia ácida a la que llamó nucleína, nombre
que posteriormente se cambió a ácido nucléico.
Para la extracción simple del ADN de células animales y vegetales utilizamos diferentes
reactivos como:
el detergente
la sal (NaCl)
el alcohol de 95% frio.
Ya que cada uno tiene su función, que en conjunto hacen posible la extracción de los
ácidos nucléicos.
Al realizar la extracción del ADN pudimos observar su estructura fibrilar.
RESULTADOS
Procedimiento A
Este no se
realizo
A los 25 minutos pudimos observar
Procedimiento B
EXTRACCION DEL DNA DE LA MUCOSA ORAL
3. Para colectarlas células de la mucosa oral enjuague la boca por uno o dos
minutos, con la solución de extracción o lisis 5 ml, que se encuentre en el tubo de
ensayo marcado para tal fin. Para optimizar la recolección de células, frote la lengua
en las paredes de la boca varias veces durante el enjuague.
9. El etanol se debe verter de forma q valla resbalando por las paredes del tubo.
10. Observe cuidadosamente como se forman dos fase o capas. Determine el punto
en que se juntan las dos capas.
Para poder observar y obtener la muestra, nuestra compañera debía tener la boca limpia y
enjuagársela. Este procedimiento lo hizo aproximadamente por 2 minutos , luego de esto,
preparamos la solución de extracción o lisis con NaCl y NaHCO3( permite colectar las
células de la mucosa). Debía frotar la lengua contra las paredes de la boca varias veces de
2 a 3 minutos.
Lugo vertimos esta solución en el vaso químico le agregamos detergente (romper la
membrana celular) y lo mezclamos suavemente hasta que se homogenizara, pero sin crear
burbujas.
Luego pasábamos con una pipeta 2 ml de la solución de lisis celular al primer tubo, lo
dejábamos reposar, lo inclinamos y le añadimos 4ml de alcohol (precipita el ADN)
lentamente por las paredes. Y pudimos observar el ADN precipitado.
MATERIALES:
• Un tomate maduro
• Cuchillo y tabla
• 2 bolsas plásticas
• 12 vasos precipitados
• 1 colador de tela
• 2 ml de detergente
• 2 ó 3 granos de sal gruesa
• Tubos de ensayo y gradilla (sustituibles por frascos pequeños o vasos)
• 6 pipetas de 10 ml
• Etanol de 95% bien frio (el etanol debe ser colocado en el congelador al menos un
día antes de la realización de la practica).
• Varilla de madera
• Solución de NaCl al 1.5%
• Bicarbonato sódico al 5%. Ambas en agua destilada
PROCEDIMIENTO A:
1. ¿Por qué no se obtienen con este procedimiento los ácidos nucleicos por separados?
2. ¿Por qué el etanol debe estar frío, que ocurriría si se utiliza a temperatura normal?
Para separar el ADN del resto de moléculas presentes, se añade alcohol frío a la
muestra. Como consecuencia, el ADN precipitará porque es menos soluble en alcohol
que en agua. Cuanto más frío esté el etanol, menos soluble será el ADN en él. Esto es
similar a la solubilidad del azúcar en el té (o en cualquier otra bebida); así, el azúcar se
disuelve con más facilidad en té caliente que en té helado. En presencia de altas
concentraciones de sal y de alcohol frío, el ADN liberado de la célula precipita y se
agrega hasta poder visualizarse ¡a simple vista! Las otras moléculas en el extracto
celular, como los aminoácidos y carbohidratos, permanecen disueltas en el alcohol, el
agua y no se pueden visualizar. Se necesitan miles de cadenas de ADN para formar una
fibra lo suficientemente grande para poder ser visible. Cada cadena tiene miles de
genes, así que estaríamos viendo millones de genes a la vez.
no obstante, se podrá observar el ADN procedente de miles de células.
3. ¿Por qué se debe usar un detergente durante la preparación de la muestra? Explique
detalladamente su respuesta.
Detergente: Las membranas de las células están formadas por dos capas de lípidos
con proteínas transmembrana a través de estas. El detergente ayuda a romper la bicapa
de fosfolípidos de las membranas plasmáticas y la envoltura nuclear (Imagen 1).
Los lípidos de la membrana se descomponen debido al detergente que deshace las
uniones que mantienen la membrana junta. Cuando el detergente se pone en contacto
con los lípidos éstos se separan de la membrana rompiéndola. La estructura de los
lípidos es similar a la del detergente y eso hace que se combinen, formando una
burbuja de detergente y lípidos.
Además, el detergente permite que las proteínas asociadas al ADN de gran longitud, se
fraccionen en cadenas más pequeñas y se puedan separar.
Ana Zita/ Extracción de ADN (experimento casero) / Toda Materia: Contenidos escolares.
2018 - 2019