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I. INTRODUCCIÓN
En la actualidad, el estudio de la variación genética entre individuos, poblaciones y
especies para explicar patrones y procesos ecológico evolutivos se aborda mediante
marcadores moleculares, segmentos de ADN con o sin función conocida que
proporcionan información sobre la variación alélica y permiten distinguir individuos
(Schlötterer 2004). Estos marcadores se obtienen con técnicas como la PCR (por
las siglas en inglés de Polymerase Chain Reaction) y secuenciación, que hacen
posible analizar la variación en la molécula del ADN con un detalle sin precedentes
(Schlöttlerer 2004; Hudson 2008).
De acuerdo con el tipo de célula en estudio, para aislar los ácidos nucleicos es
necesario romper la membrana y la pared celular mediante métodos físicos,
químicos o enzimáticos, para liberar las moléculas de DNA al medio extracelular. A
partir de esto, la purificación de los ácidos nucleicos se realiza mediante la
extracción de las proteínas y los lípidos con solventes orgánicos, y su recuperación,
en un paso posterior, al precipitarlos con alcohol (isopropanol o etanol).
Para poder estudiar esta molécula con detalle se precisa generalmente su
aislamiento de la célula, y para ello es necesario un conjunto de material e
instrumentos de laboratorio. Lo que este experimento pretende es un acercamiento
simple y sencillo a la técnica de extracción de DNA que se puede realizar en
cualquier hogar con materiales de la vida cotidiana.
II. OBJETIVOS
Extraer el ADN del tomate para su observación macroscópica
III. MARCO TEÓRICO
La función del DNA es la de almacenar y transferir la información genética que
conforma a un organismo y a su descendencia. El genoma de un individuo
comprende la totalidad de la información genética contenida en el DNA. El DNA
junto con los tres tipos de RNA (rRNA, tRNA y mRNA) participa en la biosíntesis
ordenada de los componentes de la célula, codificando la expresión espacio
temporal de las proteínas y respondiendo a los estímulos del medio ambiente.
(Mayitous, 2011)
Desde el punto de vista químico, el ADN es un polímero de nucleótidos, es decir, un
polinucleótido. Un polímero es un compuesto formado por muchas unidades simples
conectadas entre sí, como si fuera un largo tren formado por vagones. En el ADN,
cada vagón es un nucleótido, y cada nucleótido, a su vez, está formado por un
azúcar (la desoxirribosa), una base nitrogenada (que puede ser (A) adenina, (T)
timina, (C) citosina y (G) guanina) y un grupo fosfato que actúa como enganche de
cada vagón con el siguiente. Lo que distingue a un vagón (nucleótido) de otro es,
entonces, la base nitrogenada, y por ello la secuencia del ADN se especifica
nombrando sólo la secuencia de sus bases. (Mayitous, 2011)
La estructura del ADN es tridimensional, por lo tanto, posee tres niveles de distintas
características:
IV. MATERIALES
un colador pequeño
una cucharilla
cloruro de sodio
bicarbonato de sodio
detergente lava platos
alcohol al 96%
un tomate
matraz
mortero
vaso precipitado de 50ml
pipeta
porta y cubre objeto
probeta
V. PROCEDIMIENTO
Trituración del tomate: con la ayuda de un bisturí o cuchillo pelamos un tomate
entero y lo cortamos en trozos hasta obtener porciones pequeñas. Después
aplastamos todos los tozos con ayuda de un mortero hasta que estén
homogéneas. Depositamos lo triturado a un vaso precipitado, sin olvidarnos de
colar antes.
Figura n°04: 10ml de alcohol al 96% figura n°05: Hebra blanca de ADN en
Fuente: propia una porta objeto
Fuente: wikihow
VI. RESULTADOS
Alcohol
ADN
Restos celulares
del tomate
VII. DISCUSIONES
En la selección del protocolo adecuado de aislamiento de ADN, no se obtuvieron los
resultados deseados con el Kit de extracción Nucleón PHYTOpure. Este resultado
negativo pude deberse a los elevados niveles de fenolización que se alcanzaron en
la mayoría de las accesiones, fundamentalmente en las muestras de la especie A.
reticulata. Resultados similares de fenolización han sido obtenidos al extraer el ADN
de plantas de Anonáceas conservadas en el banco de germoplasma de Ecuador y
en Annona senegalensis Pers recolectadas en un bosque de Kachia Kaduna,
Nigeria (Ukwubile, 2014).
Las columnas del kit DNeasy utilizado en este estudio, tienen como características,
según QIAGEND, el intercambio Aniónicos. Se plantea que esta propiedad le
permite tener una alta afinidad por ácidos nucleicos, junto con el uso de sales
caotrópicas que rompen puentes de hidrógeno, aumentando la solubilidad de
sustancias no polares en agua, las que afectan fundamentalmente la estructura
secundaria de polímeros tales como ADN, ARN y proteínas (Chávez, 2008).
En el caso para el ADN de la muestra vegetal (fragaria) se consiguió realizar el
aislamiento con éxito obteniendo el precipitado esperado, pero no con la viscosidad
óptima para su extracción del tubo de ensayo con el asa. Debido a la acidificación
que sufrió el medio por la poca aplicación de bicarbonato de sodio para la realización
de la solución buffer. (Peralta, 2017)
VIII. CONCLUSIONES
en el experimento realizado sobre la extracción de ADN de un vegetal, en este
caso el tomate, se llegó a aislar con éxito el ADN del resto de las células. Lo que
no se pudo observar es macroscópicamente, debido a que no tuvimos los
materiales necesarios para poder extraer el ADN de la muestra obtenida.
WEBGRAFIA
https://www.clubensayos.com/Ciencia/Informe-De-Extraccion-De-ADN-
Vegetal/60779.html
https://es.slideshare.net/JhonnyPeralta3/extraccin-de-adn-80961115