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El laboratorio de inmunohematología
Lilia Rodríguez Sánchez*
* Jubilada. Banco Central de Sangre Centro Medico Nacional Siglo XXI. Instituto Mexicano del Seguro Social.
Rev Mex Med Tran, Vol. 10, Núm. 1, pp 5-13 • Octubre - Diciembre, 2017 5
Rodríguez SL. Laboratorio de inmunohematología
Etapa analítica:3 en esta etapa se contempla eritrocitos del paciente deben lavarse per-
todo el procesamiento analítico de las muestras fectamente utilizando solución salina 0.9% o
e implica el control de: solución amortiguadora pH 7. Si se trata de
un paciente recién transfundido considerar
A. Las muestras. que pudieran presentarse dobles pobla-
B. Los reactivos. ciones celulares, si el paciente es un recién
C. Los métodos analíticos. nacido menor de seis meses los anticuerpos
D. Control de material de vidrio (limpieza). son transferidos pasivamente de la madre
al RN, etc. En pruebas de compatibilidad de
A. Las muestras concentrados plaquetarios, sobre todo los
obtenidos por aféresis, la muestra piloto del
La calidad de las muestras puede verse afecta- componente deberá centrifugarse perfecta-
da por las técnicas de extracción, separación, mente con el fin de evitar interferencia por
conservación y del origen. las plaquetas.
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Avidez
Mezclar
El diámetro de la
Eritrocitos 1 gota eritrocitos mezcla no debe ex-
Al 10% ABO + ceder de 25 mm de
Al 40% (Rh) 1 gota antisuero diámetro
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Leer
Se toma el tiempo desde el
momento de mezclar hasta aglutinación Rotar la placa
el inicio de la aglutinación
de lado a lado
(cronómetro)
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Y el resultado debe anotarse en cruces. marcas con mismo título y diferentes grados
de aglutinación. En el cuadro II se muestra la
• Técnica en gel, fase sólida o perlas de correspondencia entre los grados de agluti-
vidrio: Deben revisarse las instrucciones del nación y el puntaje. Para el ejemplo mostrado
proveedor. en la figura 2 el puntaje es de 60.
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Las técnicas más empleadas son: Para el control de calidad de las técnicas
puede emplearse un suero humano o un suero
• Técnica salina monoclonal diluido que contenga un anticuer-
• Uso de enzimas po conocido, enfrentarlo contra dos células,
• Técnica de LISS (solución de baja fuerza iónica) una que tenga el antígeno correspondiente
• Otras (heterocigoto) y una negativa. Debe correrse
Realizar diluciones seriadas antisuero con solución salina isotónica (volumen a volumen)
DE
SE
CHAR
1 Vol
Suero 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 El tubo en don-
puro de todavía se
observa agluti-
nación corres-
ponde a la dilu-
Adicionar una gota de la suspensión de eritrocitos correspondientes (de 2 a 4%) ción 1/64, por
mezclar gentilmente y centrifugar (30s a 3400 rpm) y leer lo que el título
es 64.
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4+ 4+ 3+ 2+ 2+ 1+ 1+ Neg. Neg. Neg.
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Para los resultados en tarjeta se clasifican se- lenglicol, solución de baja fuerza iónica pueden
gún el grado de aglutinación como se muestra ser demostrados solamente con la prueba de
en la figura 3. antiglobulina indirecta o suero de Coombs.
Para determinar la expresión débil del antíge- Por ser estas características imprevisibles, para
no D se utiliza la técnica en tubo con un antisuero su demostración la mayor parte de los bancos
anti-D que contenga anticuerpos del tipo IgG, emplean técnicas de rutina combinadas, como
la prueba se incuba por aproximadamente 30 la técnica salina, medio de alta concentración
min en baño María a temperatura de 37 oC y proteica medios enzimáticos y/o antiglobulina
se lleva a fase de Coombs. Un resultado posi- humana.
tivo debe etiquetarse como Rho D débilmente Para el estudio en inmunohematología los
positivo o utilizar anticuerpos específicos contra anticuerpos inmunes son aquéllos producidos
las diferentes clonas del antígeno D para deter- como respuesta a una aloinmunización y pueden
minar las diferentes variantes, la más común es hallarse en pacientes que han tenido transfusiones
el DVI+, algunas tarjetas de gel contienen estos o mujeres que hayan tenido embarazos previos.
anticuerpos específicos. Es importante identificarlos, ya que algunos tienen
importancia clínica, esto es, pueden provocar
Investigación de anticuerpos fuera del reacciones adversas en caso de una transfusión
sistema ABO (anticuerpos irregulares de incompatible (Cuadro III).
importancia clínica)
Técnicas
Se les llama irregulares porque, en contraste con
Para la identificación pueden utilizarse dife-
los anticuerpos del sistema ABO que se encuen-
rentes medios de reacción siempre respetando
tran comúnmente en todos los individuos sanos,
tiempos de incubación y técnicas,7 en el cuadro
estos anticuerpos sólo se observan en algunos
IV se muestra el protocolo que se realiza en el
pacientes o donadores que han sido sensibi-
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lizados. Los anticuerpos irregulares son poco
La mayoría de los anticuerpos inmunes son
frecuentes y pueden hallarse como anticuerpos
del tipo IgG, por lo que la reacción se lleva en
hemolizantes, aglutinantes o sensibilizantes.
dos fases:
Se evidencian a diferentes temperaturas in
vitro y para su observación pueden requerir 1. Una primera fase a temperatura de 37 °C
sustancias que favorezcan su demostración de sensibilización, el anticuerpo se fija a la
como: enzimas o substancias como el polieti- membrana del glóbulo rojo.
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Figura 3.
Grados de aglutinación
en técnica de tarjeta
4+ 3+ 2+ 1+ 0 0 de gel.
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Correspondencia:
1. La transfusión se lleve a cabo oportunamente Dra. Lilia Rodríguez Sánchez
al enfermo preciso con la técnica adecuada. E-mail: liliarodsan12@gmail.com
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