Clase VI Mutación como fuente de variación

del material genético y de enfermedad

Prof. Dr. Rodrigo Barra Eaglehurst
2008
La estabilidad del genoma y la fidelidad de la
transmisión de su mensaje de una generación
celular a otra, es fundamental para el
funcionamiento de un organismo (Friedberg
E. 2003).
Las características físico-químicas de la
molécula de DNA no constituyen una
garantía para dicha estabilidad (Hoeimakers J.
2001).
Mutación

Se define como un cambio o alteración del

material genético.

Son el verdadero origen de la variación
genética. Sin ellas, no ocurriría la evolución.
El daño en el DNA
puede ser definido como
modificaciones en la
estructura o en la
secuencia de los
nucleótidos que lo
constituyen.
Daño en el DNA endógeno

Modificaciones o cambios en el DNA que

surgen como errores introducidos durante
su metabolismo (Smith 1992). El tipo de
daño endógeno más frecuente es el daño de
bases y fracturas monocatenarias.
Tipos de daño endógeno

1. Bases mal complementadas:

1.1 Errores en la replicación, reparación y
recombinación del DNA.
Tasa de error de la replicación del DNA es
de 1 en 10 millones de pares de bases
1.2 Desaminación de
bases.
Tres de las cuatro
bases del DNA (C, A y
G) contiene grupos
amino exocíclicos que
se pueden perder (pH
y Tº)
La consecuencia de la
desaminación de las bases
son los errores en los
apareamiento del DNA.
1.3 Cambios Tautoméricos:
Las bases del DNA pueden
espontáneamente experimentar
reordenamientos transitorios de uniones,
para formar isómeros estructurales o
tautómeros.
Consecuencia: errores en los apareamiento
del DNA.
2. Alteraciones estructurales de bases

Una fuente
importante de daño
endógeno al DNA
son las especies
reactivas del oxigeno
generadas durante el
metabolismo celular
normal
Daño exógeno al DNA

El daño exógeno corresponde a lesiones en

el DNA producto del efecto de diversos
agentes físicos, químicos o biológicos
ambientales (Friedberg 1985)
Tipos de lesiones más frecuentes en el DNA

a. Alteraciones estructurales de bases o nucléosidos.

b. Remoción de bases.
c. Incorporación de bases incorrectas.
d. Deleción o adicción de bases.
e. Formación de dímeros de pirimidina.
f. Fracturas de cadena.
g. Puentes intra o intercatenarios.
h. Unión de proteínas no histónicas al DNA.
NUMERO Y TIPO DE LESIONES INDUCIDAS AL DNA
POR RADIACIONES IONIZANTES.
Tipo de lesión Número por Gy

Fracturas dobles 40

Fracturas simples 500-1000

Daño de bases 1000-2000

Daño a las pentosas 800-1600

Uniones cruzadas DNA-DNA 30

Uniones cruzadas DNA-Proteínas 150

Sitios alcalinos lábiles 200-300

 Daño al
DNA

Sensores del daño

Apoptosis
Reparación
del daño
Respuesta Arresto del
Modificaciones Ciclo celular
transcripcional De la cromatina
 Agentes de daño Consecuencias

Rayos X Errores de
Rayos X Replicación Arresto
Radicales oxidantes Luz UV citostáticos del
Agentes Alquilantes Hidrocarburos
Reacciones espontáneas policíclicos Ciclo celular

Inhibición de:
transcripción
Replicación
segregación Apoptosis
cromosómica (muerte
celular)
Daño de bases Dímero de T Fractura Errores de
Fracturas mono- Alquilación Bicatenaria Complementación
catenarias de bases

Mutaciones
Aberraciones
HR NHEJ MMR Cromosó- Cáncer
BER NER BER micas Envejecimiento
NER Abortos
Vías de
Enfermedad
reparación

Esquema general de la respuesta celular al daño en el DNA

adaptada de Hoeijmakers J. Nature 2001
 G1 S G2 M

ATM ATR ATM ATM

TP53 Chk2 Chk1 Chk2 Chk2 TP53

p21 Cdc25 p21

CDK2●Cyclin E CDK2●Cyclin A CDK1●Cyclin B

G1 S S1 S2 S3 G2 G2 M

Fig. 4
 DNA damage

Rad3 (ATM?)

Chk1
14.3.3

Cdc25 P—Cdc25 P—Cdc25-14.3.3

Cdc2 PTyr-Cdc2

Mitosis G2 arrest

Wee1

Current Opinion in Cell Biology

 Principales mecanismos de reparación
del daño al DNA

1. Reparación con reversión del daño

a. Fotorreactivación.
b. Eliminación del grupo alquilo de O6 alquil
guanina.
c. Reposición de purinas en sitios apúricos.
d. Restablecimientos de enlaces fosfodiéster.
2. Reparación con excisión del daño:
a. Excisión de bases dañadas (BER).
b. Excisión de nucleótidos (NER).

c. Reparación de bases mal complementadas

(mismatch repair).
d. Reparación de dobles fracturas:
recombinación homologa y el end joint.
Síndromes de Inestabilidad Cromosómica

Xeroderma pigmentosum.

Síndrome de Cockayne.

Tricotiodistrofia.

Ataxia telangiectasia.

Anemia de Fanconi.

Síndrome Nijmegen.

Síndrome de Bloom.
 Características de las patologías con trastornos en la
reparación del daño al DNA.

Envejecimiento Prematuro.

Predisposición al desarrollo de neoplasias.

Fragilidad cromosómica.

Retraso del crecimiento y desarrollo.

Malformaciones congénitas y abortos.

Fotosensibilidad y/o radiosensibilidad.

Alta sensibilidad a agentes mutagénicos químicos.
 Universidad de Chile.
Facultad de Medicina.
Instituto de Ciencias Biomédicas.
Programa de Genética Humana.
Laboratorio de Citogenética humana.
Dr. Rodrigo Barra Eaglehurst.

Metafase normal
Metafase con aberraciones
cromosómicas espontáneas.
Xeroderma Pigmentosum

Enfermedad pigmentaria
de causa genética.

Herencia autosómica
recesiva.

Incidencia 2 a 4 por
millón.

1/millón EEUU a
15/millón Norte de
África y Japón.

Elevada sensibilidad
a los rayos
ultravioleta.

Dermatosis en zonas
foto expuestas
(rostro, brazos,
manos, etc.).

Lesiones oculares.

Envejecimiento
prematuro.

Elevada
sensibilidad a los
rayos
ultravioleta.

Dermatosis en
zonas foto
expuestas
(rostro, brazos,
manos, etc.).

Lesiones
oculares.

Envejecimiento
prematuro.

Deterioro
neurológico
progresivo.

Elevado riesgo
de cáncer a la
piel y otras
neoplasias

Mal pronostico,
fallecen en la
segunda o
tercera decada
de vida.
Esquema de los genes XP y su interación con otros sindromes
de inestabilidad cromosomica. Fuente www.GeneClinics.org
Manejo

Medidas físicas
de protección
contra la luz
Ultravioleta.

Consejo genético:
riesgo de un
nuevo embarazo
de un 25 %.
Ataxia Telangiectasia

Síndrome genético
de herencia
autosómica recesiva
con un fenotipo
complejo.

Incidencia 1/40.000
a 1/100.000.

Frecuencia de
heterocigotos 1/300.

Mc Kinnon P. EMBO reporst 2004.


Degeneración
neuronal
progresiva
caracterizada por
una ataxia
cerebelosa
invalidante.

Telangiectasias
oculocutáneas.

Inmunodeficienci
a combinada
manifestada
como infecciones
sinopulmonares
crónicas.

Envejecimiento
prematuro.

Hipogonadismo.

Inestabilidad
genómica.

Hipersensibilidad a
radiación ionizante.

Predisposición
aumentada para
cáncer: linfomas,
leucemias y
tumores sólidos.

Gen supresor de tumores
ATM.

Locus 11q 22-23.

Portadores heterocigotos
tienen un riesgo
aumentado para cáncer de
mama y ovario.

Hoy es posible el estudio y
diagnóstico de mutaciones
de ATM en nuestro
medio.
 Daño en el Detención de la
DNA Replicación

ATM activación ATR Relocalización

Re localización

Mediadores, Transductores, Efectores

Modulación de la respuesta celular

Arresto ciclo celular, Reparación DNA, Remodelación cromatina, apoptosis

Inestabilidad Genómica

Cáncer

Esquema general de respuesta de ATM y ATR al daño del

DNA y su impacto en la inestabilidad geonómica y cáncer
adaptada de M.kastan & J.Bartek Nature 2004
Cáncer de mama y ovario

Es la segunda causa
de mortalidad por
cáncer femenino en
Chile y el mundo.

Incidencia de
60,4/100.000
mujeres mayores de
35 años.

15- 20 % de los casos tiene predisposición
genética.

Genes de susceptibilidad BRCA1 y BRCA2.

Otros genes asociados ATM, Check 2, p53,
RAD 51, etc.

¿Es posible dar un consejo
genético en una enfermedad
compleja?

Hoy es posible el estudio de
mutaciones en BRCA1 y 2, CHCK2,
ATM y de muchos otros genes, en
nuestro país.