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Depende del pH al que se encuentre el DNA.

Hipo crómico: el DNA expone menos las bases, por lo tanto al medir con espectrofotometría da menos
ABS.
Híper crómico: el DNA expone más sus bases, y por lo tanto absorbe más la luz UV.

 










Las proteínas son contaminantes, aumentan la Abs.

Las histonas hacen que el DNA este mas condensado, si esta mas condensado, se exponen menos las
bases, y son estas las que absorven la luz UV






En agua si es soluble, porque presenta carga. Una es por grupo fosfatos expuestos que se encuentran en
el ADN.

La interacción entre el agua y los grupos fosfatos forman capas de hidratación, ya que estos al presentar
cargas pueden interactuar con la parte polar del agua.

 


 





 


El patrón, es una cantidad CONOCIDA de ADN en una solución

Son 50 mg de ADN en 1 mL de solución, eso tiene una concentración definida, y a esa solución se le saca
la absorvancia a 260 nm, y te va a dar un nº X, después con la muestra problema, le sacas la ABS y
después haces regla de tres simple.

Si 50 mg tienen 1.0, x mg van a tener lo que acabas de calcular.

La concentración del DNA relacionada con la absorvancia, determina el grado de exposición de las bases.

 



c al fin y al cabo son protones o hidroxilos, entonces más al fin y al cabo son cargas positivas y
negativas.

La solubilidad se da por la interacción del agua con las cargas positivas o negativas del ADN en este
caso, entonces los puntos con carga positiva del ADN son las bases nitrogenadas y los puntos negativos,
son los grupos fosfatos de los enlaces fosfodiester

Entonces una solución con pH bajo, o sea muchos protones dando vueltas, se van a terminar uniendo a
los fosfatos, se van a neutralizar las cargas, y el ADN va a perder solubilidad.

En caso contrario con el pH alto, los (-OH) se unen a las bases.

: Las sales se disocian en agua y los iones interactúan ion-dipolo con el agua.

Las interacciones ion-dipolo, son más fuertes que las interacciones entre el agua y el ADN entonces,
mientras más sal haya en el agua, menos moléculas de agua estarán solubilizando el ADN.

Finalmente si hay muy pocas moléculas de agua, las hebras de ADN interactúan entre si y pueden
precipitar.


  







 
 





 


Las proteínas.
En su periferia tiene cargas positivas y negativas, entonces las + con las - , y las - con las +. Y forman
uniones débiles por carga, por lo tanto forman aglomerados muy grandes que terminan precipitando.


 







Cuando están en solución la formula es:

F= q1 x q2 x K
r2 x D
D(agua)= 80
D(alcohol)=20

Entonces si el denominador es menor, la Fuerza de cargas va a ser mayor. Que quiere decir eso, que las
fuerzas que se repelen, se van a repeler más fuerte, y las que se atraen, se atraen más fuertes.

Las fuerzas de cargas en el caso del ADN, las positivas (BASES) y negativas (FOSFATOS).

Para que una molécula sea soluble en agua, tiene que tener cargas positivas y/o negativas siempre.

El alcohol baja el dieléctrico del medio y aumenta la intensidad de las cargas, o sea de la interacción se
atraen o repelen con más fuerza. Además, el alcohol interacciona en su OH con el agua y reduce la
cantidad de moléculas que solubilizan el ADN.