HemosIL™

D-Dimer - 0020008500 PORTUGUÊS - Revisão do folheto 12/2007

Aplicação Prevista Nota: Evitar a formação de espuma quando proceder à homogeneização dos Limitações/interferências
reagentes e do calibrador reconstituídos. Bolhas no cimo do líquido, podem
Imunoensaio automatizado para a determinação quantitativa de D-Dímero em interferir com os sensores de líquido do aparelho. Concentrações de hemoglobina até 50 mg/dL, de bilirrubina até 5 mg/dL, de
plasma humano citratado por turbidimetria com partículas de látex, nos Sistemas lípidos até 1000 mg/dL e de factor reumatóide até 60 UI/mL não afectam os
de Coagulação da IL como um auxiliar no diagnóstico do tromboembolismo venoso Conservação e estabilidade dos reagentes resultados de D-Dímero nos Sistemas ACL, ACL Futura e ACL Advance.
(TEV) [tromboembolismo venoso profundo (TVP) e embolismo pulmonar (EP)]. Os reagentes fechados, que ainda não foram utilizados, são estáveis até ao final Concentrações de hemoglobina até 100 mg/dL, de bilirrubina até 10 mg/dL e de
do prazo de validade, que consta no rótulo, desde que conservados entre 2-8°C. triglicéridos até 1500 mg/dL não afectam os resultados de D-Dímero no ACL TOP.
Resumo e Príncipio Latex Reagent - Estabilidade após reconstituição: 1 mês a 2-8°C no recipiente A presença de factor reumatóide na amostra pode originar resultados falsamente
A degradação da fibrina estabilizada pelo Factor XIIIa por plasmina, cria uma original, 1 dia a 15°C no ACL® ELITE/ELITE PRO 8/9/10000, 6 horas a 15°C no positivos.
série de derivados solúveis que contêm D-Dímero (XDP).1 Quando a plasmina, ACL 6000/7000, 1 semana a 15°C nos Sistemas ACL Futura/ACL Advance ou O anticorpo monoclonal (MA-8D3) utilizado no Reagente Látex D-Dímer, tem
uma protease sérica, não está em presença de inibidores digere a fibrina 2 dias a 15°C no ACL TOP. Não congelar. especificidade principalmente pelo domínio D-Dímero dos produtos de
entrelaçada criando uma grande variedade de derivados solúveis cujos pesos degradação da fibrina entrelaçada. Observou-se uma ligeira reacção-cruzada
moleculares dependem da extensão da digestão. Estes produtos solúveis da Reaction Buffer - O reagente aberto é estável durante 1 mês a 2-8°C no com produtos de degradação do fibrinogénio em amostras de plasma, às quais
degradação contêm um neo-antigénio (domínio D-Dímero) que não está presente recipiente original, 1 dia a 15-25°C no ACL ELITE/ELITE PRO 8/9/10000, 6 horas se juntou mais de 20 µg/mL dos fragmentos purificados D e E.
na molécula original de fibrinogénio, nos seus produtos de degradação nem na a 15-25°C no ACL 6000/7000, 1 semana a 15°C nos Sistemas ACL Futura/ACL
Advance ou 2 dias a 15°C no ACL TOP. Os anticorpos humanos anti-ratinho (HAMA) em amostras podem causar uma
fibrina solúvel.2,3 A determinação de D-Dímero é cada vez mais utilizada para o sobre-estimação dos níveis de D-dímeros.
diagnóstico de trombose e para a monitorização de terapias trombolíticas.4 D-Dimer Calibrator - Estabilidade após reconstituição: 3 dias a 15-25°C, 1 mês a
Observam-se nívesi elevados de D-dímeros na trombose venosa profunda (TVP), 2-8°C ou 2 meses a -20°C no recipiente original. O calibrador pode ser descongelado Valores Esperados
no embolismo pulmonar (EP) e na coagulação vascular disseminada (SCID)”.5 a 37°C. Homogeneizar suavemente antes de utilizar. Não voltar a congelar.
Efectuou-se um estudo do limite de normalidade utilizando 30 amostras de
Durante uma gravidez normal os níveis de D-Dímero aumentam, mas muito Para obter uma estabilidade óptima retire os reagentes do aparelho e conserve-o dadores saudáveis do banco de sangue analisadas com vários lotes de
menos do que numa gravidez associada a complicações.6 Um resultado de entre 2-8°C, nos recipientes originais. reagentes D-Dimero e de calibrado. O número total de determinações foi de 240
D-Dímero negativo, associado a uma avaliação clínica de baixa probabilidade (8 vezes 30) para cada aparelho.
pré-teste, demonstrou ter um valor preditivo negativo elevado para TVP ou EP.7-15 Método de ensaio
O Reagente Látex D-Dímero é uma suspensão de partículas de látex de Seguir as instruções da técnica de acordo com o Manual do Operador e/ou com o Sistema N Limite Superior do Intervalo (unidades)
poliestireno de tamanho uniforme, às quais se juntou um anticorpo monoclonal Manual de Aplicações dos Instrumentos IL. Familia ACL 240 255 (ng/mL)
altamente específico contra o domínio D-Dímero contido nos derivados solúveis ACL Futura/ACL Advance 240 278 (ng/mL)
da fibrina. Quando se mistura um plasma, que contenha D-Dímero, com o Recolha e preparação da amostra
Reagente Látex e o Tampão de Reacção, as partículas aglutinam. O grau de Adicionar nove partes de sangue extraído recentemente por punção venosa a Num estudo separado com 231 amostras individuais de dadores do banco de
aglutinação é directamente proporcional à concentração de D-Dímero presente uma parte de citrato trissódico. Para efectuar a recolha, o manuseamento e a sangue, obtiveram-se os seguintes resultados:
no plasma. Os agregados provocam uma descida da luz transmitida a 405 nm de conservação da amostra devem seguir-se as recomendações referidas no Sistema N Limite Superior do Intervalo (unidades)
comprimento de onda (imunoensaio turbidimétrico).16 documento H21-A4 da CLSI.19 Caso as amostras tenham sido congeladas, ACL TOP 231 232 (ng/mL)
deverão ser descongeladas rapidamente a 37°C e deverão ser centrifugadas
Composição antes de serem analisadas. O ensaio deverá ser efectuado antes de terem Devido a várias variáveis que podem afectar os resultados (incluíndo a idade da
O kit D-Dimer (D-Dímero) é composto por: passado 2 horas da sua descongelação e centrifugação. população),25,27 cada laboratório deve estabelecer os seus intervalos de valores
normais. Para estabelecer um diagnóstico, os resultados da análise devem ser
R Latex Reagent (Núm. Cat.0020008520): recipientes 4 x 3 mL de uma Reagentes adicionais e plasmas de controlo utilizados em conjunto com a restante informação, incluindo a história clínica.
suspensão de partículas de látex de poliestereno, às quais se juntou um
anti-corpo monoclonal (MA-8D3) específico contra o D-Dímero. Apresenta-se Este kit não inclui os produtos abaixo mencionados, pelo que deverão ser Características técnicas
liofilizado. Contém albumina de soro bovino, tampão, estabilizadores e pedidos em separado:
Controlos de D-Dímero Núm. Cat. 0020008610 Precisão:
conservante. A precisão foi avaliada, intra e na totalidade (de análise para análise e de dia
Diluente de factores Núm. Cat. 0009757600
B Reaction Buffer (Núm. Cat.0020008521): recipientes 4 x 9 mL de um tampão para dia), ao longo de vários ensaios.
fosfato que contém albumina de soro bovino, estabilizadores e conservante. Controlo de Qualidade Familia ACL Média (ng/mL) CV% (Intra-ensaio) CV% (Total)
C D-Dimer Calibrator (Núm. Cat.0020008522): recipientes 2 x 1 mL de uma Para realizar um programa completo de Controlo de Qualidade, recomenda-se a Controlo D-Dímero Baixo 310 6,01 7,18
dissolução de D-Dímero parcialmente purificado a partir de fibrina humana utilização de dois níveis de controlo.20 Os controlos adequados para este Controlo D-Dímero Alto 732 2,42 2,99
digerida com plasmina. Apresenta-se liofilizado.Contém albumina de soro programa são D-Dímero Controlos Baixo e Alto. Cada laboratório deve Calibrador D-Dímero 1055 1,31 2,23
bovino, conservante e estabilizadores. estabelecer a sua própria média e desvio padrão e deve efectuar um programa
de controlo de qualidade para monitorizar os seus resultados. Os controlos ACL Futura/ACL Advance Média (ng/mL) CV% (Intra-ensaio) CV% (Total)
AVISOS E PRECAUÇÕES:
O material utilizado neste produto foi analisado com testes aprovados pela FDA e devem ser analisados uma vez em cada turno de 8 horas, de acordo com a Controlo D-Dímero Baixo 304 11,82 13,58
verificou-se a ausência de reacção ao Antigénio de Superfície da Hepatite B norma vigente no Laboratório. Ver Manual do Operador para mais informações. Controlo D-Dímero Alto 813 3,59 4,94
(HBsAg), aos anticorpos anti-HCV e anti-HIV 1/2. No entanto, deve-se manipular Consultar a publicação de Westgard e col. para identificar e solucionar situações Calibrador D-Dímero 1051 1,94 2,66
com precaução, como potencialmente infeccioso.17 anormais do Controlo de Qualidade.21 ACL TOP Média (ng/mL) CV% (Intra-ensaio) CV% (Total)
Todos os reagentes contêm azida sódica (0,1%), que pode provocar reacções Rastreabilidade dos calibradores e materiais de controlo
com os tubos metálicos, dando lugar a azidas altamente explosivas. Tomar as Controlo D-Dímero Baixo 340 4,6 7,7
devidas precauções quando se proceder à sua eliminação. Os valores referidos foram determinados através de diversas análises efectuadas Controlo D-Dímero Alto 729 2,5 4,5
Evitar o contacto com a pele e os olhos (S 24/25). Não deitar os resíduos no nos Sistemas de Coagulação da IL, utilizando um lote específico de reagente e Correlação: 23

esgoto (S 29). Usar vestuário de protecção adequado (S 36). comparando com um Padrão interno da IL. Como o Padrão Internacional D-Dímero Sistema declive intersecção r Método de referência
Para uso em diagnóstico in vitro. (D-Dimer International Standard), não se encontra actualmente disponível, este
padrão do Laboratório foi atríbuido de acordo com o critério de harmonização Familia ACL 1,26 240,4 0,998 EIA D-Dímero
Preparação proposto por W. Niewenhuizen.22,23 ACL Futura/ACL Advance 1,48 199,7 0,998 EIA D-Dímero
Latex Reagent: Dissolver o conteúdo do recipiente com 3 mL de água tipo II de ACL TOP 1,12 -16,0 0,993 HemosIL D-Dimer
acordo com a CLSI (anteriormente NCCLS) ou equivalente.18 Tapar o recipiente e Resultados em ACL Advance
homogeneizar suavemente. Verificar se o produto fica completamente dissolvido. Os resultados de D-Dímero são expressos em ng/mL. Para mais informações
Conservar o reagente entre 15-25°C durante 30 minutos. Misturar invertendo consultar o Manual do Utilizador.
suavemente o recipiente antes de utilizar. Não agitar. Nota: Devido à inexistência de um Padrão Internacional de Referência, alguns
Reaction Buffer: Misturar invertendo suavemente o recipiente. O reagente está fabricantes expressam os resultados do D-Dímero em FEU (Fibrinogen
pronto a ser utilizado. Não agitar. Equivalent Unit). A equivalência entre estas 2 unidades de medição é de
D-Dimer Calibrator: Dissolver o conteúdo do recipiente com 1 mL de água tipo II aproximadamente 2 FEU = 1 ng/mL.24
de acordo com a CLSI (anteriormente NCCLS) ou equivalente.18 Tapar o recipiente
e homogeneizar suavemente. Verificar se o produto fica completamente
dissolvido. Conservar o reagente entre 15-25°C durante 30 minutos. Misturar
invertendo suavemente o recipiente antes de utilizar. Não agitar.

3800-1958 R13 12/2007

Instrumentation Laboratory Company - Lexington, MA 02421-3125 (USA)
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)
HemosIL™
D-Dimer - 0020008500 PORTUGUÊS - Revisão do folheto 12/2007

Num estudo clínico adicional, comparou-se o este kit D-Dímer com um kit EIA
D-Dímero comercial. Foram analisadas amostras de 67 doentes (10 normais,
38 com CID, 9 com TVP e 10 com diversos estados da doença). Obteve-se uma
correlação (r) de 0,958 no ACL (n=67) e de 0,903 no ACL Futura/ACL Advance
(n=58). Foram encontrados níveis elevados de D-Dímero em doentes com um
diagnóstico clínico de TVP e de CID.
Foi realizado um estudo de resultados com 300 amostras congeladas de
doentes consecutivamente admitidos numa unidade de urgência, com suspeita
de EP ou TVP (frequência de doença de tromboembolismo venoso: 26%). Das
300 amostras, 78 foram confirmadas como TEV positivas (47 EP e 31 TVP) por
testes padrão objectivos e as restantes 222 foram confirmadas como negativas.
As amostras com resultados afectados por erros do aparelho não foram
incluídas nos cálculos.
Os resultados a seguir resumidos, baseiam-se num cut-off de 230 ng/mL:
Aparelho: Sensibilidade Especificidade Valor Preditivo
Negativo
Sistema N (95% C.I.) (95% C.I.) (95% C.I.)
ACL ELITE/ 297 100% 38% 100%
ELITE PRO (95,2% - 100%) (31,4% - 44,6%) (95,7% - 100%)
8/9/10000
ACL TOP 294 100% 36% 100%
(95,1% - 100%) (29,6% - 42,6%) (95,4% - 100%)
Estes resultados de precisão e de correlação foram obtidos utilizando lotes
específicos, de reagente e de controlo.
Limite de detecção:
Sistema
Familia ACL 140 ng/mL
ACL Futura/ACL Advance 156 ng/mL
ACL TOP 69 ng/mL
Lineariedade:
Sistema
Familia ACL, ACL Futura/ACL Advance e ACL TOP 200 - 1050 ng/mL
Este ensaio não demonstra efeito de prózona (i.e. excesso de antigénio) até
20000 ng/mL no Familia ACL e até 100000 ng/mL no ACL Futura/ACL Advance
e ACL TOP.
Amostras com resultados acima de 1050 ng/mL devem ser diluídas a 1:5 com
Diluente de factores (50 µL de amostra + 200 µL de Diluente), e devem ser
novamente analisadas. Este procedimento deve ser repetido caso o resultado
seja novamente acima de 1050 ng/mL. Os resultados impressos devem ser
multiplicados por 5, 25 ou 125 (dependendo do número de diluições efectuadas)
a fim de corregir a diluição. Os instrumentos com capacidade de activar a função
Auto Rerun, realizam automaticamente a diluição 1:5 alargando o intervalo do
teste a 5250 ng/mL. Amostras com valores superiores a este, devem ser diluídas
manualmente a 1:25 ou 1:125, reanalisadas com o ensaio padrão e os
resultados obtidos multiplicados pelo factor de diluição correspondente.

3800-1958 R13 12/2007

Instrumentation Laboratory Company - Lexington, MA 02421-3125 (USA)
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)
HemosIL™
D-Dimer - 0020008500 PORTUGUÊS - Revisão do folheto 12/2007

Bibliography / Literatur / Bibliografía / Bibliographie / Bibliografia /Bibliografia

1. Gaffney PJ, et al. Monoclonal antibodies to crosslinked fibrin degradation
products (XL-FDP) I, Characterization and preliminary evaluation in plasma,
British Journal of Haematology. 1988; 68: 83-90.
2. Palareti G. Fibrinogen/fibrin Degradation Products: Pathophysiology and
Clinical Application, Fibrinolysis. 1993; 7: 60-61.
3. Gaffney PJ. The Occurrence and Clinical Relevance of Fibrin Fragments in
Blood, Annals New York Academy of Sciences. 1983; 408: 407-423.
4. Bounameaux H, et al. Plasma Measurement of D-Dimer as Diagnostic Aid in
Suspected Venous Thromboembolism: An Overview,
Thrombosis and Haemostasis. 1994; 71 (1): 1-6.
5. Gaffney PJ, et al. Monoclonal antibodies to crosslinked fibrin degradation
products (XL-FDP) II, Evaluation in a variety of clinical conditions,
British Journal of Haematology. 1988; 68: 91-96.
6. Nolan TE, et al. Maternal Plasma D-Dimer Levels in Normal and Complicated
Pregnancies, Obstetrics & Gynecology. 1993; 81 (2): 235-238.
7. Anderson DR, and Wells PS. Improvements in the Diagnostic Approach for
Patients with Suspected Deep Vein Thrombosis or Pulmonary Embolism,
Thrombosis and Haemostasis. 1999; 82 (2): 878-886.
8. Kovacs MJ, MacKinnon KM, Anderson D, O’Rourke K, Keeney M, Kearon C,
Ginsberg J, Wells PS. A comparison of three rapid D-dimer methods for the
diagnosis of venous thromboembolism,
British J. Haematology. 2001; 115 (1): 140-146.
9. Wells PS, Anderson DR, Rodger M, Forgie M, Kearon C, Dreyer J, Kovacs G,
Mitchell M, Lewandowski B and Kovacs MJ. Evaluation of D-Dimer in the
Diagnosis of Suspected Deep-Vein Thrombosis,
N. Engl. J. Med. 2003; 349 (13):1227-35.
10. Oswald CT, Menon V, Stouffer GA. The use of D-Dimer in emergency room
patients with suspected deep vein thrombosis: a test whose time has come,
Journal of Thrombosis and Haemostasis, 2003; 1: 635-636.
11. Anderson DR, Kovacs MJ, Kovacs G, Stiell I, Mitchell M, Khoury V, Dryer J,
Ward J and Wells PS. Combined use of clinical assessment and D-Dimer to
improve the management of patients presenting to the emergency
department with suspected deep vein thrombosis (the EDITED study),
J Thromb Haemost, 2003; 1: 645-651.
12. Curtin N, Highe G, Harris M, Braunstein A, Demattia F, Coss L. Extensive 22. Tumanova I, Serra J. New quantitative assay for D-Dimer. Method
evaluation of the instrumentation laboratory IL test D-Dimer comparison study: standardization difficulties, Communication presented at
immunoturbidimetric assay on the ACL 9000 determines the D-Dimer cutoff the XIII International Congress on Fibrinolysis and Thrombolysis, Barcelona,
value for reliable exclusion of venous thromboembolism. June 24-28, 1996.
Lab Hematol. 2004;10 (2): 88-94.
23. Nieuwenhuizen W. A Reference Material for Harmonisation of D-Dimer
13. Gardiner C, Pennaneac’h C, Mackie IJ, Machin SJ, Walford C, Abe G, Shetty Assays, Thrombosis and Haemostasis. 1997; 77 (5): 1031-1033.
HGM, Bandyopadhyay S, Baker P, Kesteven PJL. Eight D-Dimer assays for
the exclusion of deep venous thrombosis. Medical and Healthcare products 24. Bos R, Laterveer-Vreeswijk GH, Lockwood D, Szewczyk K, Nieuwenhuizen
Regulatory Agency evaluation report MHRA 03088, November 2003. W. A new enzyme immunoassay for soluble fibrin in plasma, with a high
discriminating power for thrombotic disorders.
14. Harper P, Marson C, Grimmer A, Monahan K, Humm G, Baker B. The rapid Thromb Haemost. 1999 81(1): 54-59.
whole blood agglutination D-Dimer assay has poor sensitivity for use as an
exclusion test in suspected deep vein thrombosis. 25. Villa P, Ferrando F, Serra J, Faus H, Mira Y, Vaya A, Aznar J. Quantification
N Z Med J 2001. 114 (1126):61-64. of D-dimer using a new fully automated assay: its application for the
diagnosis of deep vein thrombosis, Haematologica. 2000 May; 85(5): 520-4.
15. Legnani C, Pancani C, Palareti G, Guazzaloca G, Coccheri S. Performance
of a new, fast D-Dimer test (IL Test D-Dimer) for the management of 26. Bounameaux, H. Should the D-Dimer Cut-off Value Be Increased in Elderly
outpatients with suspected deep vein thrombosis in emergency situations. Patients Suspected of Pulmonary Embolism?
Fibrinolysis & Proteolysis 1999. 13(3): 139-141. Thrombosis and Haemostasis. 2001; 85: 744.
16. Newman DJ, et al. Particle enhanced light scattering immunoassay, 27. Hart DJ, Hutchman G, Cuthbert RJG. Evaluation of an automated latex
Ann Clin Biochem. 1992; 29: 22-42. D-Dimer immunoassay in the clinical assessment of suspected venous
thromboembolism. Clin. Lab. Haem. 2002. 24:171-174.
17. Richmond JY, McKinney RW eds. Biosafety in Microbiological and Biomedical
Laboratories, U.S. Dept. of Health and Human Services,
Public Health Service, 4th Edition, 1999.
18. Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Preparation and Testing
of Reagent Water in the Clinical Laboratory, Third Edition, CLSI/NCCLS ACL, ACL Futura and ACL TOP are trademarks of Instrumentation Laboratory.
Document C3-A3; Vol. 17 No. 18. ©1997 Instrumentation Laboratory
Issued December 2007
19. Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Collection, Transport,
and Processing of Blood Specimens for Testing Plasma-Based Coagulation
Assays, Fourth Edition, CLSI/NCCLS Document H21-A4; Vol. 23 No. 35.
20. Zucker S, Cathey MH, West B. Preparation of Quality Control Specimens for
Coagulation, Am. J. Clin. Pathol. 1970; 53: 924-927.
21. Westgard JO, and Barry PL. Cost-Effective Quality Control: Managing the
Quality and Productivity of Analytical Process, AACC Press 1986.

Symbols used / Verwendete Symbole / Símbolos utilizados / Symboles utilisés / Simboli impiegati / Símbolos utilizados

In vitro diagnostic medical device Batch code Use by Temperature limitation Consult instructions for use Control Biological risks Manufacturer Authorised representative
In-vitro Diagnostikum Chargen-Bezeichnung Verwendbar bis Festgelegte Temperatur Beilage beachten Kontrollen Biologisches Risiko Hergestellt von Bevollmächtigter
De uso diagnóstico in vitro Identificación número Caducidad Temperatura de Consultar la metódica Control Riesgo biológico Fabricado por Representante autorizado
Dispositif mèdical de diagnostic in de lote Utilisable jusqu’à Almacenamiento Lire le mode d’emploi Contrôle Risque biologique Fabricant Mandataire
vitro Désignation du lot Da utilizzare prima del Températures limites de Vedere istruzioni per l’uso Controllo Rischio biologico Prodotto da Rappresentanza autorizzata
Per uso diagnostico in vitro Numero del lotto conservation Consultar as instruções de Fabricado por Representante autorizado
Data límite de Controlo Risco biológico
Dispositivo médico para utilização Número de lote utilização Limiti di temperatura utilização
em diagnóstico in vitro Límite de temperatura

3800-1958 R13 12/2007

Instrumentation Laboratory Company - Lexington, MA 02421-3125 (USA)
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)