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HEMATOLOGIA DE RÉPTEIS
- REVISÃO BIBLIOGRÁFICA-
1
Campinas, fev. 2009
i
HEMATOLOGIA DE RÉPTEIS
- REVISÃO BIBLIOGRÁFICA -
2
Trabalho monogáfico de conclusão do curso de
Clínica Médica e Cirúrgica de Animais
Selvagens e Exóticos (TCC), apresentado ao
Instituto Quallitas de pós-graduação como
requisito parcial para a obtenção do título de pós-
graduada em Clínica Médica e Cirúrgica de
Animais Selvagens e Exóticos, sob a orientação
da Profª. Nadia Almosny.
HEMATOLOGIA DE RÉPTEIS
- REVISÃO BIBLIOGRÁFICA -
3
Elaborado por Maria Cecília Lopes Bittencourt Falce
Aluna do curso de Clínica Médica e Cirúrgica de
Animais Selvagens e Exóticos do Instituto Quallitas de pós-
graduação.
_______________________________________________
Professor Avaliador.
4
Campinas, fev. 2009
iii
5
“A grandeza de uma nação pode ser julgada
pelo modo que seus animais são tratados.”
Mahatma Ghandi
iv
Resumo
6
intraeritrócitários, caso ocorram. Na segunda, as linhagens celulares são identificadas e
contabilizadas, assim, os parâmetros avaliados são: contagem total de leucócitos e a
contagem diferencial destes, dividida em heterófilos, eosinófilos, basófilos, monócitos e
linfócitos. A diminuição da série vermelha indica anemia. A anemia pode ser classificada
como hemorrágica (perda sanguínea), hemolítica (aumento da destruição das células) e não
regenerativas (diminuição na produção de células). Uma leucocitose é, em geral, resultante
de um processo infeccioso, mas também pode ocorrer após uma situação de estresse e após
uma situação de estresse e traumatismos. Assim como processos neoplásicos e
degenerativos. Por outro lado, uma leucopenia pode estar associada a doenças virais,
infecção bacteriana grave (septicemia avançada) e toxemias.
v
Abstract
7
Hematologic evaluation helps in the establishment of the health status of reptiles as well as
in the evaluation following treatment and other factors. However, it must be used carefully
once there are great diferences in normal paramethers among species and even among
individuals due to age, sex, nutritional status, management, etc. Hematology consists in the
study of blood cells, including the red and the white cells. The parameters evaluated for the
red cells are the total red blood cell count, hematocrit and hemoglobin level. Besides that,
celular paterns as well as intracelular parasites and inclusions, if present, are evaluated. In
the evaluation of the white blood cells, cellular lineages are identified and counted to
obtain the total and differential white blood cell count, in order to quantify the heterophils,
eosinophils, basophils, monocytes and linfocytes. A decrease in the red cell parameters
indicate anemia. Anemia may be classified as hemorrhagic (blood loss), hemolitic (red cell
destruction) and non regenerative (decrease in the production of the cells). A leukocytosis
is, in general, a result of an infectious process but may also occur after a stressing situation,
after a stressing situation and thrauma or due to neoplastic or degenerative processes. On
the other hand, a leucopenia may be associated with viral diseases, severe bacterial
infections (advanced septicemia) and toxemias.
8
Keys word: Red blood cell, Cell blood count (CBC), Herpetology, Leukocyte, Reptile
vi
SUMÁRIO
Página RESUMO............................................................................................................v
ABSTRACT .......................................................................................................vii
LISTA DE TABELAS ........................................................................................viii
LISTA DE FIGURAS..........................................................................................ix
INTRODUÇÃO ..................................................................................................1
REVISÃO DA LITERATURA ...........................................................................3
1.Coleta e Conservação de Amostras..................................................................3
1.1. Coleta............................... ..........................................................................3
1.2 Conservação................................................................................................4
2. Hematopoiese e Morfologia ........................................................................5
2.1 Eritrócitos......................................................................................................5
2.2Leucócitos ....................................................................................................14
2.3 Trombócitos.................................................................................................25
3.Hemoparasitas ….............................................................................................15
3.1 Família Haemogregorinidae..........................................................................18
3.1.1 Hepatozoon.sp...........................................................................................19
3.1.2 Haemogregarina sp....................................................................................20
4.Perfil Hematológico nas diferentes ordens e subordens de répteis....................21
4.1Ordem Squamata.............................................................................................21
4.1.1 Subordem Ophidia......................................................................................21
9
4.1.2 Subordem Suaria........................................................................................24
4.2 Ordem Chelonia.............................................................................................25
4.3 Crocodylia.......................................................................................................27
5. Interpretação do Hemograma.............................................................................31
6. Interpretação do Leucograma.............................................................................33
7.Interpretação das variações em Trombócitos......................................................36
CONCLUSÃO.......................................................................................................36
REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA......................................................................37
vii
LISTA DE TABELAS
10
11
viii
LISTA DE FIGURAS
12
Figura 13: Venipunção veia caudal ventral.....................................................................21
13
ix
INTRODUÇÃO
Nova Zelândia). Espalhados por quase todo o planeta, vivem, principalmente, em regiões
mantidos em cativeiro como nos de vida livre. Estudos hematológicos em répteis são
14
escassos e, ao contrário do que acontece em mamíferos e aves, poucos trabalhos podem ser
citados (CAMPBELL,2004).
A criação destes animais vem crescendo substancialmente nas últimas décadas, seja
“pets”. Esta última modalidade de criação, está trazendo estes animais cada vez mais para a
Muitos dos métodos usados nos estudos em mamíferos podem ser aplicados na
15
animal, idade, esforço físico, estado nutricional, condição fisiológica, e mental,
células sanguíneas dos répteis, destacando as principais alterações que podem ser
REVISÃO DE LITERATURA
1.1 Coleta
animais selvagens que são bastante sensíveis ao estresse que poderá alterar o resultado das
análises. A contenção física gera estresse e esse geralmente eleva o número de heterófilos,
a glicemia e diminui o número de linfócitos, além de outros valores sanguíneos. Por outro
lado, a contenção química também irá modificar alguns elementos do sangue. Muitos
técnicas utilizadas e hora em que foi realizada a coleta, assim como manejo , a estação do
ano, a idade do animal, possível esforço físico, o estado de excitação, o estado de nutrição,
16
Amostras de sangue para a hematologia e a bioquímica sérica podem ser coletadas por
1.2 Conservação
quelônios (CAMPBELL,2004).
efeitos, a amostra de sangue deve ser processada imediatamente após a coleta e as lâminas
devem ser preparadas o mais rápido possível. Para evitar a interferência do anticoagulante
17
Em répteis a contagem global de células necessita de uma adaptação para a contagem em
câmaras de Neubauer, pois todas são nucleadas e deverão ser observadas e contadas em
uma única fase; diferente dos métodos usados para hemogramas de mamíferos, em que se
2007).
do sangue é obtido em uma única diluição que pode ser efetuada com soro fisiológico,
gotas do corante para 10 ml de diluente como descrito por Almosny et al. Essa solução não
MONTEIRO, 2007).
2. Hematopoiese e Morfologia
2.1 Eritrócitos
eritróide (eritroblastos), mas, diferentemente dos mamíferos, estas podem ser geradas a
partir de outras fontes. Neste caso, o fígado e o baço são apontados como importantes
maduros podem se dividir por mitose dentro da corrente sanguínea e também dentro da
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medula. Está descrito que tais eritrócitos também podem se multiplicar por divisão
dos répteis, especialmente em animais muito jovens ou que estão sofrendo a ecdise. Eles
são células irregulares com um grande núcleo central e citoplasma basofílico e menores do
que os eritrócitos maduros. Atividades mitóticas associadas aos eritrócitos são comuns na
19
Inclusões circulares, pequenas e basofílicas freqüentemente são encontradas no
microscopia da imagem sugere que estas inclusões são organelas degeneradas (HAWKEY
2.2 Leucócitos
maduros migram para o endotélio celular dos sinusóides para entrar na corrente sanguínea.
Os estágios de maturação são semelhantes aos que ocorrem nas aves. As células maduras
maturidade, e nas células em que o núcleo é lobulado, ele passa de arredondado para
Heterófilos
Estas células são facilmente identificadas por seu grande tamanho (10 a 23 µm) e
20
por numerosos grânulos citoplasmáticos fusiformes e eosinofílicos, representando cerca de
40% dos leucócitos sanguíneos totais (RASKIN, 1999). O núcleo é único e geralmente
oval, porém em alguns lagartos eles podem ser multilobulados (RASKIN, 1999).
neutrofílicos (tipo I) e granulócito eosinofílico (tipo II) e não como heterófilos, pois ainda
21
Fonte: Almosny e Monteiro, material didático
Eosinófilos
Em grande parte dos répteis são grandes e circulares, possuem grânulos citoplasmáticos
22
Figura 5: Eosinófilo em extensão de sangue periférico de Caiman crocodilus
Basófilos
Geralmente são pequenos, mas o tamanho pode ser variado (7 a 20µm), são células
Estudos mostram que os basófilos dos répteis reagem por degranulação, liberando
histamina (ROSSKOPF,1999).
23
Linfócitos
podem ser encontrados em órgãos linfopoiéticos, como o baço (HAWKEY & DENNET,
1989).
azurófilos citoplasmático. Sua prevalência é variada, mas freqüentemente maior que 50%
Monócitos
24
Os monócitos geralmente são as maiores células da periferia sanguínea dos répteis,
e eles se assemelham aos monócitos dos mamíferos. Possuem formas que variam de
circular à amebóide. O núcleo também varia em forma, estando entre oval e lobulado. A
cromatina nuclear dos monócitos é menos condensada e relativamente mais pálida, quando
comparado ao núcleo dos linfócitos. O abundante citoplasma dos linfócitos cora-se em azul
acinzentado, e pode aparecer levemente opaco, e conter vacúolos (HAWKEY & DENNET,
Azurófilos
25
função semelhante a dos monócitos, de onde derivam. O tamanho da célula e o núcleo são
semelhantes aos monócitos. Até 20% dos leucócitos totais são de azurófilos em Ball pytons
2.3 Trombócitos
A produção de trombócitos nos répteis é similar à das aves. A célula madura elíptica
26
Fonte: Almosny,N.R.P.; material didático
Os trombócitos dos répteis são células nucleadas, com formato que varia de elíptico
a fusiforme. O núcleo, centralmente posicionado, possui uma cromatina nuclear densa, que
se cora em roxo, enquanto que o citoplasma tipicamente é menos corado e contem poucos
3.Hemoparasitas
Répteis são vertebrados ectotérmicos que são hospedeiros para uma variedade de
condições incertas. Poucas infecções sanguíneas em peixes, anfíbios e répteis provaram ser
27
Quando existe a destruição ou a diminuição de habitats, a biodiversidade é perdida
podem enfrentar pressão direta e crescente de parasitas e doenças. Quando uma população
RODRIGUES, 2001).
que resultam da atividade humana. A maioria das espécies enfrenta problemas que
aceleram a sua trajetória em direção à extinção, que são causadas pelo uso crescente dos
RODRIGUES, 2001).
qualidade ambiental, uma vez que a saúde do meio ambiente influencia na biologia e
28
ecologia dos organismos que vivem nele (ALMOSNY e MONTEIRO, 2007).
como mosquitos, moscas, carrapatos e ácaros hematófagos. Estes vetores são considerados
29
em esfregaços sanguíneos de répteis (HAWKEY & DENNET, 1989), apesar de lacunas
afecções virais, nesses casos, associadas a sinais clínicos como prostação e anorexia, ou
eritrocitárias podem não ser consistentes, são consideradas pouco patogênicas, podendo
30
invertebrados hematófagos (carrapatos, sanguessugas) infectados; ou por meio de ingestão
(AMO et al., 2005). A transmissão congênita é outra forma que ocorre em serpentes fêmeas
porém, os efeitos destes parasitos em hospedeiros de vida livre são pobremente conhecidos
sanguíneas causando anemia (AMO et al., 2005). Além disso, a presença de gametócitos
adicionais (AMO et al., 2005). As infecções severas podem estar associadas a quadros de
31
Fonte: Almosny,N.R.P.; material didático
3.1.1 Hepatozoon.sp
crer que o Hepatozoon caimani pode causar importante enfermidade no réptil Caiman
capilares, com conseqüente trombose e necrose tissular. No entanto, mais estudos são
espécies, em adição ao estresse e/ou a outros patógenos, podem contribuir para o aumento
32
Espécies de Hepatozoon que infectam lagartos geralmente desenvolvem a
serpentes. Isso ocorre por ser uma característica de espécies de Hepatozoon (SMITH,
1994).
1977).
33
atualmente com cerca de 2.900 espécies no mundo. As famílias de maior interesse em
coleta de sangue. O ponto para coleta encontra-se imediatamente caudal aos hemipênis,
células nucleadas que variam de tamanho e forma, possuem núcleo central, com cromatina
34
mais homogênea do que a dos eritrócitos, e citoplasma azul pálido e agranular. Os
linfócitos são os leucócitos mais encontrados no sangue das serpentes e são células
mononucleares, menores que os eritrócitos. Seu núcleo tem menor padrão de cromatina
FERNANDES, 2006).
35
TABELA 1: VALORES HEMATOLÓGICOS DE REFERÊNCIA PARA SERPENTES
36
Os lagartos, ou sáurios constituem o grupo com as mais variadas condições
dos mais especializados aos mais versáteis répteis. Esta subordem é constituída por um
total de 19 famílias, totalizando 4.675 espécies das quais somente duas espécies, os
O local mais utilizado para a coleta de em lagartos seja a veia coccígena ventral.
Amostras de sangue também podem ser coletadas da veia abdominal ventral, do seio
37
Leucócitos Totais (/ µL) 10.810 17.700
Heterófilos(/ µL) 4.350 6.400
Neutrófilo (/ µL) 1.010 -
Linfócitos(/ µL) 5.090 9.100
Monócitos(/ µL) 580 1.400
Basófilos(/ µL) 360 600
Eosinólfilos (/ µL) 540 300
Fonte: Goulart,C.E.S; Tratado de Animais Selvagens. São Paulo: Roca, 2007. Cap 7, pg 64
jabutis e cágados, pode ser encontrada em diversos habitats e vem sofrendo impacto
com a pressão humana e a degradação ambiental. Calcula-se que, das 290 espécies de
A coleta de sangue, em espécies de quelônios, pode ser realizada nas veias jugular,
braquial, coccígena ventral, coccígena dorsal, por cardiocentese, e nos seios orbital,
38
Fonte: Pachaly; material didático
4.3 Crocodylia
39
espécies (BASSETTI, 2007).
e ocupa a posição central da célula. Eritrócitos de maior tamanho com núcleos esféricos
40
vesiculosos e formas arredondadas também são ocasionalmente encontrados. Além da
forma elíptica típica predominante, foram observados eritrócitos menores com aspecto "em
vezes, forma menos alongada. O citoplasma hialino pode variar em volume, sendo
variados, tanto no que se refere à intensidade de cor, quanto a sua forma, podendo ser
41
O núcleo, de cor violeta, é geralmente esférico ou lenticular e está situado em posição
tamanho variável e, quando dispostos sobre o núcleo, podem até impossibilitar a distinção
esférico, em geral com contorno irregular, ocupa posição excêntrica (MOURA et al, 1999)
42
TABELA 4: VALORES HEMATOLÓGICOS PARA CROCODILIANOS
5. Interpretação do Hemograma
43
condição ambiental, podem aumentar ou inibir a resposta do animal à doença (HAWKEY
função de diversos fatores, tais como: o tamanho da célula, a idade do animal, o sexo, a
época do ano, além de fatores patológicos, nutricionais e ambientais. Este fato cria para o
(GOULART,2004).
O VG normal para a maioria dos répteis varia entre 20% e 40%. Valores menores
policitemia (HAWKEY & DENNET, 1989). Além disto, o endoparasitismo pode causar
(RASKIN, 1999).
A anemia pode ser classificada como hemorrágica (perda sanguínea), hemolítica (aumento
44
(HAWKEY & DENNET, 1989). A anemia hemorrágica geralmente é resultante de injúrias
coagulopatias e lesões ulcerativas, podem ser consideradas. A anemia hemolítica pode ser
associadas a agentes infecciosos. Outras causas podem ser relacionadas como doença renal
que nas demais classes de animais superiores. Primeiro, precisamos considerar a época do
ano. É normal encontrarmos valores de contagem total da série vermelha, mais baixos no
meio do inverno. Neste período, espera-se também uma contagem relativa de eritroblastos,
proporções relativas que podem alcançar até 5%. No verão, o número de eritrócitos
45
outras desordens eritrocitárias. Campbell diz que pontilhados basofílicos podem ocorrer
crônica (ROSSKOPF,1999).
Parasitas sanguíneos são achados comuns nos esfregaços sanguíneos dos répteis, e a
severa pode ser desenvolvida e pode exacerbar uma condição patológica de diferente
6. Interpretação do Leucograma
pode ocorrer após uma situação de estresse, após uma situação de estresse e traumatismos.
outro lado, uma leucopenia pode estar associada a doenças virais, infecção bacteriana
Heterofilia e Heteropenia
46
Hibernação e estresse são fatores que diminuem e aumentam, respectivamente o número de
valores sempre aumentam em neoplasias e leucemias mielóides. Como nas aves e outras
Eosinofilia e Eosinopenia
Basofilia
1999). Variações sazonais em seus valores são mínimas (HAWKEY & DENNET, 1989).
Linfocitose e Linfopenia
47
e diminui com o inverno. O sexo também influencia no valor circulante de linfócitos.
1999).
1989).
Monocitose
48
intravascular disseminada. A hematologia reporta que em répteis é freqüentemente descrito
uma discreta quantidade de trombócitos reativos, o que ser um alerta para o clínico de um
CONCLUSÃO
clínicas dos animais, inclusive dos répteis. Variações nos valores de eritrócitos podem
indicar anemia ou policitemia, que são classificadas de acordo com as alterações clínicas
hemoparasitas, que são achados comuns nestes animais. Da mesma maneira, o aumento do
número de leucócitos totais pode nos indicar processos infecciosos, entre outros, e a
realizados por pesquisadores respeitados. Porém, é fato que ainda existe muito pouca
hematológico de répteis pode sofrer uma grande variação fisiológica, decorrente de vários
com muita cautela e que sempre que possível realize pesquisas hematológicas periódicas
49
em animais clinicamente sadios a fim de se elaborar um perfil hematológico para aquela
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