Cromatografía y electroforesis

Autoras: Mónica Hedrera y Luciana Colusi

Responsable disciplinar: Silvia Blaustein

Área disciplinar: Química

Temática: Cromatografía y electroforesis

Nivel: Secundario, ciclo orientado

Secuencia didáctica elaborada por Educ.ar

Propósitos generales

Promover el uso de los equipos portátiles en el proceso de enseñanza y aprendizaje.

Promover el trabajo en red y colaborativo, la discusión y el intercambio entre pares, la realización en conjunto
de la propuesta, la autonomía de los alumnos y el rol del docente como orientador y facilitador del trabajo.

Estimular la búsqueda y selección crítica de información proveniente de diferentes soportes, la evaluaci

Introducción a las actividades

La cromatografía es una técnica útil para determinar la pureza de una sustancia, y también para separarla de las
impurezas (cromatografía preparativa). Se basa en la distinta velocidad que exhibe una sustancia al desplazarse por
un soporte, arrastrada por un solvente en movimiento.
Según el proceso que se realice entre la muestra, el solvente de elución y el soporte, existen distintos tipos de
cromatografía. Este proceso puede ser de adsorción (por ejemplo cromatografía en sílicagel o alúmina), de partición
(cromatografía en celulosa o en papel), de intercambio iónico (cromatografía usando resinas) o de movimiento de
cargas en una corriente eléctrica (electroforesis).
La razón entre la distancia que recorre la muestra y la que recorre el solvente se llama “relación de frente” (Rf
) y depende de la estructura química de cada sustancia en el tipo de cromatografía utilizada.

Objetivo de las actividades

Que los alumnos vean cómo las técnicas cromatográficas permiten analizar sustancias que parecen puras, y que son
en realidad mezcla de componentes.

Actividad 1
1. Realicen el siguiente procedimiento:
1. Coloquen alcohol etílico en un vaso de vidrio hasta 2 cm de altura y tápenlo con un plato.
2. Sobre una tiza blanca, hagan una marca con tinta azul a 2 cm del borde inferior.
3. Coloquen la tiza dentro del vaso con alcohol, evitando que la marca se sumerja.
4. Tapen el vaso y dejen subir el solvente, y observen lo que ocurre. Retiren la tiza antes de que el
solvente llegue a su borde superior.
5. Hagan una marca en donde llegó el solvente y dejen secar.
6. Midan los Rf de cada componente.

Actividad 2
1. Realicen el siguiente procedimiento:
 1. Coloquen alcohol etílico en un vaso de vidrio hasta 2 cm de altura y tápenlo con un plato.
2. Sobre una tiza blanca, hagan una marca con tinta de otro color, por ejemplo, de marcador, a 2 cm
del borde inferior.
3. Repitan los pasos 3 y 4 de laactividad 1. Filmen el proceso con sus equipos portátiles.
4. Repitan los pasos 5 y 6 de laactividad 1.
a) Presenten la filmación obtenida al resto de los compañeros por la red. Comparen los resultados obtenidos con
las distintas tintas.

Actividad 3
1. Realicen el siguiente procedimiento:
1. Recolecten hojas, flores o raíces coloreadas de una planta a elección.
2. Machaquen bien en un recipiente con alcohol etílico.
3. Separen el líquido y desechen el residuo sólido. Si es necesario, fíltrenlo.
4. Dejen evaporar el alcohol hasta la mitad del volumen inicial.
5. Coloquen alcohol etílico en un vaso de vidrio hasta 2 cm de altura y tápenlo con un plato
6. Corten un rectángulo de papel de filtro (puede usarse filtro para café) de un largo igual a la altura del
vaso y de 4 cm de ancho. Siembren el extracto alcohólico preparado en forma de punto con una
jeringa, a 2 cm del borde inferior del papel.
7. Coloquen el papel con la siembra dentro del vaso, de modo de sumergir el extremo inferior, pero
tratando de que el solvente no toque la siembra.
8. Tapen el vaso y dejen eluir hasta antes del borde superior del papel.
9. Retiren y marquen inmediatamente el frente del solvente.
10.Dejen secar y calculen los Rf para cada mancha observada.
a) Fotografíen el papel y compartan el procedimiento con el resto de los compañeros, indicando qué extracto se
ha sembrado (por ejemplo, flores de caléndula, hojas de espinaca, etcétera).
2. En un procesador de texto de sus equipos portátiles, realicen un informe de lo realizado y observado en las
actividades 1,2y3.

Actividad 4
1. Investiguen en qué se basa la técnica de electroforesis y qué tipos de electroforesis existen.
a) Indiquen a qué compuestos se aplica cada tipo de electroforesis.
b) Con una herramienta de dibujo de sus equipos portátiles, esquematicen un equipo para realizar electroforesis.
Señalen cada una de sus partes.
c) Si pueden, consigan una foto de una corrida electroforética y mencionen a qué compuestos se aplicó.

Enlaces de interés y utilidad para el trabajo

es.wikipedia.org/wiki/Cromatografía

es.wikipedia.org/wiki/Electroforesis

www.fcen.uba.ar/decaysec/seextuni/posters/poster1.ppt