UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA

INTEGRANTES: Aulestia Carla

Ocaña Eder

Pita Gabriela

Sandoval Gustavo

Trujillo David

GRUPO: B4

DIA: LUNES 10h00-12h00

FECHA:

TEMA: DETERMINACIÓN DE BIOMASA POR EL MÉTODO DE PESO SECO

OBJETIVOS

• Determinar la masa microbiana de la bacteria Pseudomona Aeruginosa T5

mediante el método de peso seco.
• Realizar la curva de crecimiento de la bacteria utilizando el método de peso
seco.

FUNDAMENTO

Peso seco: El peso seco (contenido de sólidos) de las células bacterianas que se
encuentran en una suspensión se obtiene por el secado de un volumen en una
estufa a 105°C hasta peso constante. Esta técnica es útil para grandes volúmenes
de muestra, debido a que diferencias del orden de los miligramos representan el
peso de un gran número de bacterias.

La desventaja de este método es que componentes volátiles de la célula pueden

perderse por el secado y puede existir alguna degradación. También la muestra
seca puede recobrar humedad durante el pesado, principalmente si el ambiente
tiene una humedad relativa alta.

MARCO METODOLÓGICO
 REVIVIFICACIÓN E
INCUBACIÓN 1 PERLA
INCUBAR 35oC, en
sheiker orbital (200rpm)
24h.
90ml CALDO
108 TSB

1 mL

107 106 105 104

1 mL 1 mL 1 mL

9 mL 9 mL 9 mL 9 mL

1 mL

240 mL TSB

INCUBAR 1era. BLANCO

INCUBAR 35oC, en MEDICIÓN Caldo BHI
sheiker orbital Tomar 5mL y (240mL)
(200rpm), realizar filtrar
mediciones cada
NOTA: Antes de realizar la técnica se debe previamente tarar cajas petri
dependiendo el número de mediciones que se vayan a realizar, en
nuestro caso 8 cajas petri incluido el blanco.

240mL medio
V2= 250mL 3%
240mL ----------- 100%
X ------------------- 3%
= 7,2mL

RESULTADOS

No. Peso caja Peso caja Peso caja x x Ln X

Tiempo
Deter. vacía + filtro seca g/5ml g/l
Blanco 0 84,5312 84,5951 84,5955 0,0004 0.08 2,6878
1 0 91,0762 91,1440 91,2175 0,0735 14.70 2,7027
2 30 77,6993 77,7699 77,8445 0,0746 14.92 2,7985
3 60 87,3358 87,3998 87,4819 0,0821 16.42 2,8261
4 90 80,1361 80,2004 80,2848 0,0844 16.88 2,8320
5 120 87,8058 87,8652 87,9501 0,0849 16.98 2,8507
6 150 73,7770 73,8376 73,9241 0,0865 17.30 2,8599
7 180 85,0125 85,0819 85,1692 0,0873 17.46 2,6878

Gráfica #1: Biomasa en función del tiempo

Gráfica #2: Logaritmo de biomasa en función del tiempo

ANALISIS DE RESULTADOS

OBSERVACIONES

• Se debe manipular las cajas con mucho cuidado, para que no adquieran
grasa o humedad de nuestras manos, preferiblemente manipular con
pinzas.
• Se debe transportar las cajas dentro de un desecador con sílica gel para
que no adquieran humedad.
• Se debe pesar el filtro blanco, ya que, existen dos papeles en el sobre,
además de manipularlo con pinzas.
• Se necesita enfriar las cajas antes de pesarlas.
• Al momento de filtrar se debe prender el mechero para evitar
contaminación.

DISCUSIÓN

• Puede existir error, ya que, al momento de pesar se transporto las cajas

una distancia considerable para pesarlas, con lo cual pudieron adquirir
humedad del ambiente.
• Los pesos varían considerablemente, ya que, al momento de pesar los
filtros con las cajas existió una equivocación fortuita, lo cual puede ser la
causa de la gran variación en nuestros resultados.
• Al momento de realizar la práctica participaron dos grupos, lo cual quita
exactitud en nuestros resultados.
• Las cajas petri eran muy irregulares en sus pesos, es decir, que pueden
incidir en nuestros resultados.

CONCLUSIONES

• El método del peso seco es más preciso para la determinación de

poblaciones microbianas.
• El coeficiente de correlacion es
• La ecuación de la curva es
• La curva de nota un crecimiento exponencial de nuestra bacteria.
• Según el coeficiente de relación la practica esta bien hecha o no esta bien
hecha.

BIBLIOGRAFÍA Y FUENTES DE CONSULTA