Las hiptesis actuales para la subyacente Biologa de la Esclerosis Lateral Amiotrfica

Los mecanismos implicados en la degeneracin selectiva de las neuronas motoras en la esclerosis lateral amiotrfica se desconoce ms de 135 aos despus de la enfermedad fue descrita por primera vez. Aunque la mayora de los casos no tienen causa conocida, las mutaciones en el gen que codifica la Cu / Zn superxido dismutasa (SOD1) han sido implicados en una fraccin de los casos familiares de la enfermedad. Modelos de ratones transgnicos con mutaciones en el gen SOD1 y los genes de la ELA se desarrollan otros recuerdan la patologa de la enfermedad, incluyendo la muerte progresiva de las neuronas motoras, y han arrojado luz sobre la patognesis de la enfermedad, pero han fallado en predecir la eficacia teraputica en seres humanos. Sin embargo, investigaciones recientes han demostrado que las mutaciones y la patologa asociada con el gen TDP-43 y la protena pueden ser ms comunes que las mutaciones SOD1 en la ELA familiar y espordica. Posibles mecanismos de toxicidad de las neuronas motoras dirigidas a incluir el dao oxidativo, la acumulacin de agregados intracelulares, la disfuncin mitocondrial, defectos en el transporte axonal, la deficiencia de factor de crecimiento, el metabolismo del RNA aberrantes, las clulas gliales la patologa y la excitotoxicidad del glutamato. La convergencia de estas vas es probable que mediar inicio de la enfermedad y la progresin.

La esclerosis lateral amiotrfica (ELA), ms conocida en los Estados Unidos como la enfermedad de Lou Gehrig, en honor del famoso jugador de bisbol afectados por la enfermedad en la dcada de 1930, es el motor ms comn de enfermedad de las neuronas adultas. Con una edad promedio de inicio entre los 50 y 60 aos y una prevalencia de 2 por cada 100.000 personas, ELA se asocia con un riesgo de aproximadamente 1 de cada 2.000 personas. Descrita por primera vez por el neurlogo francs JeanMartin Charcot en 1869, ALS se caracteriza por la muerte selectiva de las altas y las neuronas motoras inferiores, provocando la atrofia muscular progresiva, debilidad y espasticidad. Denervacin de los msculos respiratorios es generalmente el caso fatal y, en la mayora de los casos, se produce dentro de los 5 aos de la enfermedad. Aunque no hay componente gentico es evidente en el 90 y el 95% de los casos de esclerosis lateral amiotrfica, conocida como espordicos, el resto de 5 a 10% de los pacientes que heredan la enfermedad, generalmente en forma autosmica dominante. Aproximadamente el 20% de los casos familiares son causados por mutaciones en el gen Cu / Zn superxido dismutasa (SOD1), y el

desarrollo de modelos de ratones transgnicos SOD1 mutaciones de los derechos humanos abri un rea de intensa investigacin en la patogenia de la ELA familiar. Debido a las formas espordicas y familiares de la ELA son clnicamente similares, el avance en el esclarecimiento de los mecanismos subyacentes de la ELA familiar puede dar una idea de las dos formas de la enfermedad. Por otra parte, un estudio reciente identific un aberrante SOD1 que contienen protenas en el tejido de la mdula espinal de pacientes con ELA espordica y de pacientes con ELA familiar, lo que sugiere un posible papel de SOD1 en ambas formas de la enfermedad. Sin embargo, el papel de la bioqumica alterada SOD1 en la ELA espordica es, altamente especulativa y no apoyada por fuertes datos humanos o animales. Ms recientemente, las mutaciones de la protena ARN metabolismo, TDP-43, han sido descubiertos por varios grupos en todo el mundo en varios rara autosmica dominante de los casos familiares de ELA, y una alteracin patolgica de esta protena se ve en la mayora de los casos de ELA espordica, lo que podra hacer TDP- una enorme importancia en la comprensin de la ELA espordica y familiar 43.Esta revisin discute las hiptesis ms recientes de la patognesis de la ELA, las lecciones aprendidas de in vitro y modelos de ratn SOD1, y nuevas hiptesis sobre la base de TDP-43 mutaciones. SOD1 mutante es txico para las neuronas motoras por mecanismos distintos de la prdida de actividad SOD1. En 1993, el descubrimiento de mutaciones en el gen SOD1 en los casos familiares deALS9 dirigi los esfuerzos de investigacin clnica a la identificacin de los mecanismos por los cuales mutante SOD1 confiere toxicidad selectiva de las neuronas motoras. En la actualidad, ms de 114 mutaciones diferentes distribuidos en todo el cido amino-153 SOD1 polipptido se han relacionado con ALS3; la lista de mutaciones se actualiza constantemente en la base de datos en lnea para la ELA gentica. Una enzima de expresin ubicua citoplsmicos que funcione normalmente para convertir los aniones superxido a perxido de hidrgeno, SOD1 no era un candidato intuitiva para mediar degeneracin de neuronas motoras. Una hiptesis inicial sugiere que la SOD1 mutante SOD1 reduce la actividad, promover la acumulacin de radicales superxido txico. Sin embargo, los ratones transgnicos que expresan la ELA familiar ligada al mutante SOD1G93A (es decir, la glicina sustituida por alanina en la posicin 93), SOD1G37R o SOD1G85Rdemostrado la prdida progresiva de las neuronas motoras, a pesar igual o mayorSOD1 actividad enzimtica. Por otra parte, la ablacin o la sobreexpresin de tipo salvaje SOD1 mutante en ratones no afect la progresin de la enfermedad. Por lo tanto, mutante SOD1 confiere propiedades txicas sin alterar la actividad enzimtica. Las hiptesis actuales de la biologa subyacente de la

ELA incluyen el dao oxidativo, la acumulacin de agregados intracelulares, la disfuncin mitocondrial, defectos en el transporte axonal, la deficiencia de factor de crecimiento, astroglial Patologa Celular, y la excitotoxicidad del glutamato. El dao oxidativo. La hiptesis de que media el dao oxidativo SOD1 mutante toxicidad se basa en la propuesta de que la mutacin inducida por cambios estructurales en la SOD1 polipptido expone el sitio activo de cobre a los sustratos aberrante. La hiptesis de la peroxidasa sugerido que las mutaciones SOD1 catalizada cobre mediada por la conversin de perxido de hidrgeno a los radicales hidroxilo reactivos, la promocin de una cascada de dao oxidativo. Los niveles elevados de productos oxidados en paralelo con la progresin de la enfermedad se obtuvieron en ratones SOD1G93A pero no en ratones SOD1G37R. As, el papel del perxido de hidrgeno como sustrato aberrante an no est claro. Peroxinitrito es otro sustrato candidato, con la nitracin de residuos de tirosina en protenas de la meta de ser el resultado final destructivo. Aumento de los niveles de 3-nitrotirosina, un marcador de peroxinitrito mediada por el dao oxidativo, se han reportado en SOD1 ratones y en pacientes con ELA, pero los objetivos de la protena siendo difcil de alcanzar. Una similitud entre la peroxidasa y la hiptesis peroxinitrito es la mediacin del dao oxidativo por el cobre. La entrega de cobre para SOD1 en las neuronas motoras enzimas requiere la chaperona de cobre para SOD1 (CCS). La ablacin del gen de la CAC no tuvo efecto sobre la enfermedad de inicio o la progresin en los ratones SOD1, lo que sugiere que CCSdependiente de la carga de cobre no mediar SOD1 mutante toxicidad. A pesar de la posibilidad de una va de cobre CCS-independiente de carga no se puede descartar, porque la actividad SOD1 residual se puede medir (10-20%) en los tejidos de la CAC-null ratones, cobre mediada por el dao oxidativo puede jugar un papel limitado en la patognesis de la ELA. Los agregados intracelulares. Una caracterstica comn de los trastornos neurodegenerativos, agregados intracelulares representan otro mecanismo de candidato por el que la SOD1 mutante podra conferir toxicidad en las neuronas motoras. Insoluble SOD1 que contienen agregados caractersticos de la ELA familiar se han identificado en las neuronas motoras en ratones SOD1. Por otra parte, los agregados apareci antes o coincidiendo con el inicio de los sntomas de la enfermedad y la acumulada, con progresin de la enfermedad, lo que sugiere que la SOD1 agregacin puede ser un evento temprano en la patognesis de la enfermedad. Agregados intracelulares pueden mediar

en la degeneracin de la neurona motora a travs de varios posibles mecanismos, incluido el secuestro de los componentes esenciales de celulares, reduccin de la actividad chaperona, y alteracin de la capacidad de la va del proteasoma ubiquitina. Ubiquitina que contiene los agregados son caractersticos de la ELA, tanto familiar como espordica, lo que sugiere un nexo patognico comn. La disfuncin mitocondrial La disfuncin mitocondrial es comn en muchas enfermedades neurodegenerativas. Alteraciones mitocondriales, como la hinchazn y vacuolizacin son evidentes en las primeras etapas, pre sintomtico en ratones SOD1G37R pero no se observ en los ratones SOD1G85R. Sin embargo, varios mecanismos de SOD1 mutante mediado por dao en las mitocondrias se han propuesto, incluyendo la interrupcin del metabolismo energtico, la obstruccin de la maquinaria proteica de las importaciones, y amortiguacin deficiente de calcio. La administracin oral de creatina en los ratones SOD1G93A retras la aparicin de los dficits motores y el aumento de la supervivencia de las neuronas motoras, que apoyan un papel para la disfuncin mitocondrial de energa en la progresin de la enfermedad. Adems, el transporte inadecuado de las mitocondrias a travs de largos axones de la neurona motora (descrito ms adelante) podra contribuir a la degeneracin del axn distal de manera que no se entiende. Caspasa-mediada por la muerte celular La apoptosis es el mecanismo por el cual las neuronas motoras mueren en los ratones SOD1. Las seales de apoptosis caspasa-1 y -3 se activan secuencialmente en SOD1 ratones, con la activacin crnica de la caspasa1 ocurre como un evento temprano antes de la aparicin de los sntomas, y la activacin de la caspasa-3 se producen mucho ms tarde que el efector final de la muerte celular. De acuerdo con estos informes, la entrega intracerebroventricular de un inhibidor de la caspasa amplia en los mutantes SOD1G93A disminucin de los niveles de ARNm de la caspasa-1 y -3 en el tejido de la mdula espinal. Por otra parte, las neuronas motoras se salvaron en los ratones infundidos con el inhibidor de la caspasa en comparacin con el vehculo con infusin de ratones, y la aparicin de la enfermedad y la progresin se retras. Evidencia adicional en apoyo de un mecanismo de muerte celular apopttica incluye informes de que la sobreexpresin de la protena antiapopttica Bcl-225 o la supresin de la protena proapoptticos Bax26 la funcin motora preservado y extendido la vida en ratones SOD1G93A. Por lo tanto, la toxicidad SOD1 mutante parece

estar mediado, al menos en parte, por las caspasas y otros factores de apoptosis. Defectos en el transporte axonal Neurofilamentos son las protenas ms abundantes del citoesqueleto de las neuronas motoras y jugar un papel clave en estimular el crecimiento axonal y en la determinacin de dimetro axonal. Una acumulacin anormal de neurofilamentos en el cuerpo celular y axones de las neuronas motoras proximal es un sello distintivo de la ELA. Ratones transgnicos con mutaciones puntuales o la sobreexpresin de las subunidades de neurofilamentos pantalla acumulacin de neurofilamentos y selectiva la disfuncin de la neurona motora. Sorprendentemente, la sobreexpresin de las subunidades de neurofilamentos en los ratones SOD1G37R no exacerbar la progresin de la enfermedad, pero la degeneracin de neuronas motoras en vez mejorado y ampliado la vida til. Es importante destacar que la acumulacin de neurofilamentos se increment en los cuerpos celulares de las neuronas motoras y disminucin en los axones. Perikaryal acumulacin de neurofilamentos podra contrarrestar mutante SOD1 toxicidad por tampn contra los dainos eventos intracelulares, tales como los niveles de calcio excesivos o la hiperfosforilacin de los sustratos neuronales de quinasas dependientes de ciclina 5 (CDK5). Por otra parte, la disminucin de la carga de neurofilamentos axonales puede proteger las neuronas motoras, al menos en parte, por la mejora del transporte axonal, una hiptesis apoyada por la observacin de defectos en el transporte axonal lento en pre sintomtico mutante SOD1 ratones. Tambin en consonancia con la opinin de que el transporte axonal con discapacidad pueden estar implicados en la degeneracin de las neuronas motoras, Puls y sus colegas identificaron una mutacin en el gen que codifica dinactina, una protena implicada en el transporte retrgrado, en una familia con una forma autosmica dominante de baja del motor enfermedad de la neurona se caracteriza por parlisis de las cuerdas vocales. Los mecanismos por los cuales el transporte axonal contribuye a la muerte de las neuronas motoras no son claras, pero podran incluir la ineficiencia o la eliminacin de las mitocondrias distal y el transporte retrgrado de factores trficos perifricamente derivados. Factores de Crecimiento Un posible papel del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) en la patogenia de la esclerosis lateral amiotrfica surgi a partir del descubrimiento de los dficits motores y ELA-como patologa en un modelo de ratn transgnico que lleva una eliminacin selectiva de los elementos de respuesta a la hipoxia en el gen VEGF. Estos ratones mostraron una reduccin en la base

y la expresin de VEGF hipoxia en el tejido nervioso, y desarroll dficit progresivo del motor y la degeneracin de las neuronas motoras a partir de las 5 a 7 meses de edad. Hiptesis para el mecanismo de accin del VEGF incluyen un efecto directo neuroprotector y una capacidad indirecta para evitar el dao isqumico mediante la regulacin de la perfusin vascular. Un papel neuroprotector de VEGF con el apoyo por estudios que demuestran retraso motor aparicin de la enfermedad las neuronas y la progresin en el mutante con sobreexpresin SOD1G93A modelos genticos de VEGF, la administracin intracerebroventricular de VEGF, o la entrega intramuscular de VEGF que expresan los vectores lentivirales. Adems de VEGF, similar a la insulina factor de crecimiento-1 y la lnea celular glial - factor neurotrfico derivado se han reportado para retrasar la aparicin de la enfermedad y la progresin en los ratones SOD1G93A. Aunque los estudios preclnicos de dilucidar las posibles vas patognicas y las opciones teraputicas, los ensayos en humanos constituyen la mejor prueba de una hiptesis. Insulina-como factor-1 de crecimiento siempre modesta eficacia clnica en uno de los dos ensayos en pacientes con ELA. Los ensayos clnicos de VEGF se prev que debido a que tres polimorfismos de un solo nucletido en el gen VEGF fueron identificados como factores de riesgo significativos para la ELA en una cohorte de pacientes de Europa grande. Gliales Patologa Celular Un creciente nmero de estudios apoyan la hiptesis de que la degeneracin selectiva de las neuronas motoras en la ELA no es un proceso de clulas autnomas, en concreto, los astrocitos vecinos contribuyen a la progresin de la enfermedad (figura). En la dcada de 1990, los defectos en los transportadores de glutamato astrogla especficos fueron identificados en un gran porcentaje de pacientes con ELA espordica, y ms tarde en todos los modelos de roedores SOD1. Inclusiones de los astrocitos son los primeros indicadores de la SOD1 mutante toxicidad, antes de la aparicin de sntomas y aumenta con la progresin de la enfermedad. Datos no publicados de mostrar el grupo de Don Cleveland, que la eliminacin de la protena SOD1 mutante en astrocitos marcado retraso en la progresin de enfermedades, lo que indica que las clulas no neuronales son los principales contribuyentes a la progresin de la enfermedad. Daos en el tipo de clulas ms de una parece ser necesario, porque la expresin restringida de SOD1 mutante en astrocytes45 o motor neurons46 solo no inducir dficit motor en ratones SOD1. La participacin de mltiples tipos de clulas en la patognesis de la ELA es apoyada por los estudios in vitro y el anlisis de ratones quimricos de mezclas de tipo salvaje y las clulas que expresan SOD1mutante. Estos estudios han encontrado alteraciones patolgicas y la muerte celular en las neuronas motoras de tipo salvaje junto a SOD1 mutante-que expresan las clulas no neuronales. Por lo tanto, la vulnerabilidad de las neuronas motoras SOD1

mediada por toxicidad parece ser influenciada por el ambiente celular en general y por el dao, en particular los astrocitos. El papel de los astrocitos y otras clulas gliales en la degeneracin selectiva de las neuronas motoras no est claro. Los astrocitos que expresan mutante SOD1 secretan factores que son txicos para las neuronas motoras, pero los factores especficos que no han sido identificados. Los candidatos potenciales incluyen citoquinas pros inflamatorias y quimiocinas, pero la supresin gentica de la interleucina-1B o factor de necrosis tumoral "no afect a progresin de la enfermedad en ratones SOD1. As, el papel de mediadores pro inflamatorios en la patogenia de la ELA sigue siendo infundadas, y los astrocitos pueden conferir toxicidad a las neuronas motoras a travs de mecanismos alternativos.

Fig. SOD1 mutante toxicidad en los astrocitos promueve patognesis ELA. A pesar de SOD1 mutante inflige clulas autnomas insultos en las neuronas motoras, los insultos pueden ser insuficientes para mediar en la progresin de la enfermedad. La evidencia de que los astrocitos promover degeneracin de neuronas motoras proviene de los informes que los astrocitos expresan la SOD1 mutante, pero no de tipo salvaje SOD1 disminucin de la supervivencia de las neuronas motoras mediante la secrecin de varios factores potencialmente txicos (s) en el entorno celular. Adems, el mutante SOD1 selectivamente inactiva Excitotoxicidad del glutamato la gliales transportador de glutamato EAAT2, que es responsable de eliminar el Un mecanismo bien conocido de la muerte neuronal es la excitotoxicidad del glutamato como resultado de disparo de las clulas repetitivas o la afluencia de los niveles excesivos de calcio a travs de receptores de glutamato

permisiva. Mediada por glutamato neurotoxicidad fue propuesta por primera vez como un mecanismo de degeneracin de neuronas motoras en aumento en los niveles de glutamato fueron descubiertas en el lquido cefalorraqudeo de pacientes con ELA. Un estudio de seguimiento inform que el aumento de lquido cefalorraqudeo los niveles de glutamato fueron evidentes en aproximadamente el 40% de los cerca de 400 pacientes con ELA espordica y se correlacion con la gravedad de la enfermedad, lo que fue uno de los mayores estudios de la patognesis orientado humanos en la ELA. El aclaramiento de glutamato de la hendidura sinptica por los transportadores de glutamato es crucial en la prevencin de fuego repetitivo y excitotoxicidad posteriores. En las neuronas motoras, la rpida eliminacin del glutamato sinptico se lleva a cabo principalmente por el transportador de glutamato EAAT2 astrocticos. El agotamiento de EAAT2 en ratones transgnicos provoca directamente la muerte neuronal. En los ratones mutantes SOD1G85R en la etapa final de la enfermedad, EAAT2 niveles de protena en la mdula espinal se reduce a aproximadamente el 50% de lo normal. En SOD1G93A ratas transgnicas, EAAT2 expresin en el asta ventral se reduce los sntomas pre y casi completamente abolida por la enfermedad en fase terminal. Trotti y sus colegas examinaron la funcin de EAAT2 en ovocitos co expresando SOD1 protenas y encontraron que mutante, pero no de tipo salvaje SOD1 inactivado el transportador en presencia de perxido de hidrgeno, lo que sugiere que EAAT2 es un objetivo de la SOD1 mutante toxicidad. Otro estudio inform que la sobreexpresin de EAAT2 en ratones mutantes SOD1G93A retras la aparicin de los dficits motores, disminucin de la activacin de la caspasa-3 y la formacin de agregados, y en parte el aumento de neuroproteccin en comparacin con el SOD1 mutantes en los que EAAT2 expresin no fue manipulado. Adems, los ratones mutantes SOD1G93A tratados con un antibitico de B-lactmicos que estimula potentemente EAAT2 expresin, demostr retraso en la aparicin de enfermedades, redujo la progresin de la enfermedad, y su vida til prolongada. TDP-43: la agregacin celular y el metabolismo del RNA Recientemente, se han producido avances muy interesantes en la vinculacin de la ELA espordica y familiar. Un anlisis de la coincidencia entre la demencia fronto-temporal y la esclerosis lateral amiotrfica mostr una patologa comn y de la protena, TDP-43. Inclusiones citoplasmticas y la alteracin de armas nucleares a inmunolocalizacin citoplasmtica de esta protena poco conocidos fueron descubiertos. Cuatro informes separados identificados mutaciones en el gen de la TDP-43 en los casos de ELA familiar poco comn, y los polimorfismos putativo de la protena tambin se han identificado en la ELA espordica. La asociacin de esta protena mutante tanto con la rara forma familiar de ELA y ELA espordica y ofrece un gran paralelismo con la patologa amiloide observados en los cerebros de los pacientes con

enfermedad de Alzheimer. As, el TDP-43 mutado y las alteraciones resultantes en la localizacin y funcin de protenas pueden convertirse en el ALS asociada ms importante de la fisiopatologa hasta la fecha. A pesar de la biologa de la TDP-43 no es probable que antes de devaluar el de 15 aos de biologa mutante SOD1, que tiene el potencial para reemplazar y dar lugar a un nuevo conjunto de observaciones cientficas y modelos animales, en ltima instancia, la definicin de una mejor teraputica. El descubrimiento de estas nuevas mutaciones requiere una mejor comprensin de TDP-43, porque se sabe poco sobre su biologa normal. El anlisis de las mutaciones ELA asociada a TDP-43 en la estructura de localizar el supuesto alteraciones en las protenas con el dominio de ribonucleoprotena nuclear heterogneo unin de la regin Cterminal de la protena, lo que implica anormal metabolismo del RNA en la fisiopatologa de la mutacin TDP-43. Estos nuevos descubrimientos destacan los informes de hace casi 10 aos que mostr por primera vez aberrantes de empalme del exn y el intrn como la causa del anormal metabolismo del RNA en la ELA espordica. Durante la ltima dcada, importantes claves genticas y herramientas para la ELA familiar han sido dilucidadas. La prxima dcada es casi seguro que proporcionan pistas adicionales y molecular de protenas que conducen a modelos animales ms, herramientas de biomarcadores y ligandos de imgenes, todo lo cual representar un avance significativo el descubrimiento de nuevos agentes teraputicos. Conclusin Las hiptesis actuales de la biologa subyacente de la ELA representan mecanismos no competitivos que puedan converger en varios patrones desafortunado para mediar la degeneracin selectiva de las neuronas motoras. Mutante toxicidad SOD1se ha relacionado con el dao oxidativo, la acumulacin de agregados intracelulares, la disfuncin mitocondrial, defectos en el transporte axonal, la deficiencia de factor de crecimiento, las clulas gliales la patologa y la excitotoxicidad del glutamato. Un modelo de convergencia de SOD1 toxicidad sugiere que el dao oxidativo y la mutante SOD1 agregados pueden aumentar la vulnerabilidad de las neuronas motoras de la inhibicin de acompaante y la actividad del proteasoma, al menos en los modelos familiares de la enfermedad. Agregados intracelulares tambin puede alterar la funcin mitocondrial y alterar la organizacin de neurofilamentos, que, a su vez, pueden activar los factores de apoptosis e inhibe el transporte axonal, respectivamente. Adems de la acumulacin de insultos en las neuronas motoras, daos similares en los astrocitos pueden alterar la neurotransmisin del glutamato, lo que lleva a la muerte celular excitotxica. Posibles mecanismos patognicos mediados por SOD1 mutante puede ser relevante tanto en casos familiares y espordicos de ELA, por su similitud clnica, pero la falta de concordancia entre los modelos

animales basados en SOD1 y teraputica humana es preocupante. Nuevas investigaciones emergentes de la biologa de TDP-43 y sus mutaciones en la ELA puede llegar a ser uno de los ms importantes avances en la investigacin de la ELA en el futuro.