Da planta hospedeira-MEDIADA CONCURSO VIA resistncia induzida: INTERACES herbvoros PEST em batatas RESUMO:

Plantas mediada por competio entre os insetos herbvoros ocorre quando uma espcie induz mudanas na qumica vegetal, nutrio, morfologia ou que tornam as plantas resistentes a ataque por outros. Ns exploramos interaes planta-mediada interespecficos entre a batata cigarrinha (Empoasca fabae) e o besouro Colorado batata (Leptinotarsa decemlineata), dois pragas importantes em batata. Cigarrinhas colonizar campos antes de besouros, e assim o possibilidade de que a alimentao anterior pela cigarrinhas induz mudanas em plantas de batata que ter consequncias adversas para os besouros. As conseqncias da cigarrinha-resistncia induzida por besouro desempenho foram estudados em o efeito estufa, gaiolas de campo, e em grande campo aberto parcelas. Plantas de batata foram expostas a quatro densidades de cigarrinhas (nenhuma, baixa, moderada e alta), e os sintomas visveis de alimentao foram medido como percentual da folha curling, clorose e necrose. A preferncia para oviposio, desempenho, sobrevivncia e de besouros de batata de Colorado foram medidos nas quatro categorias de plantas induzida no campo de gaiolas e as configuraes de efeito estufa. Em parcelas campo aberto sobrevivncia, nas quatro categorias de plantas induzida foi determinada por coortes de colocao de adultos do besouro sobre as plantas e medir as densidades de ovos resultantes, larvas e adultos emergentes F1. Cigarrinha sintomas induzidos em plantas de batata foram dependentes da densidade, com a percentual de enrolado, folhas clorticas e necrticas aumentando com a densidade cigarrinha. Alimentao anterior por cigarrinhas oviposio prejudicados e desempenho de larvas de besouros. Massas menos ovos foram depositados sobre as plantas que incorreram em altos nveis de cigarrinha alimentao. Da mesma forma, o desenvolvimento larval foi adiada e besouros adultos emergentes pesava menos quando alimentados induzida folhagem do tratamento cigarrinha de alta densidade. Besouros sobreviveu menos bem no campo em plantas experimentando nveis moderados e elevados de cigarrinha alimentao como evidenciado por baixas densidades de ovos, larvas e adultos emergentes F1. No geral, cigarrinhas e besouros concorreu atravs da alimentao induzida por alteraes na qualidade da planta. Notavelmente, a assimtrica interao ocorreu em grande escala espacial em parcelas campo aberto e tiveram negativa conseqncias que persistiu at a gerao besouro que vem. Em ltima anlise, para estabelecer um efetivo estratgia de gesto de pragas como cigarrinhas, essencial considerar o lado positivo efeitos indiretos da resistncia induzida, juntamente com os efeitos negativos diretos sobre o rendimento das culturas. Palavras chaves: controle biolgico; colonizao; nveis econmicos; Empoasca fabae; alimentao guilda; resistncia induzida; Leptinotarsa decemlineata; manejo de pragas; de plantas mediada por competio interespecfica.
1. Introduo

Herbvoro induzido resistncia das plantas e suas conseqncias para outros insetos fitfagos esto recebendo considervel ateno em ambos os sistemas agrcolas e naturais (Damman 1993, Denno et al. 1995, Karban e Baldwin 1997, Agrawal et al. 1999, Thaler 1999a, Ohgushi 2005, Viswanathan et al. 2005, Denno e Kaplan, no prelo). Apesar do interesse generalizado na resistncia induzida de manejo de pragas, entretanto, ns simplesmente no sabemos muito sobre como uma espcie de pragas podem afetar outro via resistncia de plantas induzidas. Porque elicitores qumicos da resistncia das plantas (cido, por exemplo, jasmnico) esto atualmente sendo identificados e podem se tornar pragas importantes ferramentas de gesto (Thaler et al. 1996, Thaler 1999a), que se torna ainda mais fundamental para entender a conseqncias especficas de resistncia induzida por importantes pragas agrcolas.

Resistncia induzida ocorre quando a alimentao de herbvoros produz mudanas em plantas hospedeiras que diminuem subseqentes ataque de herbvoros, as mudanas que resultam da alterao nutrio das plantas (Denno et al. 2000), morfologia (Agrawal 1999), allelochemistry (Levin 1976, Faeth1986, Rausher et al. 199 3, Agrawal 1998, 1999), ou alguma combinao desses fatores (Karban e Baldwin 1997, Agrawal 1998, 1999). Nomeadamente, resistncia induzida pode ser local ou sistmica, podem surgir rapidamente ou com atraso significativo, e podem desaparecer rapidamente ou muito lentamente ao longo de geraes diversas herbvoro (Karban e Baldwin de 1997, Agrawal et al. 1999, e Denno Kaplan, no prelo). Assim, a resistncia induzida permite competio interespecfica para ocorrer entre indiretamente espcies de herbvoros que so espacialmente e / ou temporalmente separados na planta mesmo host (Faeth 1986, 1992, Tomlin e Sears 1992b, Inbar et al. 1995, Denno et al 2000, Wise e Weinberg 2002, Denno e Kaplan, em prelo). Resistncia induzida claramente tem implicaes importantes na agricultura, em que essencial para elucidar os fatores que influenciam a densidade de herbvoros de pragas, tanto para estabelecer nveis precisos de dano econmico (Dively et al. 1995) e, finalmente, para o desenvolvimento de biorational programas de gesto de pragas que podem envolver elicitores qumicos (Thaler 1999a, 2002). A prevalncia

de resistncia a inseticidas e a preocupao com a excessiva uso de pesticidas no ambiente demanda uma melhor compreenso da dinmica de pragas em sistemas agrcolas eo desenvolvimento de novas abordagens de controle (Noronha et al. 2001, Matsumura, 2004). Um dos casos mais notveis de resistncia a inseticidas ocorreu com o Colorado batata besouro (Forgash 1985), um dos principais pragas da batata na Amrica do Norte (Ferro 1985, Forgash 1985, Hare 1990, Roush et al. 1990, ) Weber e Ferro 1994. Porque batata est entre os culturas mais importantes na regio Nordeste do Norte Amrica (USDA, 1999a), e porque suscetvel a vrias espcies de pragas de insetos que se alimentam em momentos diferentes atravs da estao de crescimento (USDA 2002), este sistema oferece uma oportunidade ideal para explorar as conseqncias de resistncia induzida e plantas mediada por competio entre insetos herbvoros compartilhando o mesmo host planta. Danos foliares em batatas e plantas relacionadas na Solanaceae resultados na induo de uma variedade de compostos nutricionais e aleloqumicos (Green e Ryan 1972, Tomlin e Sears 1992a, Hlywka et al. 1994, Thaler 1999a), todos com conhecidos anti-herbvoro efeitos (Karban e Baldwin de 1997, Constabel 1999). As duas principais pragas da batata no Nordeste regio de os EUA, a cigarrinha batata (Empoasca fabae: Hemiptera: Cicadellidae) e do Colorado besouro da batata (Leptinotarsa decemlineata: Coleoptera: Chrysomelidae), so temporalmente separados devido sua diferentes hbitos de hibernao, phenologies colonizao de culturas, e as actuais prticas de gesto (Dively et al. 1999a). Em muitos campos, cigarrinha da batata migra para campos no incio da temporada enquanto o Colorado batata besouro coloniza mais tarde, aps as plantas tm sido previamente alimentados pela cigarrinhas. Usando um combinao de efeito estufa, campo de gaiolas, e fieldplot grandes experincias, a possibilidade de atraso, plantmediated concorrncia entre estas duas pragas foi examinadas. Objetivos especficos foram determinar se alimentao anterior cigarrinhas batata tinha adversos consequncias para besouros da batata, resultando em Colorado (1) de preferncia para oviposio reduzido para folhagem induzida e (2) diminuio do desempenho (tempo de desenvolvimento larval e massa corporal de adultos) e de sobrevivncia na folha induzida. Embora haja um crescente corpo de literatura demonstrando que temporal e espacialmente separados herbvoros podem competir atravs de resistncia induzida (Karban e Baldwin 1997, Agrawal et al. 1999, Viswanathan et al. 2005, Denno e Kaplan, no prelo), poucos o fizeram em

grande escala espacial em um sistema agrcola. Como um abordagem deve finalmente permitir que os gerentes de pragas para estabelecer nveis mais precisos de dano econmico para pragas agrcolas que levem em conta tanto os diretos impactos de um herbvoro sobre o rendimento das culturas, bem como a possveis benefcios indiretos que resultam da diminuio populaes de outras espcies de pragas que se alimentam mais tarde no estao. No entanto, os efeitos interativos entre pragas espcies geralmente no so considerados nos limiares de desenvolvimento ou na tomada de decises de gesto mais de sistemas de cultivo (Welter 1996). Em direo a preencher este vazio, este estudo visa melhorar a nossa compreenso do induzido resistncia como ela influencia as interaes entre duas importantes herbvoros pragas.

MTODOS SISTEMA DE ESTUDO

Batata a cultura agrcola mais importante na Regio Nordeste (por exemplo, Maryland), de onde os EUA 0,66 328 ha so cultivados anualmente com um valor bruto de EUA 295 milhes dlares (USDA, 1999b). A batata do Colorado besouro foi uma praga significativa de batatas ao longo a regio Nordeste (Dively et al. 1995, USDA, 2002). No entanto, as atuais prticas de gesto, que incluem o uso de inseticidas sistmicos no plantio, resultaram em aumentos de uma praga segundo, a cigarrinha da batata (Dively et al, 1999a). Na Amrica do Norte, batata cigarrinha (E. ataca uma grande variedade de culturas e plantas selvagens, vrias culturas agronomicamente importantes, como a alfafa, feijo e soja (USDA, 2002). fabae) incluindo batata,

Batata cigarrinha no pode hibernar na regio Nordeste e migra para cima do sul anualmente, colonizando batata no incio de junho, em Maryland e permanecer no campos at a colheita (Dively 1986, Lamp et al. 1994). Ambos adultos e ninfas de cigarrinha da alimentao de batata na tecido vascular das folhas e caules de plantas (Walgenbach Wyman e 1985, Ferro 1986, Lamp et al. , 1994). Com piercing sugadores de peas bucais, cigarrinhas bater em tecido de plantas vasculares e injetar saliva enquanto alimentao que provoca o crescimento anormal de clulas e blocos transporte floema. Dentro de duas semanas, as plantas comeam a mostrar sinais de funil''queimar'', que se caracteriza por

folha de curling, clorose, necrose e, finalmente, da folhas (Walgenbach Wyman e 1985, Ferro de 1986, Lamp et al. , 1994). Alimentao por cigarrinhas tambm conhecido alterar a composio de aminocidos da folha de batata (Tomlin e Sears 1992b). O Colorado batata besouro (L. decemlineata) um principal praga da batata na Amrica do Norte, onde pode causa desfolha intensa e perda de rendimento (Ferro 1985, ) Weber e Ferro 1994. Os ovos so depositados no baixo das folhagens e tanto as larvas e os adultos so desfolhadores voraz (USDA, 2002). Passar larvas atravs de quatro estgios larvais e um estgio pr-pupa antes pupating no solo (Jacques 1988). Colorado de batata besouros tm duas geraes completas e uma terceira parcial por crescente temporada em Maryland, hibernao localmente como adultos e tornando-se ativo no final de abril (USDA, 2002) Prticas de gesto contemporneas envolvem a aplicao de um inseticida sistmico para o solo no batata de semente tempo plantada no incio de maro, o que impossibilitou a primeira gerao de besouros de significativa infligir danos em batata (Dively et al. 1999a, USDA, 2002). No entanto, no momento em que a segunda gerao de besouros emerge no final de junho a incio de julho, as batatas no so mais protegidos pelo inseticida sistmico, e esta gerao efetivamente coloniza os campos onde se pode infligir graves dano (Dively et al, 1999a).. Onde Colorado batata besouros, uma vez colonizado campos, juntamente com cigarrinhas batata, essa abordagem de tratamento do solo-new resultou na separao temporal das duas pragas em que cigarrinhas batata migram para os campos e comeam a alimentar bem antes da colonizao pelo Colorado batata besouro (Dively et al, 1999a).. Assim, este sistema proporciona um ideal oportunidade para testar plantas mediada por competio entre duas pragas economicamente importantes. LOCAL DE ESTUDO Instalaes de efeito estufa foram localizados na Universidade de Maryland, College Park, Maryland. Campo gaiola experimentos foram realizados em campos de batata na Universidade de Maryland Farm (Beltsville). Parcelas campo aberto foram localizado na Pesquisa Wye e Centro de Educao (Queenstown) ea Central de Investigao e Maryland Centro de Educao (Upper Marlboro), dois sites de pesquisa separados por 75 km.

Efeito estufa e de campo gaiola avaliao de e desempenho em cigarrinha-induzida folhagem

preferncia besouro

Cigarrinha-herbivoria treatments. Para avaliar os efeitos da alimentao anterior cigarrinhas batata sobre a oviposio preferncia e desempenho do Colorado batata besouros, plantas experimentando quatro nveis de cigarrinha herbivoria (nenhuma, baixa, moderada e alta) foram estabelecida no vero de 2001 na fazenda Beltsville. Em meados de maio, tubrculo peas semente (Solanum tuberosum, Kennebec variedade) foram plantadas em vasos individuais em potting padro mdio, e permitiu a crescer no efeito estufa at folhagem acima do solo foi observada. em incio de junho, vasos de plantas (64 por gaiola) foram transferidos para enquadrar gaiolas de campo (3,66 m2 por 1,83 m de altura) coberto com saran triagem (1,3 mm de dimetro). As plantas foram permitida a crescer nas gaiolas de campo para um ms antes cigarrinhas foram introduzidos no incio de julho. para estabelecer os quatro cigarrinha herbivoria tratamentos, coletadas no campo cigarrinhas (ninfas e adultos) foram liberados gaiolas em uma das quatro densidades preestabelecidos (0, 3, 10, e 20 cigarrinhas por planta), que abrangem as densidades intervalo que ocorre naturalmente nos campos de batata (Dively et al. 1999b). Duas gaiolas para cada tratamento foram estabelecidas. Gaiolas foram monitorados e cigarrinhas foram substitudos para manter densidades desejado para cada tratamento nvel. Cigarrinhas foram autorizados a alimentao por duas semanas, momento em que os sinais visuais de dano de alimentao foram observados. Para confirmar que os tratamentos de densidade de cigarrinha resultou em diferenas na alimentao danos visveis, todas as plantas foram retirados das gaiolas, aps a exposio cigarrinha e 20 plantas de cada um dos quatro tratamentos de densidade foram marcados por danos de alimentao por meio da quantificao da folha curling (porcentagem) e folha de necrose (percentagem) (Dively et al 1999b).. Para verificar a persistncia do quatro tratamentos de densidade de cigarrinha, o nmero de ninfas de batata cigarrinha por planta foi tambm recenseadas em 20 plantas por tratamento no final da semana dois perodo de exposio. Os efeitos da cigarrinha quatro tratamentos na folha curling, necrose da folha e o nmero cigarrinha das ninfas restantes foram avaliados atravs de ANOVA seguido por comparaes LSD meios (SAS Instituto, 2001). Plantas a partir dos quatro cigarrinha herbivoria tratamentos foram ento usados para testar os efeitos de alimentao anteriores sobre a preferncia para oviposio e desempenho de besouros de batata Colorado. Preferncia folhagem. para oviposio de besouros de cigarrinha-induzida

Para determinar o efeito da alimentao anterior cigarrinhas na preferncia para oviposio do Colorado besouros de batata no campo, cinco blocos de 16 plantas (quatro de cada nvel de herbivoria cigarrinha) foram transplantadas no cho em um quadrado latino na Beltsville Farm. Dentro de cada bloco, as plantas foram separadas por 0,9 m. Gaiolas de campo Saran tela foram, ento, erguido sobre cada bloco de 16 plantas. Assim, havia cinco blocos com quatro tratamentos por bloco e quatro plantas por bloco replicar de cada tratamento alimentao cigarrinha. Dezesseis pares de campo de coleta de besouros da batata Colorado foram liberados em cada gaiola (um par por planta) em 25 de Julho. besouros foram autorizados a se contentar com vrios dias depois que o tempo ovos foram visualmente recenseadas em 08 de agosto (pico oviposio tempo) pela contagem do nmero de massas de ovos em cada planta. Mdias dos tratamentos foram comparados usando ANOVA seguido por comparaes LSD meios (SAS Instituto, 2001).

Beetle desempenho folhagem

e sobrevivncia

na cigarrinha-induzida

Para avaliar a cigarrinha herbivoria efeitos sobre o tempo de desenvolvimento larval (dias), massa corporal de adultos (Gramas), sobrevivncia e (proporo) de besouros, 20 plantas de cada um dos quatro nveis de tratamento de alimentao foram mudou-se para o efeito estufa. Quatro plantas de cada tratamento foram designados aleatoriamente para cada uma das cinco bancos de efeito estufa (16 plantas por bancada). Uma coorte de 15 de um dia de idade, primeiro nstar de larvas do besouro foi enjaulado em cada planta em um saco de malha de organdi em 24 de Julho. Cada outro dia, todas as gaiolas manga foram abertos para registrar as estgio de desenvolvimento (estdio) para todas as larvas em cada coorte. Este procedimento foi seguido at que todas as larvas alcanado o estgio pr-pupa, em que poca foram prepupas removidos das gaiolas, contados e ento colocados em baldes de terra para pupao. Aps a emergncia, a massa de todos os adultos foi determinado. Tempo de desenvolvimento (dias de instar primeiro a estdios segunda, terceira e quarta), sobrevivncia larval (proporo de larvas sobreviventes do primeiro instar para o estgio pr-pupa), e massa mida adulto (gramas) foi determinado para cada coorte e tratamento significa