UNIVERSIDAD DE SUCRE FACULTAD DE INGENIERIA DEPARTAMENTO DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

PRACTICA No 4: METABOLISMO MICROBIANO

I. OBJETIVOS. Realizar pruebas bioqumicas de identificacin bacteriana a un cultivo determinado. Adquirir destreza en la identificacin bacteriana a travs de pruebas bioqumicas. Aplicar en la prctica los fundamentos cientficos de cada prueba bioqumica a ensaya. .Identificar presuntamente la cepa microbiana ensayada.

II. FUNDAMENTO TEORICO. Los microorganismos llevan a cabo una gran variedad de reacciones metablicas de anabolismo y catabolismo sobre determinados sustratos y con la ayuda imprescindible de las enzimas, las cuales llegan a ser particulares para gneros y especies, lo que hace que la determinacin de tales caractersticas inherentes del microorganismo sirva como criterios bsicos para la identificacin y clasificacin de los microorganismos. Los microorganismos deben degradar substratos adecuados para la obtencin de la fuente de carbono, y para ellos necesitan de la presencia de enzimas especficas, esto hace la diferencia entre un microorganismo y otro. Finalmente la caracterizacin bioqumica de los microorganismos se complementa con la identificacin morfolgica y en casos pertinentes se lleva a cabo una

identificacin a niveles superiores, como el caso de la inmunolgica y la molecular que poseen altos porcentajes de sensibilidad y especificidad. III. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS. EQUIPOS Incubadoras Autoclave Horno esterilizador Microscopio Nevera refrigerante MATERIALES Cultivo bacteriano tubos taparrosca Erlemeyer 250 ml Asas bacteriolgicas Algodn cinta de enmascarar REACTIVOS Agar triple azcar Agar citrato Agar SIM Agar lisina Agar kligler Caldo urea Perxido de hidrgeno Agua destilada

IV. PROCEDIMIENTO. Rotular adecuadamente los tubos de ensayo Verificar que el cultivo del ensayo se encuentra puro, mediante la Tomar una porcin suficiente de colonia bacteriana del cultivo Recuerde no se debe repetir la toma de observacin de colonias con caractersticas homogneas. suministrado con un asa recta. los tubos del ensayo. Realizar siembras por la tcnica de puncin en los medios de cultivo Recuerde que tienen en los tubos, en aquellos que son inclinados, adems de la puncin se hace una estra encima de la parte superficial del medio. sembrar primero los caldos. Incubar a 35-37C durante 24-48 horas Realizar las lecturas e interpretaciones de los resultados respectivos

muestra, es decir, con la primera asada de colonias se deben sembrar todos

en cada tubo segn el caso.

V. CUESTIONARIO.

a.

Cul es el fundamento cientfico de cada una de las siguientes pruebas Prueba de la Oxidasa Prueba de la catalasa Prueba de los nitratos Prueba de la Urea Prueba de la Lisina Prueba de motilidad Prueba de indol Prueba de fermentacin de carbohidratos Prueba de la esculina Prueba de Hemlisis

bioqumicas:

b. Por que razn se debe partir de cultivos axnicos para la realizacin de las pruebas bioqumicas. c. Cual es la funcin de los indicadores de pH en los medios de cultivo para pruebas bioqumicas. d. Cual es el valor diagnstico de las pruebas bioqumicas en la identificacin microbiana. e. . Para que tipo de microorganismos no se recomienda la realizacin de pruebas bioqumicas. f. Que recomienda usted cuando las pruebas bioqumicas realizadas a un patgeno no conducen a la plena identificacin. VI. BIBLIOGRAFIA. LUNA, Gilma Janeth. Manual operativo de Anlisis Microbiolgicos para alimentos. Fondo Editorial Fundacin Universidad de Bogot Jorge Tadeo Lozano. Bogot-Colombia. 1994. BROCK, Thomas D. Microbiologa. Sexta edicin. Prentice Hall Hispanoamericana S.A. Mxico. 1991. JAWETZ, MELNICK Y ADELBERG. Microbiologa Mdica. Manual Moderno. 17 edicin. Mxico. 2001. KONEMAN, Elmer W. Diagnstico Microbiolgico. Editorial Mdica Panamericana. Mxico. 1990. Manual de Medios de Cultivo. Merck Microbiology Manual. 12th edition. Merck. 2006