FORMACION DE FOLICULOS EN EL OVARIO Los ovocitos presentes en el ovario adulto se originan de un numero definitivo de clulas germinales primordiales derivadas

de la masa celular interna del blastocisto en desarrollo. En los mamferos, la hembra cuenta con una reserva de ovocitos que han interrumpido su crecimiento en los folculos primordiales, nica fuente de ovocitos para ser ovulados durante su vida reproductiva. Los folculos primordiales se forman durante la vida fetal en bovinos (130 das), ovinos y porcinos (70 das), o alrededor del nacimiento en roedores. Un folculo primordial esta compuesto de un ovocito cuyo crecimiento se ha detenido (poco antes del nacimiento) en la fase de diploteno de la profase I de la meiosis y esta rodeado por una sola capa plana de clulas escamosas de la pregranulosa. Cuando los folculos salen de la reserva, pasan de ser folculos primordiales a ser folculos primarios en transicin y las clulas escamosas pregranulosas que los rodean se transforman en clulas cuboidales granulosas y empiezan a proliferar. Conforme los folculos continan su desarrollo a travs de estructuras primarias, secundarias y preantrales adquieren capas sucesivas de clulas granulosas, aumenta el tamao del ovocito y se rodean de las clulas de la teca. Cuando la reserva disponible de folculos primordiales se acaba, la funcin reproductiva culmina. El desarrollo de un folculo primordial hasta una estructura primaria de transicin, al parecer esta regulado por varios factores de crecimiento que actan localmente dentro del ovario. La regulacin endocrina de la foliculognesis envuelve a las gonadotropinas, adems de hormonas y factores de crecimiento producidos localmente. El proceso gradual de desarrollo y diferenciacin de un folculo, desde una estructura primordial hasta el folculo preovulatorio, toma aproximadamente 8 semanas en roedores y alrededor de 6 meses en mamferos mayores, como el humano y el bovino. El proceso de crecimiento continuo y regresin de folculos antrales que conduce al desarrollo del folculo preovulatorio se conoce como dinmica folicular y se refiere al crecimiento de dichas estructuras en oleadas o grupos. Durante un ciclo estral pueden ocurrir una o ms oleadas (las denominadas ONDAS de desarrollo folicular. En cada oleada u onda, un grupo de folculos es reclutado o escogido para que salgan del estado de latencia e inicien un proceso de crecimiento. De este conjunto, uno o varios son seleccionados y finalmente uno de ellos se convierte en dominante (en hembras monotocas), mientras el resto sufre atresia en tanto que el folculo dominante de la ultima oleada en un ciclo estral (CE) esta destinado a ovular. Es decir, en las ondas de desarrollo folicular ocurren tres fases: Reclutamiento, seleccin y dominancia. Estos folculos ovricos se encuentran depositados en las periferias del rgano, denominada como corteza ovrica. Los folculos primarios con los cuales cada hembra esta naciendo, contiene en su centro, una clula germinativa femenina que se encuentra en el estado del ovocito primario. Despus del nacimiento los folculos sufren una serie de cambios que culminan al acabarse la pubertad, y se realiza su maduracin completa terminando con la ovulacin y la formacin subsiguiente del cuerpo amarillo. La formacin de los folculos primarios empieza a partir de 45-100 das de la preez, establecindose gradualmente cierta reserva de las clulas germinativas en la gnada. En la fase postnatal, el desarrollo folicular sufre una serie de cambios de los cuales los que tienen mayor importancia son:

Aumento del tamao folicular Multiplicacin de las clulas epiteliales La diferenciacin de las envolturas foliculares (zona pelcida, teca interna y externa) La formacin de la cavidad folicular El cambio de la ubicacin del vulo en la zona granulosa.

Un folculo primario se compone del ovocito primario rodeado de una capa simple de clulas aplanadas epiteliales, teniendo en total el dimetro de 30-50 micras. En el proceso de la maduracin sexual y luego tambin en el transcurso de cada ciclo estral, una serie de dichos folculos primarios, recibiendo el impulso ganadotrfico, entra en el proceso del desarrollo, debido a la hormona folculo estimulante. Un folculo secundario se caracteriza por la transformacin de clulas epiteliales en clulas cuboides, formacin de zona pelcida y desarrollo de las envolturas foliculares. Un folculo terciario se caracteriza por un aumento de su tamao, y se presentan en la superficie ovrica en forma de vescula cavitarias de tamao de la cabeza de un alfiler o mas grande 0.5 - 1 cm tanto en los ovarios de los animales prematuros, como en los ovarios de los animales adultos en el transcurso del ciclo y en varias cantidades. Hay miles de folculos en cada ovario de la vaca, pero solamente uno de ellos experimenta el proceso de ovulacin en cada ciclo estral. Durante este ciclo, en bovinos se presentan dos curvas de actividad folicular (algunas vacas pueden presentar hasta tres); la primera al inicio y la segunda a la mitad del ciclo. De la primera curva surge un pequeo folculo (de menos de 5 mm) y se convierte en un folculo mayor (de ms de 10 mm) entre los das 5 y 11; despus de esto, experimenta atresia. Aunque este folculo no sufre el proceso de ovulacin segrega valores similares de estradiol con respecto al folculo ovulatorio. Hay grandes folculos productores de estrgenos desde la segunda fase de actividad folicular. De esta manera, por lo menos un gran folculo se presenta en el ovario de bovinos durante el ciclo estral y parece que ste controla el destino de los otros folculos. Solamente uno o dos folculos de gran tamao que llegan a estar presentes poco antes del inicio del estro cumplen la ltima fase de crecimiento y se constituyen en folculos de Graaf capaces de someterse al proceso de ovulacin. Este folculo de Graaf, brillante y repleto de lquido, se expande ligeramente sobre la superficie del ovario. El sitio de la ovulacin se encuentra marcado por una plida rea vascular del folculo de Graaf, a la que se llama estigma; a partir de ella se liberarn tanto el vulo como el contenido folicular. Se desconoce el mecanismo por el que se selecciona el folculo que habr de sufrir ovulacin. El folculo se colapsa despus de la ovulacin, de tal manera que al efectuar palpacin rectal el folculo se siente como un rea suave, ligeramente deprimida en la superficie del ovario. No hay hemorragia en este sitio, sino que la cavidad se llena poco a poco con clulas del cuerpo lteo. El cuerpo lteo (C.L) alcanza su madurez a los siete das despus de la ovulacin, y desempea sus funciones durante ocho o nueve das, y al fin involuciona. El cuerpo lteo cambia de color durante el ciclo; al inicio, presenta color rojo ladrillo; cambia a amarillo oro a la mitad del ciclo, y a amarillo blanquecino al final de ste. Los

viejos cuerpos lteos se observan en la superficie del ovario como cicatrices blanquecinas: los cuerpos albicans El crecimiento folicular, la ovulacin y la funcin del cuerpo lteo estn regulados por el eje hipotalmico-hipofisario-ovrico. Los folculos de Graaf segregan estrgenos, en particular, 17 ?-estradiol. Las cifras de aumento de estradiol inducen el comportamiento del estro y, al combinarse con los valores decrecientes de progesterona, hacen que se eleve la LH. Si se presenta un folculo maduro, esta elevacin de LH provocar la ovulacin en unas 24 horas. Las propiedades fisicoqumicas del moco cervical son alteradas por la influencia de los estrgenos. Estas alteraciones en viscosidad, la forma de cristalizacin y la resistencia elctrica representan las bases del mtodo para detectar el estro en la vaca. El moco cervical es menos viscoso el da del estro y cuelga en forma de hilo claro que sale de la vulva. Al iniciar su funcionamiento el cuerpo lteo, el moco cervical se hace opaco y ms viscoso. Los estrgenos tambin dilatan el crvix durante el estro, de tal manera que se puede pasar un catter hacia el tero con ms facilidad que en cualquier otra etapa del ciclo estral. Los estrgenos favorecen la contractilidad o la tonicidad del tero. El tero est flccido y carece de tono durante la fase ltea; su tono alcanza un nivel mximo durante el estro y despus disminuye con la ovulacin. En virtud de que el tono uterino es un indicador confiable del estro y se detecta por palpacin rectal, con l la mayor parte de los inseminadores verifican si las vacas que van a ser inseminadas estn en estro. Los estrgenos incrementan el crecimiento vascular del endometrio. El retiro repentino de la secrecin de estrgenos despus de la ovulacin provoca hemorragias petequiales en el endometrio (sangrado del metaestro) y presencia de sangre en la secrecin vulvar. En la mayor parte de las vacas y vaquillas se ve un sangrado en el segundo o tercer da despus del estro. Al parecer, el sangrado del metaestro no tiene ninguna relacin con la concepcin; solamente es un indicador de que la vaca ha estado en estro. Las vacas que tienen moco teido con sangre al momento de la inseminacin tendrn menos probabilidades de concebir. Las acciones de la progesterona, secretada por el C.L en el tero y en el crvix, son opuestas a las de los estrgenos. Durante la fase de cuerpo lteo, el moco cervical es grueso y viscoso, el canal cervical se encuentra estrechamente cerrado y se relaja el miometrio. Los valores de progesterona en el plasma estn relacionados estrechamente con el crecimiento, el mantenimiento y la regresin del CL. La hormona luteotrpica (LH) en el ganado bovino, hace que aumente la sntesis de progesterona a partir del CL. La regresin ltea al final del ciclo estral es inducida por la prostaglandina F2? (PGF2?) de origen uterino. Los valores de progesterona en sangre perifrica y leche tienen variaciones cclicas y permite establecer el diagnstico de aciclicidad, confirmacin retrospectiva del estro y determinacin del momento de inseminacin. Tambin se utilizan corno prueba temprana de ausencia de preez. La mayor parte de los periodos estrales se identifican por observacin cuidadosa de los bovinos, por lo menos dos veces al da. Durante las observaciones para detectar estro, se evitar cualquier distraccin del ganado, como suele ocurrir con la alimentacin. La deteccin del estro se mejora al usar toros; stos pueden estar vasectomizados, o se les

puede desviar quirrgicamente el pene, o bien cerrar mecnicamente la vaina del prepucio. Otras formas de detectar estro consisten en emplear indicadores de presin positiva colocados en la grupa de las hembras, o marcadores de pecho en los toros. Cuando se tienen equipados con marcadores en la papada o en el pecho y montan a una hembra en estro, dejan una marca visible de colorante o grasa pigmentada en la grupa y el muslo de la hembra. Aunque se llegan a marcar algunas vacas que no estn en estro, la ayuda de ese tipo de marcadores identifica a las vacas que se deben observar con cuidado para la confirmacin del estro. Los bovinos son una especie caracterstica entre los animales domsticos, pues su ovulacin ocurre de 10 a 12 horas despus del final del comportamiento del estro o, en promedio, 30 horas despus del inicio de ste. Excepto en el caso del primer ciclo estral posparto, las ovulaciones se encuentran precedidas de signos de comportamiento de estro. Los bovinos son ovuladores espontneos, pero la ovulacin puede adelantarse en dos horas si se le presta servicio con un toro vasectomizado. De modo similar, el masaje manual del cltoris durante 10 segundos despus de la inseminacin artificial de ganado productor de carne acorta el intervalo que existe entre el inicio del estro y el pico ovulatorio de LH por ms de 4 horas, lo que acortar el tiempo entre el inicio del estro y la ovulacin en un total de cuatro horas o incrementar el ndice de concepcin en 6%. Normalmente, en bovinos un solo folculo experimenta ovulacin en cada ciclo estral. Casi en 10% de los casos llegan a ovular dos folculos, y muy rara vez tres. Casi en 60% de los casos un folculo produce ovulacin en el ovario derecho, y 40% de las veces en el ovario izquierdo. Despus del parto, la primera ovulacin suele ocurrir en el ovario opuesto al cuerno uterino que previamente aloj al feto La eficiencia de la reproduccin en una especie dada depende de factores tales como la duracin del celo, la duracin del ciclo estral, el numero de ovulaciones, la duracin de la preez, el tamao de la camada, el periodo de amamantamiento, la edad a la pubertad y la duracin de la vida reproductivamente til de los animales. En la ltima dcada, la reproduccin asistida de la produccin animal, ha evolucionado de manera acelerada, marcando el inicio de una nueva etapa. Esta se caracteriza por el desarrollo de una serie de tcnicas que contribuyen a aumentar, en forma rpida, la capacidad reproductiva y de mejoramiento gentico de las especies domesticas, las tcnicas para la manipulacin del proceso reproductivo que han recibido mayor atencin y desarrollo en los ltimos aos son: 1. Ovulacin Mltiple (Superovulacin) y Transferencia Embrionaria 2. Congelacin de Embriones 3. Produccin de Gemelos 4. Produccin de Embriones in vitro 5. Multiplicacin de Embriones a. Por medio de Biseccin o Divisin b. Por medio de Clonacin o Transferencia Nuclear 6. Sexado de Embriones 7. Sexado de Fetos

8. Transferencia de Genes. La mayora de estas tcnicas se lleva a cabo en forma comercial en los animales domsticos, con excepcin de la Transferencia de Genes, an en etapa experimental. La importancia de estas nuevas tecnologas est en la forma en que se puedan complementar unas con otras y en la posibilidad de que sean usadas comercialmente. Estas nuevas tecnologas, junto con la Inseminacin Artificial (IA) y un programa selectivo de cruzamientos, se pueden convertir en parte de un sistema en gran escala para la produccin y comercializacin de animales genticamente superiores. Muchos de estos adelantos tienen y tendrn un gran impacto en la produccin animal en todo el mundo; luego, es importante que se conozca los aspectos ms importantes y prcticos de dichas tcnicas La congelacin controlada, tambin conocida como criopreservacin, es una tcnica que actualmente est bien establecida y cada da se usa ms. Mediante este procedimiento los embriones sufren un proceso de deshidratacin al enfriarse lentamente en una solucin que contiene una sustancia crioprotectora, es decir, que protege contra las bajas temperaturas. La descongelacin puede ser lenta o rpida, dependiendo del nivel de deshidratacin que haya alcanzado el embrin. Cada paso, desde la preparacin de la solucin crioprotectora hasta la evaluacin del embrin despus de la descongelacin, tiene que ser controlado con precisin y llevado a cabo con cuidado. Esto requiere de considerable habilidad y experiencia. Cuatro etapas deben ser tenidas en cuenta para conseguir una congelacin exitosa de los embriones. 1. Las clulas deben ser protegidas por una sustancia no toxica, que reduzca el riesgo de la deshidratacin y de la formacin de cristales dentro de la clula, durante la congelacin y la descongelacin del embrin. El glicerol ha sido la sustancia de eleccin para esta funcin especialmente en bovinos. 2- Debe haber un cuidadoso control de las fases de congelacin para evitar que se formen cristales de agua que son letales para la clula. En este caso se utiliza un sistema manual o automtico de induccin de cristalizacin a una temperatura entre 6 y 7 grado centgrado. 3. Los embriones deben ser calentados a temperaturas fisiolgicas para adquirir su funcin normal. 4. El crioprotector debe ser removido de los embriones por dilucin. Recientemente se ha visto un aumento significativo en la facilidad con que se pueden congelar y descongelar los embriones del ganado bovino; la cual est encaminada a hacer que el proceso sea ms fcil de aplicar a nivel de campo y que los costos de su aplicacin, en trminos de equipos y reactivos sean reducidos considerablemente. En este campo se han desarrollados metodologas, para que usando mezclas de crioprotectoras se pueda hacer un descenso rpido de la temperatura evitando la utilizacin de equipos computarizados de altos costos. De las mezclas de crioprotectores han surgido la vitrificacin, Igualmente se agrega ahora la rehidratacin directa que consiste en suprimir la dilucin del crioprotector. La congelacin parece ser esencial para facilitar el comercio internacional de ganado bovino en gran escala. El objetivo de muchas compaas es poder colocar en el mercado internacional embriones congelados y sexados a un precio comparable al del semen congelado. Segn algunos expertos, los embriones son el futuro del comercio gentico. La produccin de gemelos se hace de dos formas diferentes:

1. Se insemina una vaca receptora durante su estro natural y siete das despus se le trasplanta un embrin. 2. Se trasplantan dos embriones a una receptora. Para comparar los porcentajes de preez, gestaciones gemelares y total de cras obtenidas con cada uno de estos procedimientos, se realiz un estudio en el que se trasplantaron embriones en ambas formas. Combinando Inseminacin artificial y transferencia de embriones se obtienen mayores porcentajes de preez (67%), de gemelos (28%) y de cras (94%) que trasplantando 2 embriones (42%, 21% y 63%, respectivamente) . De esta forma, se comprueba que la produccin de gemelos tiene un gran potencial para aumentar significativamente el porcentaje de cras obtenidas. Sin embargo, existen efectos secundarios que limitan el uso de esta tcnica, como: a. La condicin conocida como Freemartin, en la cual la becerra que nace gemela con un becerro es estril en ms del 90% de los casos. b. El elevado porcentaje de mortalidad asociado con los partos gemelares, no solamente durante la gestacin, sino tambin durante el parto y el periodo posterior al parto. Esta tcnica no se emplea comercialmente en Estados Unidos de Amrica, pero bajo condiciones especiales se emplea en Irlanda, Escocia y Japn. En estos pases utilizan embriones de razas productoras de carne, que son relativamente escasas, para trasplantarlos a vacas de razas lecheras trmino in vitro se utiliza para aquellos procedimientos que se llevan a cabo afuera del organismo vivo; en este caso se refiere a una serie de manipulaciones que se realizan en condiciones de laboratorio. De esta forma, el concepto de produccin de embriones in vitro se puede definir, en forma simple, como una tcnica que hace posible que los vulos no fertilizados se puedan madurar, fertilizar y desarrollar bajo condiciones de laboratorio. La materia prima para esta tcnica son vulos no fertilizados y semen de toros seleccionados. Hay dos formas para obtener los vulos, segn el objetivo final de produccin. Cuando el objetivo es producir embriones de razas puras, se utilizan vacas donadoras de la raza deseada y por medio de un procedimiento quirrgico se obtienen los vulos directamente de los ovarios del animal vivo. Este procedimiento se denomina Aspiracin Guiada por Ultrasonido; en trminos generales, se realiza de la siguiente forma: Por va vaginal se introduce manualmente una sonda especial de un aparato de ultrasonido. Esta es una sonda modificada que ha sido adaptada que lleva en su interior una aguja hipodrmica, conectada a una bomba de vaco por medio de una manguera de plstico. A continuacin, por va rectal, se localiza un ovario y se manipula hasta ponerlo en contacto con la aguja. Una vez frente a uno de los ovarios, con la ayuda visual del aparato de ultrasonido, se inserta la aguja hipodrmica en el ovario, dirigindola hacia la superficie interna del mismo, donde se localizan los vulos. Finalmente, se procede a aspirar los vulos inmaduros utilizando la presin negativa de la bomba de vaco. Este mtodo tambin puede usarse en combinacin con ovulacin mltiple, cuando se desean obtener vulos maduros. Cuando el objetivo es producir embriones de tipo comercial, se usan ovarios de vacas o vaquillas sacrificadas en el matadero. Los ovarios se transportan de inmediato al

laboratorio, donde se procede a aspirar los vulos con una aguja hipodrmica conectada a una bomba de vaco. Obtenidos los vulos, el siguiente paso es producir embriones. La produccin de embriones in vitro se ha convertido en realidad debido al reciente desarrollo de tecnologa en tres reas ntimamente relacionadas: 1. Maduracin de vulos in vitro. En la actualidad, el porcentaje de vulos que se logran desarrollar in vitro, desde su obtencin de los ovarios hasta la etapa de maduracin previa a la fertilizacin, es de aproximada mente 45% 2. Fertilizacin in vitro: Esta tcnica incluye un proceso para capacitar a los espermatozoides y posteriormente otro para fertilizar a los vulos, todo esto completamente in vitro. En la actualidad, los porcentajes de fertilizacin que se obtienen en condiciones de laboratorio llegan a ser de hasta 70 u 80% en ganado bovino. 3. Desarrollo de embriones in vitro. Recientemente, el uso de nuevos medios de cultivo ha mejorado el desarrollo de los embriones bovinos hasta la etapa de blastocito, logrndose porcentajes de gestacin relativamente altos (50%) despus de la transferencia. El resultado final son embriones de 7 das de edad producidos totalmente en condiciones de laboratorio, sin la ayuda de la madre. El desarrollo de este tipo de sistemas ha hecho que la produccin comercial de embriones in vitro sea ya una realidad. La transferencia de embriones (producidos in. vitro) para la produccin de carne ya se lleva a cabo en forma comercial en pases como Irlanda, Escocia y Japn, con el objetivo de producir gestaciones gemelares, debido al incentivo econmico que tiene la produccin de carne en esos pases. La produccin de embriones in vitro no se utiliza en los pases desarrollados para producir gemelos, pero s para producir grandes cantidades de vulos maduros que se emplean en las tcnicas de Transferencia Nuclear (Clonacin) y Transferencia de Genes. Aunque los resultados obtenidos son comparables con los resultados que se observan en un animal vivo, la principal ventaja de este mtodo es que es mucho ms econmico. El costo de produccin de embriones de tipo comercial por este mtodo es considerablemente bajo. En condiciones adecuadas y sin tomar en cuenta el costo del equipo, se pueden producir embriones in vitro a un costo accesible. La habilidad de producir muchas copias a partir de un solo individuo es algo que interesa grandemente a los investigadores y ganaderos, porque constituye una poderosa herramienta de seleccin y propagacin. Si se lograran producir grandes cantidades de individuos genticamente idnticos, se podran usar como controles perfectos en investigaciones cientficas; se eliminara as la variacin gentica en las mismas. Esta tcnica tambin es una forma de seleccin fenotpica, que puede permitir un rpido cambio en caractersticas especficas y muy seleccionadas, como la produccin de carne o leche. Esta tecnologa, combinada con la produccin de embriones in vitro, podra utilizarse para producir grandes cantidades de embriones de alta calidad que despus seran congelados o trasplantados. A continuacin se describen los dos mtodos actuales de multiplicacin de embriones: A. Biseccin o Divisin de Embriones. La Biseccin de Embriones es un procedimiento que da como resultado la produccin de gemelos idnticos al dividir el embrin usando tcnicas de microciruga. La cantidad de cras idnticas que se pueden producir por este mtodo es limitada, pues si el embrin se divide en ms de dos partes, disminuye grandemente la supervivencia de las partes resultantes.

La tcnica clsica consiste en cortar mecnicamente los embriones en estado de mrula o blastocito. Inicialmente con la ayuda de equipo sofisticado, y ahora mediante sistemas ms sencillos contando simplemente con una pipeta de soporte y una cuchilla montados en micromanipuladores y con la ayuda de un estereoscopio o un microscopio invertido. El mtodo ms sencillo y eficiente para producir gemelos idnticos es obtener embriones de 6 a 7 das de edad, cortarlos por la mitad y trasplantar las dos mitades inmediatamente. Este procedimiento solamente toma unos 10 minutos por embrin. Por este mtodo se han obtenido porcentajes de preez de 50% o ms para cada mitad, lo cual resulta en porcentajes netos de preez que pueden exceder el 100% de los embriones originales. A partir de la divisin de 100 embriones se obtienen 200 medios embriones, y a partir de stos, considerando un porcentaje de preez de 50%, se obtendra una cantidad total de 100 cras. Debido a que slo 50% de los embriones transplantados sobreviven la transferencia y producen gestaciones, y como ste es un proceso de seleccin al azar, de 100 cras obtenidas por medio de la biseccin de embriones, puede esperarse que la mitad sean gemelos idnticos. Este mtodo puede considerarse como una forma de donacin, porque hace posible la produccin de individuos genticamente idnticos. Gracias a esta tcnica se pueden producir animales idnticos para mejorar la eficiencia de ciertas investigaciones; en forma comercial se usa en algunos casos para aumentar la cantidad de cras genticamente valiosas. Otra aplicacin de esta tcnica es que permite que una de las mitades del embrin pueda utilizarse para sexarse y la otra para transplantarse. Su mayor limitacin es que los medios embriones no soportan bien la congelacin, de manera que cuando sea necesario preservarlos, es preferible congelar los embriones ntegros y proceder a la biseccin despus de descongelarlos. B. Clonacin de Embriones o Transferencia Nuclear. Por definicin, un clon es un organismo que se ha derivado a partir de un organismo original (y que tiene su misma constitucin gentica) por medio de varios tipos de reproduccin asexual. La Clonacin de Embriones bovinos ya es una realidad no solamente a nivel de investigacin sino tambin en forma comercial. En forma resumida, se lleva a cabo de la siguiente manera: 1. Utilizando tcnicas de micromanipulacin y microciruga, se obtiene un blastmero (clula que se forma durante la divisin de un vulo fertilizado) o ncleo de un embrin en etapa multicelular. 2. Por medio de micromanipulacin, se transplanta uno de estos blastmeros o ncleos a un vulo que ha sido enucleado (es decir, un vulo al que se le ha quitado su ncleo original). 3. Una vez que el vulo ha recibido su nuevo ncleo, se coloca en una cmara de fusin, en donde recibe una serie de estmulos elctricos, con lo cual inicia su desarrollo hasta convertirse en embrin. Un vulo que ha sido madurado in vitro y que posteriormente ha sido enucleado, tiene la habilidad de reprogramar el nuevo ncleo que se le ha transplantado, y lo induce a continuar su desarrollo como si fuera un embrin recin fertilizado, desarrollndose despus a una etapa multicelular. Posteriormente, un embrin que se ha desarrollado de esta forma puede usarse de nuevo (reciclado) como donador de ncleos; se produce as un nmero casi ilimitado de embriones idnticos.

Colectivamente, se han producido varios cientos de gestaciones con este procedimiento, y tambin se han realizado reclonaciones. La mayor cantidad de becerros donados a partir de un solo embrin es de 86 y se ha producido preez a partir de embriones de una y de mltiples generaciones, es decir, reciclando los embriones sucesivamente. Todava existe gran variabilidad de resultados en esta tcnica. Los porcentajes de preez con embriones obtenidos por Clonacin, frescos y congelados, han variado en diversos estudios de 0 a 54%, 11 a 33% y 40 a 50%. En la actualidad, parece ser que slo hay un laboratorio comercial en el mundo que ofrece la clonacin de embriones. Un ganadero puede enviar a este laboratorio un embrin de 5 das de edad para su clonacin; despus de una semana le ser entregado un promedio de 6 a 10 clones. Si la Transferencia Nuclear tiene xito en el futuro, constituir la primera oportunidad para producir grandes cantidades de animales idnticos para la produccin de carne o leche, con la ventaja de que todas las cras obtenidas a partir de un mismo embrin seran uniformes y tambin del mismo sexo. Sin embargo, an se requiere de ms investigacin para alimentar la eficiencia de este procedimiento y para eliminar el problema del gigantismo fetal, que se ha encontrado en algunos becerros producidos por Transferencia nuclear En el pasado se usaron varios mtodos para sexar embriones, pero con ninguno se lograron buenos resultados, pues eran ineficientes, poco exactos o causaban gran porcentaje de mortalidad en los embriones sexados. Para que esta tcnica sea til, debe encontrarse un mtodo que sea eficiente, de gran exactitud, rpido y que no dae al embrin. En la actualidad existe un nuevo mtodo con el que se estn obteniendo excelentes resultados, se basa en el uso de ingeniera gentica (ADN recombinante) para la identificacin de fragmentos especficos de ADN (material gentico) en los cromosomas del embrin. El procedimiento de sexado consiste en colectar varios blastmeros del embrin (haciendo una biopsia al embrin de 6 a 7 das de edad) y localizando en estas clulas las secuencias de ADN que son nicas del cromosoma Y (el cromosoma masculino). Esto se realiza gracias a la aplicacin de dos tcnicas ultramodernas: primero se lleva a cabo una reaccin en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas en ingls) para amplificar la muestra de ADN obtenida del embrin; despus, se utiliza una sonda especfica de ADN marcada con istopos radioactivos para detectar las secuencias de ADN presentes en el cromosoma Y. Este nuevo procedimiento tiene una exactitud del 99%, se lleva a cabo en un lapso de 6 a 8 horas y, segn el grado inicial de calidad de cada embrin, generalmente sobrevive ms del 90% de los embriones que se someten a la biopsia. En la actualidad existen varios tipos de sondas de ADN disponibles comercialmente para sexar embriones bovinos. Gracias a la tcnica de ultrasonido ya es posible detectar el sexo de fetos bovinos cuando an se encuentran dentro del tero. Esta tcnica consiste en la utilizacin de un moderno instrumento (tiempo-real, arreglo lineal) que emite y recibe ondas de sonido de alta frecuencia a travs de una potente sonda o electrodo. El principio bsico de esta tcnica, en trminos generales, es el siguiente: a. El instrumento de ultrasonido produce ondas sonoras de alta frecuencia que son emitidas por medio de la sonda. b. Cuando la sonda se dirige hacia los tejidos internos del individuo, las ondas viajan hacia los mismos, rebotando en las diferentes superficies que encuentran a su paso.

e. Despus de rebotar, las ondas regresan a su punto de origen y son captadas nuevamente por la sonda. d. Por ltimo, la sonda las regresa al instrumento de emisin, donde son convertidas en seales elctricas que a su vez producen una imagen en una pantalla electrnica,como resultado, las imgenes que se observan en la pantalla son prcticamente una representacin bidimensional de los rganos o tejidos que son examinados. El procedimiento de diagnstico del sexo es relativamente sencillo, pero para obtener buenos resultados se requiere de experiencia. Antes de iniciarlo, cada vaca recibe una dosis de anestesia epidural para disminuir las contracciones rectales durante el examen, el cual toma unos 10 a 15 minutos por vaca. La sonda se introduce por va rectal en la vaca gestante y mentalmente se coloca a manera de producir una imagen longitudinal que permita observar el aspecto lateral! del feto. Luego, manipulando la sonda en la direccin adecuada, se acomoda hasta ver en la pantalla la regin perineal del feto. As, es posible observar (e incluso fotografiar o videofilmar) en dicha pantalla las protuberancias del escroto y del prepucio en los fetos de sexo masculino, o la protuberancia de la vulva en los de sexo femenino. Tambin es posible calcular la edad del feto midiendo su longitud total con ayuda del mismo instrumento. Esta tcnica se utiliza comercialmente, y con suficiente experiencia se puede obtener hasta un 100% de exactitud al diagnosticar el sexo fetal. Una desventaja es que solamente produce resultados ptimos cuando se aplica en fetos con edad mnima de 60 das y mxima de 85 das. Posiblemente su mayor desventaja es el alto costo del equipo de ultrasonido, lo cual hace que este tipo de diagnstico sea relativamente costoso. La ingeniera gentica constituye una de las ramas ms importantes dentro de las tcnicas biotecnolgicas, cuyas mtodos permiten manipular el material gentico a nivel celular (ADN La Definicin ms sencilla de la Transferencia de Genes es: la alteracin de la composicin gentica de un individuo al aadirle partculas de material gentico (ADN) procedentes de otro individuo. Este procedimiento generalmente se lleva a cabo durante el desarrollo del embrin. Un individuo con una composicin gentica proveniente de dos o ms individuos diferentes se conoce como transgnico. El ADN (cido desoxirribonucleico) constituye un compuesto esencial para la vida, ya que regula las funciones bsicas de los seres vivos. Se sita normalmente dentro del ncleo de las clulas, aunque tambin es posible encontrarlo a nivel citoplasmtico en bacterias (plasmidos). Contiene el material gentico o genes, trozo de ADN con secuencia de bases especfica, que permiten y regulan la sntesis de una serie de protenas que van a conformar parte estructural (por ejemplo, msculo o protenas lcteas) o parte de enzimas y hormonas, las cuales regulan el metabolismo tanto a nivel celular como general. Al momento de la reproduccin este ADN se transmite a la descendencia a travs de los gametos (vulos y espermios), los cuales contienen la mitad de los genes de cada padre, y que confluyen finalmente en el embrin formado al producirse la fecundacin de gametos. La principal utilidad de la transferencia de genes es que proporciona una forma de crear nuevas razas o variedades de animales transgnicos en cuanto a genes tiles no presentes en

su especie: tambin facilita la introduccin de genes que existen en una raza o variedad, pero que se encuentran con poca En la produccin de animales domsticos transgnicos no se han obtenido an los resultados que ya se tienen en animales de laboratorio y en aves. En ganado bovino, con los mtodos actuales de micromanipulacin y microinyeccin de material gentico, la eficiencia total de este proceso es muy baja (menos de 1 %); debido a esto se estn estudiando otros mtodos para hacer esta tcnica ms eficiente en el futuro. Algunos investigadores piensan que antes de producir una gran cantidad de animales transgnicos, es necesario saber cules son los genes que se deben introducir en dichos animales. Primero sera necesario identificar, aislar y conocer completamente los genes que controlan caractersticas productivas de importancia, por ejemplo los que controlan el crecimiento, la adaptacin al medio, la composicin de la carne o de la leche, la resistencia a las enfermedades y la reproduccin. La identificacin de genes ser una realidad cuando avancen ms los estudios actuales para trazar un mapa de genoma de los animales domsticos. En ganado bovino, afortunadamente ya se tienen algunos resultados preliminares y se continan realizando estudios en esta rea. La transferencia de Genes an est en una etapa experimental; a la fecha, slo se han producido unos cuantos embriones y becerros transgnicos en Estados Unidos y Canad. Sin embargo, actualmente se evala un sistema para producir grandes cantidades de ganado bovino con estas caractersticas La sincronizacin de estro ha sido un tema que se ha estudiado desde la dcada de los aos 40. Al comienzo los estudios se hicieron en base a progesterona por largos periodos, posteriormente los dias de aplicacin del progestagenos disminuyeron y aparecieron otras vas que la inyectable, especialmente debido a la disponibilidad de progestagenos sintticos. Posteriormente en la dcada de los aos 70 la sincronizacin de estros comenz una nueva etapa, sin dejar de lado la anterior, con la aparicin de las prostaglandinas. La sincronizacin del estro involucra el control o manipulacin del ciclo estral con el propsito de que las hembras elegidas en un rebao expresen estro (celo) aproximadamente al mismo tiempo. Es un manejo bastante utilizado en los programas de inseminacin artificial, transplante de embriones, concentraciones de partos y uso intensivo, por pocos das, de un toro con monta natural. La posibilidad de sincronizar el estro y la ovulacin en hembras que se encuentran normalmente ciclando, permite aumentar el uso de la inseminacin artificial. El uso de esta tcnica permite a su vez, un mejoramiento mas rpido de las caractersticas de importancia econmica por la minuciosa seleccin de los machos. El factor determinante en el xito de la sincronizacin es la eleccin del mtodo adecuado, que se ajuste a las condiciones de cada animal. La sincronizacin consiste en la aplicacin de un producto hormonal obtenido en laboratorio. Segn cada producto es la forma, momento y nmero de aplicaciones y cuyos objetivos son:

1. Tener la posibilidad de predecir el da y momento en que un grupo de hembras esta listo para aparearse. 2. Obtener una fertilidad normal del estro controlado. La deteccin oportuna del estro es una prctica de gran valor en explotaciones donde se manejan programas reproductivos basados en la inseminacin artificial o monta controlada, ya que cualquier error en la observacin de los calores y/o en el momento del servicio, disminuye la tasa de concepcin. El esquema de inseminacin adoptado por la mayora de las explotaciones bovinas sigue la regla AM/PM, es decir, que los animales cuyo estro se detecta en la maana se inseminan en la tarde del mismo da y los que se detectan en estro en la tarde son inseminados en la maana del da siguiente. Sin embargo, dado que el ganado Bos indicus muestra algunas caractersticas productivas y reproductivas diferentes a de las del ganado europeo, es probable que la regla anterior no sea la adecuada para lograr en l las tasas de concepcin esperadas. Adems, el temperamento de este tipo de animales es nervioso, lo que dificulta su manejo. El ciclo estral de todas las especies domsticas se compone de fases hormonales claramente definidas, la luteica y la folicular, cuya longitud varia segn las especies. Sin embargo, en contraste con lo que sucede en el ciclo menstrual de los primates, la fase luteica es siempre considerablemente ms larga que la folicular al menos el doble, en vacas, ovejas, cerdas y yeguas. En trminos prcticos, la sincronizacin del estro en un grupo de animales puede intentarse de dos modos. El primer mtodo consiste en suprimir o inducir la regresin del cuerpo lteo, para que todos los animales del grupo entren en la fase folicular al mismo tiempo y mantengan mas o menos esta sincronizacin durante el estro. El segundo sistema consiste en la supresin del desarrollo folicular durante una fase luteica extendida artificialmente, de modo que al eliminar el bloqueo farmacolgico despus de un periodo de tratamiento, todos los animales entren en la fase folicular aproximadamente al mismo tiempo, esto tiene la ventaja de que queda muy poco tiempo para perder la sincrona por causa de los diferentes ritmos intrnsecos. En contraste con las manipulaciones de la fase luteica, hay que advertir que la fase folicular solo se puede acortar un da, o como mximo dos, en las vacas, cerdas y ovejas. Los intentos de prolongar una fase folicular activa inevitablemente desembocan en ovulacin, atresia o anormalidades foliculares, tales como quistes. Teniendo en cuenta que generalmente se intenta sincronizar la reproduccin de grandes conjuntos animales, es necesario suponer que en un momento dado, las hembras presentaran una variacin muy grande, distribuidas al azar, respecto a la fase del ciclo estricto en que se encuentren. Por lo tanto, un tratamiento sastifactorio debe tratar de conseguir regular el ciclo de todos los animales, de manera que al cesar el tratamiento, una gran proporcin de los animales, si no todos, experimenten el estro en el mismo da.

Suponiendo que al comenzar el tratamiento las etapas del ciclo estn distribuidas al azar, la duracin de un tratamiento que mantenga a todas las hembras en la fase luteica debe ser mayor que la duracin de la fase luteica en la especie de que se trate. Por otra parte, si la intencin del tratamiento es precipitar prematuramente la fase folicular, el tratamiento debe tener una frecuencia o naturaleza que le permita abarcar animales que inicialmente estn distribuidos en todas las fases del ciclo La deteccin del del celo ha demostrado ser uno de los factores que afecta en forma significativa la eficiencia reproductiva en rebaos en confinamiento. La expresin de la conducta estral en vacas tiende a ser deprimida por los requerimientos de una gestin econmica de produccin. La superficie de los corrales, la segregacin de las hembras en grupos de alimentacin, corrientemente el aumento en la frecuencia de ordeos y la rutina en el suministro de alimentos, contribuyen a dificultar la conformacin de grupos sexualmente activos en los animales y con ello las posibilidades de observar la actividad de monta por el personal responsable. Lo anterior afecta el aprovechamiento de estros, los cuales contribuyen a definir el intervalo parto-preez del rebao. La sincronizacin del celo o estro en bovinos, se ha incorporado bsicamente como una herramienta para facilitar la deteccin de celo. Aunque ha mostrado ser econmica, en la mayora de las circunstancias, el nivel de sincronizacin no ha permitido una concentracin en la presentacin de los estros que optimice la conformacin de grupos sexualmente activos y en distribucin del personal responsable de la deteccin o eventualmente, la posibilidad de inseminacin a tiempo fijo. El problema bsico que exhiben los esquemas vigentes ha sido la falta de intervencin en la dinmica folicular, lo cual no permite un adecuado control sobre el intervalo entre el tratamiento de sincronizacin y la ovulacin.

La induccin y sincronizacin de celos, es una tcnica de manejo que aporta una serie de ventajas, como son: 1. La puesta en reproduccin de animales en anestro, con la consiguiente reduccin del intervalo entre partos. 2. Disminucin o supresin del tiempo destinado a la deteccin de celos. 3. Facilita el manejo de los rebaos, pudiendo trabajar con lotes homogneos. 4. Posibilita la introduccin de la inseminacin artificial mejorando las condiciones de aplicacin en los rebaos, tanto de carne como

de leche. Esto supone una difusin del progreso gentico ms rpido. 5. Permite fijar la fecha de la inseminacin y, con ello, de la feche de parto. 6. Permite reducir el nmero de desplazamiento y de intervenciones sobre los animales, por parte del inseminador. 7. Supone un factor de apoyo a la introduccin de otras tcnicas de mejoras (nutricionales, sanitarias), sacando a la luz los factores responsables de los malos resultados de la explotacin. 8. facilita el empleo de la tcnica de transplante de embriones. 9. Permite el destete, engorde y comercializacin uniformes de grupos de animales. La eleccin del mtodo a aplicar en una situacin dada debe tener en cuenta una serie de factores, entre ellos la facilidad de administracin, la eficacia del tratamiento, la ausencia de efectos secundarios y, por supuesto, la relacin costo / beneficio. Pero si se aplican rigurosamente estas consideraciones, es difcil evitar la conclusin de que los procedimientos de sincronizacin pueden mejorar la produccin, especialmente la del ganado bovino y rumiantes menores. La cria controlada debe formar parte de un sistema ganadero general, y los requisitos previos para que su aplicacin resulte econmicamente posible son: Buena calidad de los animales y sus productos. Adecuado servicios, instalaciones y equipos para llevar estos procedimientos a la finca. Como es sabido la duracin del ciclo sexual, o intervalos entre dos celos consecutivos, va ntimamente ligada a la duracin del cuerpo luteo del ciclo, por ello, es obvio que regulando la duracin de la vida del cuerpo luteo, controlaremos el ciclo sexual de las hembras, siendo este el fundamento de la sincronizacin de celos. Para lo cual expondremos los mtodos usados actualmente para controlar la vida media del cuerpo luteo en las hembras domsticas, como son los progestgenos y sus anlogos y la prostaglandinas F2a y sus derivados. La progesterona se produce en el cuerpo luteo y, en algunas especies, tambin en la placenta y en las glndulas adrenales,

teniendo como alguna de sus acciones regular la duracin del ciclo estral gracias a su efecto inihidor del celo y la ovulacin. Tiene una vida media muy corta entre 3 a 4 minutos. Lo que implica la necesidad de utilizar altas dosis, la alternativa es usar anlogos que, sin producir efectos secundarios, precisan dosis mucho menores. Estos productos actan como un cuerpo luteo exgeno, inhibiendo la secrecin de gonadotropinas y, por tanto, el desarrollo folicular. Al cesar este bloqueo progesternico se producir la liberacin de las gonadotropinas y el inicio de un nuevo ciclo frtil. La prostaglandina F2 alfa se produce en el endometrio desde donde pasa va hemtica al ovario, lugar donde ejerce su accin: la luteolisis. El uso de Pgf2alfa por va parenteral presenta dos inconvenientes: se requieren dosis muy grandes y, por otro lado, existe el riesgo de aparicin de efectos secundarios, por este motivo se han desarrollado anlogos sintticos mucho mas activos con los que se requiere dosis menores y exentos de efectos secundarios. Hay que tener claro que, al margen de la finalidad que se persiga, la nica actividad til que desarrolla la PG F2 alfa es la luteolisis. A la hora de administrarla hay que tener en cuenta que para que actu es indispensable la existencia de un cuerpo luteo funcional. El tiempo que pasa hasta la salida en celo del animal depender del estado del cuerpo luteo en el momento de la administracin; este tiempo suele oscilar entre 3 a 5 dias Se puede sincronizar el celo en las vacas con los siguientes mtodos: Denucleacion luteal. Este mtodo suprime fsicamente la fuente de progesterona, denucleando el cuerpo luteo por presin digital per rectum. Tiene sus desventajas entre ellas, el riesgo de hemorragias y el desarrollo de adhesiones en las fimbrias que rodean al ovario tratado. Este mtodo de concluir la fase luteica del ciclo se puede aplicar a animales con un cuerpo luteo maduro, pero esto significa que solo

una parte de los animales del rebao mas o menos del 50 a 60% es susceptible. Adems, la denucleacion del cuerpo luteo requiere asistencia profesional e incluso as puede que la eliminacin del tejido luteico no sea completa. Cuando se realiza bien, el intervalo medio entre la extirpacin de la glndula y la reaparicin del estro es de unos 4 dias, aunque puede haber mucha variacin. Este mtodo esta en desuso. Inyecciones de progesterona. El mtodo consiste en inyectar una solucin de progesterona para simular la fase luteica e inhibir la pituitaria anterior. Para ello se crea un deposito subcutneo de la hormona en aceite, que se mantiene repitiendo las inyecciones durante 18 a 20 dias, aunque el estro se suprime al administrar una dosis apropiada de progesterona. Este mtodo presenta desventajas, como el problema del tiempo empleado en administrar la inyeccin, y tambin que al cesar el tratamiento no existe un cambio claro de situacin, debido a la influencia del deposito subcutneo de la hormona, provocando una gran variacin en el tiempo que tarda en reaparecer el estro, aunque la media es de 5 dias. Igualmente la fertilizacin disminuye en el primer estro despus del tratamiento con inyecciones de progesterona, a causa en parte a las influencias adversas sobre el transporte y supervivencia de los espermatozoides en el conducto genital femenino. Actualmente este sistema no se aplica. Progestanos de administracin oral. En un principio pareci que la aparicin de progestagenos sintticos administrables por va oral iba a resolver las desventajas del tratamiento con progesterona a base de inyecciones. Adems, se consideraba que estos compuestos eran mas adecuados para la sincronizacin de grandes conjuntos de animales alimentados en comederos. Dos de estos progestanos fueron el acetato de melengestrol (MGA) y el acetato de medroxiprogesterona (MPA), retirados del mercado.

El tratamiento con estos compuestos sintticos duraba de 15 a 18 dias, y una gran proporcin de los animales presentaban el estro de 3 a 5 dias despus de la supresin del tratamiento, pero inevitablemente la fertilidad era muy baja. Progestagenos a corto plazo Actualmente se aplican combinaciones de tratamientos hormonales durante un periodo de 9 a 12 dias, ya sea el empleo de un progestageno sinttico administrado en implantes, esponjas o dispositivos intravaginales, durante un periodo de solo 9 0 10 dias, en combinacin con inyecciones de benzoato de estradiol y progesterona, administrada al principio del tratamiento. El objetivo de la inyeccin de estrgeno es provocar la regresin prematura de un cuerpo luteo en desarrollo, mientras que la inyeccin de progesterona bloquea una posible ovulacin inminente, de manera que al final del tratamiento con progestagenos, todos los animales entren en la fase folicular, independientemente del estado de sus ovarios antes del tratamiento Con este mtodo se consigue una buena sincronizacin y una fertilidad normal, en especial despus de un tratamiento de 12 dias y una sola inseminacin aproximadamente 56 horas despus de terminar el tratamiento. Inyecciones de prostaglandina F2 alfa La difusin de las prostaglandinas naturales o sintticas ha dado un nuevo mpetu a los intentos de sincronizar el estro en el ganado vacuno, por mtodos mas sencillos que los de progesteronas o sus anlogos. Adems, despus del tratamiento con prostaglandinas se producen fenmenos que imitan perfectamente parte del proceso luteolitico natural y de este modo se puede evitar la disminucin de fertilidad que se presenta en los tratamientos con progestgenos. La aplicacin de prostaglandina F2 alfa entre los dias 5 y 16 del ciclo estral, produce la ruptura del cuerpo lteo lo cual conduce a la disminucin de las concentraciones de progesterona durante las primeras 24 horas posteriores a la inyeccin.

Al reducirse los niveles de progesterona, se produce un incremento en los niveles de estradiol y hormona luteinizante, que pueden ser seguidos por la presentacin de estro y un pico de la gonadotropina en los siguientes 2 a 5 dias, resultando finalmente en la ovulacin. Nada revela alguna diferencia en la respuesta hormonal endgena despus del tratamiento al aplicar prostaglandinas naturales o sintticas. Las hembras sincronizadas con prostaglandinas tienden a manifestar el estro dentro de los primeros cinco dias posteriores a la aplicacin del frmaco. El grado de sincronizacin de estros durante los cincos posteriores a la aplicacin de la prostaglandina se ubica entre 73 y 93%, sin embargo, tanto el porcentajes de hembras que presentan celo como el intervalo entre el tratamiento y el inicio del calor varan segn diversos factores, como son: 1. Estado de la fase lutea: Al parecer la mayor determinante en la respuesta al tratamiento sincronizador es la etapa del diestro en la que se administra el frmaco. 2. poca del ao: Existe una interaccin entre la estacin del ao y la hora de tratamiento, que modifica el intervalo desde la aplicacin del frmaco al inicio del calor. Igualmente las hembras responden al tratamiento cuando las condiciones ambientales son mejores. 3. Edad. El inicio de calor se presenta mas pronto en novillas que en vacas. 4. Precisin cuando se detecta el cuerpo luteo por palpacin rectal. La certeza en detectar un cuerpo luteo por palpacin, cuando el rgimen de aplicacin de prostaglandinas lo requiere, modifica los resultados. En ganado europeo es mas fcil diagnosticar un cuerpo luteo por palpacin rectal que en ganado cebuino El ciclo estral de los rumiantes menores que incluye a las ovejas y caprinos se controla mediante inyecciones repetidas de una solucin de progesterona, la administracin de progestagenos por va oral y por la insercin subcutnea de implantes impregnados de progestgenos, pero ninguno de estos mtodos ha resultado lo suficientemente atractivo para aplicarlo comercialmente a gran escala. Los animales reanudan el estro unos 3 dias despus de interrumpir el tratamiento, pero surgen inconvenientes similares a los del

ganado bovino, en especial la disminucin de la tasa de concepcin que puede reducirse al 30 o 50% en el primer estro despus del tratamiento. Sin embargo, a pesar de algunos efectos adversos sobre la concepcin, la administracin de progestgenos por medio de esponjas intravaginales se emplea muy a menudo. Esponjas Intravaginales. Este mtodo consiste en que las esponjas, que contienen una dosis de cronolona en un vehculo fluido, tienen que permanecer en la vagina de 14 a 16 dias. Al retirar las esponjas despus de este periodo, una gran proporcin de ovejas y cabras experimentan el estro en un plazo de 24 a 72 horas, generalmente el segundo da despus de quitar la esponja. Si al retirarla se administra adems una inyeccin de Gonadotropina Corinica equina (eCG o PMSG), se aumenta la sincronizacin y se adelanta ligeramente la aparicin del estro. A veces, este tratamiento de 14 a 16 dias con progestagenos va asociado con un descenso de la fertilidad en el primer estro, debido a la modificacin del patrn de contracciones uterinas, que perjudica al transporte de espermatozoides hasta los tubos de Falopio, adems de reducir la supervivencia de los espermatozoides en el interior de la hembra tratada, pero esto se puede superar inseminando dos veces, a las 48 horas y a las 60 horas despus de retirar la esponja. Progestagenos a corto plazo. Este mtodo consiste en establecer la administracin de progestagenos de 5 a 6 dias de duracin, mediante tratamientos con dispositivos intravaginales impregnados con acetato de medroxiprogesterona (MAP) o acetato de fluorogestona (FGA), ha sido exitoso para la sincronizacin del estro en los rumiantes menores. Este mtodo tiene la ventaja, de que al momento del retiro del dispositivo se observan niveles mas altos de progestageno por lo tanto, la fertilidad obtenida es superior a la encontrada con

tratamientos tradicionales, debido a que con este, se logra la ovulacin de folculos mas jvenes en los animales sincronizados. Los animales exhiben celo a los 37 a 72 horas despus de retirar las esponjas, obtenindose una tasa de preez y de concepcin del 64 y 75% respectivamente. Inyecciones de prostaglandinas. El cuerpo lteo de los rumiantes menores solo es sensible a los efectos luteoliticos de las prostaglandinas exgenos durante una parte de su vida. Se puede inducir la regresin de los cuerpos luteos mediante una sola inyeccin intramuscular de PGF2 alfa o un anlogo adecuado, cuando estas estructuras tienen al menos 3 dias de edad, es decir, en el da 4 del ciclo. Sin embargo, en conjuntos de animales cuyos ciclos estrales estn distribuidos al azar, sigue siendo necesario aplicar dos inyecciones para conseguir la sincronizacin de todos los animales. El intervalo entre ambos tratamientos suele ser de 8 o 9 dias. La luteolisis es rpida, y los animales reanudan el estro en un plazo de 72 horas despus de la inyeccin intramuscular o subcutnea de prostaglandina o un anlogo. La mayora de los animales presentan el estro entre las 29 y las 48 horas con una media de 44 horas Aunque la sincronizacin del estro en el ganado porcino, sobre todo en el caso de hembras jvenes que vayan a reproducirse por primera vez, presenta interesantes ventajas comerciales, lo cierto es que no existe en la actualidad, ningn mtodo aceptable de controlar el ciclo estral, debido a las limitaciones biolgicas. Sin embargo, en las cerdas adultas es bastante fcil sincronizar el ciclo, bastando con destetar a las cras en el momento adecuado. Inyecciones de progesterona. Las inyecciones diarias de una solucin de progesterona en aceite, resultan muy eficaces para suprimir el estro y la ovulacin en esta especie, pero esta forma de bloqueo pituitario o hipotalmico es asociada con una gran incidencia de folculos qusticos en el estro siguiente al tratamiento, lo que perjudica ostensiblemente la fertilidad.

Progestgenos por va oral. La admistracin oral de progestgenos, incorporados una o dos veces al da a la racin de alimentos en dosis de hasta 400 mg por animal y da, resulta eficaz en la supresin del estro, pero predispone al desarrollo de quiste ovricos. La aparicin de esta condicin folicular es un indicio de desequilibrio de gonadotropinas en los animales maduros, y puede producirse al administrar este progestageno, debido al bloqueo incompleto de la actividad pituitaria, en especial, la secrecin de FSH. Con dosis altas, se evita la formacin de quistes, pero la fertilidad suele ser baja, debido al tiempo comprendido entre el final del tratamiento y la ovulacin, que puede variar hasta en 10 dias. Inyecciones de prostaglandinas La utilizacin de un compuesto puro de prostaglandina o un anlogo para conseguir la sincronizacin del estro en las cerdas, se ve limitada por la brevedad del periodo durante el cual los cuerpos luteos son sensibles a los efectos luteolticos. Solo despus de los 11 o 12 das puede inducirse la regresin prematura de los cuerpos lteos con una inyeccin de PGF2 alfa o de un anlogo sinttico, de manera que no resulta sencillo sincronizar a todos los animales de un grupo en los que los ciclos estn distribuidos al azar. Se ha sugerido que un modo de utilizar prostaglandinas a escala industrial consiste en inseminar y aparear a todos los animales y despus inyectar prostaglandinas cuando los cuerpos lteos tengan al menos 12 dias de edad y de este modo inducir una regresin sincrnica y el retorno del estro. Este mtodo no es aconsejable. De hecho la nica aplicacin practica de las prostaglandinas o sus derivados para esta especie en particular, es la utilizacin de sus propiedades luteoliticas para dar fin a la gestacin y de este modo controlar el momento del parto. Inyecciones de gonadotropinas. La estimulacin de las hembras en el umbral de la pubertad, mediante la inyeccin de hormonas gonadotroficas, es el nico

mtodo confiable para controlar el estro y la ovulacin. Aunque este sistema se ha venido practicando experimentalmente durante muchos aos, aun no se ha aplicado en gran escala a la industria porcina, ya que para ello hay que conseguir primero que la crianza precoz no tenga efectos deletreos en posteriores gestaciones y, segundo que el costo de una mezcla de gonadotropina por ejemplo Gonadotropina Corinica equina (PMSG) y Gonadotropina Corinica humana (hCG) se mantenga dentro de limites razonables El control del ciclo estral es una herramienta valiosa que ha permitido la programacin de la inseminacin artificial a tiempos prefijados. En equinos, se usa comnmente en forma individual, al inducir el celo con prostaglandinas para dar servicio con monta natural. Sin embargo, el uso cada vez mas frecuente de la inseminacin artificial en esta especie hace necesario recurrir al control farmacolgico grupal del ciclo sexual. As, cuando se usa semen refrigerado, cuya capacidad fecundante se limita a unos dos o tres das, es altamente deseable disponer de un lote de hembras con celo programado y coordinado con el arribo del semen, con el objeto de disminuir trabajo, tiempo y costos. En caso de usar semen congelado, el control del ciclo y la ovulacin es crtico, ya que la inseminacin debe practicarse pocas horas antes de la ocurrencia de la ovulacin , debido a que el semen criopreservado dura unas 6 a 12 horas en el tracto genital de la hembra Los agentes farmacolgicos que se usan actualmente para controlar el ciclo estral en la yegua son los mismos que se utilizan en el bovino, cuyos protocolos algunas veces son aplicados de la misma forma, sin considerar las diferencias de especie. Desde la dcada de 1970 se ha generalizado el uso de un potente agente luteoltico (prostaglandina, PGF2 alfa) por su simpleza en la administracin. Inyecciones de prostaglandinas Las prostaglandinas tambin son utilizadas en las yeguas con el fin de producir luteolisis. Una vez aplicada la inyeccin se debe

observar el animal, ya que pueden entrar en celo durante los cinco dias posteriores a la aplicacin de la Prostaglandina. Sin embargo, la yegua presenta una fase lteal corta y generalmente con una sola onda folicular, por lo que los programas basados en el acortamiento del ciclo con prostaglandinas suelen tener un alto ndice de fracasos. La razn principal de estas fallas est vinculada al tamao del folculo ovulatorio al momento de la aplicacin de la dosis luteoltica de PG. Si el folculo es de tamao preovulatorio, puede sufrir atresia u ovular sin manifestacin de celo, lo cual puede demorar la presentacin del estro por varios das. En cambio, si hay un folculo en desarrollo, el estro puede ocurrir tan pronto como tres das. Esto representa una dispersin significativa con el inconveniente que la ovulacin puede ocurrir inmediatamente despus del tratamiento o demorarse casi dos semanas Inyecciones de Progesterona y Progestgenos Sintticos Otra forma de controlar el estro es mediante la administracin de agentes progestacionales (progesterona y progestgenos sintticos), los cuales se usan desde hace tiempo, mediante varias vas de aplicacin: oral , intramuscular, subcutnea, esponjas y dispositivos intravaginales . La estrategia del uso de progestgenos consiste en alargar artificialmente la fase ltea por un lapso superior a la duracin de un cuerpo lteo normal. El bloqueo del eje hipotlamo-hipofisiario ejercido por el progestgeno exgeno inhibe la liberacin de hormona luteinizante (LH) durante el tratamiento e impide la manifestacin del comportamiento estral. Con la terminacin brusca del tratamiento se produce un efecto similar a la lutelisis, por lo que la mayora de las hembras entran en celo generalmente en el tercer da postratamiento. Sin embargo, el tratamiento solo con progestgenos no inhibe la liberacin de hormona folculo estimulante (FSH) desde la adenohipfisis, razn por la cual contina el desarrollo folicular.