Recebido em 18/01/05.

Aceito em 16/06/05

Revista Brasileira de Farmacognosia Brazilian Journal of Pharmacognosy 15(3): 229-236, Jul./Set. 2005

Comparao das metodologias da Farmacopia Brasileira para determinao de gua em matrias-primas vegetais, e validao da determinao de gua em analisador de umidade para Calendula ofcinalis L., Foeniculum vulgare Miller, Maytenus ilicifolia Mart. ex. Reissek e Passiora alata Curtis
D.B. Borges*, M.R. Farias, C.M.O. Simes, E.P. Schenkel
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Departamento de Cincias Farmacuticas, Universidade Federal de Santa Catarina, Campus Trindade, 88040-900, Florianpolis, SC, Brasil
RESUMO: No presente trabalho foi descrita a comparao da aplicabilidade das metodologias preconizadas na Farmacopia Brasileira (1988) para a determinao de gua em drogas vegetais. Foi realizada, ainda, a validao da determinao de gua em analisador de umidade. As matrias-primas vegetais analisadas foram Calendula ofcinalis L. (calndula), Foeniculum vulgare Miller (funcho), Maytenus ilicifolia Mart. ex. Reissek (espinheira-santa) e Passiora alata Curtis (maracuj). A anlise dos resultados obtidos mostrou que h diferenas estatisticamente signicativas (p < 0,05) entre as metodologias Determinao de gua por destilao azeotrpica e Determinao de gua em drogas vegetais em estufa, assim como, entre a Determinao da perda por dessecao para as drogas vegetais calndula e funcho. No entanto, no foram observadas diferenas estatisticamente signicativas (p < 0,05) entre as duas metodologias de secagem em estufa. Quanto validao da determinao de gua em analisador de umidade, no foram observadas diferenas estatisticamente signicativas (p<0,05) entre os resultados das anlises em analisador de umidade e os obtidos atravs da Determinao da perda por dessecao. Alm disso, no foram vericadas diferenas estatisticamente signicativas (p < 0,05) para as anlises referentes repetibilidade, preciso intermediria e reprodutibilidade da tcnica, o que comprova a exatido e a preciso da metodologia proposta. Unitermos: Matrias-primas vegetais, determinao de gua, metodologias farmacopicas, analisador de umidade ABSTRACT: Comparison of pharmacopeial methods for water determination in plant raw materials and validation of water determination by infrared drying for Calendula ofcinalis, Foeniculum vulgare, Maytenus ilicifolia e Passiora alata. A comparison of the Brazilian pharmacopeial methodologies for water determination in plant raw materials is presented for the following species: Calendula ofcinalis, Foeniculum vulgare, Maytenus ilicifolia e Passiora alata. In addition, the validation of water determination by infrared drying was carried out for these species. The results obtained using the azeotropic distillation method (Brazilian Pharmacopoeia - Determination of Water by Azeotropic Distillation) were signicantly different (p<0.05) than those obtained using two different gravimetric methods (Brazilian Pharmacopoeia - Determination of Water in Vegetable Drugs and Determination of loss on Drying). However, no signicant statistical difference was observed between the two gravimetric methodologies. After optimization of operating conditions, the results of water determination by infrared drying were not signicantly different than those obtained using the loss on drying pharmaceutical method. Also, no statistically signicant differences were observed for repeatability, intermediate precision and reproducibility of the method, demonstrating the accuracy and precision of the proposed methodology. Keywords: Vegetal drugs, determination of water, infrared drying.

INTRODUO O excesso de gua em matrias-primas vegetais possibilita a ao de enzimas, alm de propiciar o desenvolvimento de fungos e bactrias (Farias, 2003). Entre os mtodos analticos ociais para determinao de gua em matrias-primas vegetais, o mtodo gravimtrico
* E-mail: daianiborges@gmail.com, Tel. + 55-48-3315075

em estufa o mais comum, seguido do mtodo de destilao azeotrpica, preconizado para a determinao de gua em drogas vegetais ricas em leos volteis. Os mtodos de secagem em estufa determinam no somente a perda de gua, como tambm dos demais constituintes volatilizados juntamente com a gua (Isengard; Frber,. 1999; Farias, 2003). Alm disso,
ISSN 0102-695X

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apresentam problemas quanto reprodutibilidade dos resultados, pois variaes signicativas podem ser observadas quando uma mesma amostra analisada em laboratrios diferentes e sob condies climticas variadas, principalmente, em relao umidade relativa do ar (Isengard et al, 2001). A Farmacopia Brasileira (2000a) preconiza a determinao de gua para matrias-primas vegetais no item V.4.2.3 Determinao de gua em drogas vegetais, onde, alm dos mtodos citados anteriormente (gravimtrico e azeotrpico), indica o mtodo volumtrico (Karl Fisher), e alega que o mtodo gravimtrico tecnicamente o mais simples e rpido, mas no deve ser aplicado para matrias-primas vegetais que contenham outras substncias volteis alm da gua. A Farmacopia menciona, ainda, que o mtodo deve ser selecionado de acordo com a respectiva monograa; entretanto, nas monograas existentes no h especicao de qual dessas metodologias deve ser empregada para a obteno do valor de referncia estabelecido. Em relao ao mtodo gravimtrico, a Farmacopia Brasileira (1988) preconiza, ainda, nos Mtodos Gerais, a Determinao da perda por dessecao (V.2.9). As duas metodologias de secagem em estufa diferem quanto aos critrios de anlise. Enquanto a Determinao de gua em drogas vegetais preconiza a secagem em estufa de 2,0 a 5,0 g da amostra, exatamente pesados, por 5h, a 100-105C e considera a anlise concluda quando a diferena entre duas pesagens consecutivas for menor do que 5,0 mg, a Determinao da perda por dessecao preconiza a secagem em estufa de 1,0 g da amostra, por 2h, a 100-105C, mas s considera a anlise concluda quando a amostra atingir o peso constante, ou seja, quando a diferena entre duas pesagens consecutivas no diferir em mais de 0,5 mg por grama da amostra. Apesar da existncia de metodologias ociais, atualmente, estudos esto sendo realizados sobre o uso de balanas acopladas a sistemas de secagem por radiao infravermelha (analisador de umidade) para a determinao de gua, tanto na rea de alimentos quanto na rea de medicamentos (Berntsson, Zackrisson, sting, 1997; Isengard; Frber, 1999; Isengard et al, 2001; De Caro, Aichert, Walter, 2001; Isengard; Prger, 2003), o que explicvel em funo do longo perodo de tempo requerido para a realizao das anlises atravs das tcnicas clssicas. O princpio do aquecimento por radiao infravermelha a transformao da energia eletromagntica em energia cintica, com liberao de energia trmica. Em contraste com a transferncia de calor por conveco, na secagem em estufa, a energia trmica fornece quantidade de calor suciente para que a liberao das molculas de gua ocorra mais rapidamente. Cabe ressaltar que, como na secagem em estufa, a medida da perda de massa inclui no somente a gua (Isengard; Prger, 2003). No entanto, h poucos estudos sistemticos sobre o uso desta tcnica 230
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aplicada a matrias-primas vegetais, pois dependendo do aparelho utilizado para a determinao de gua, diferentes programaes podem ser feitas e os resultados das anlises podem variar, dependendo do programa selecionado (Isengard,1995; Isengard; Frber, 1999). Diante disso, faz-se necessrio validar a metodologia de determinao de gua atravs de analisador de umidade, de acordo com as condies de secagem estabelecidas. No presente trabalho descrita a comparao da aplicabilidade das seguintes metodologias farmacopicas: Determinao de gua em drogas vegetais, Determinao da perda por dessecao e Determinao de gua por destilao azeotrpica para as seguintes matrias-primas vegetais: Calendula ofcinalis L. (calndula), Foeniculum vulgare Miller (funcho) Maytenus ilicifolia Mart ex. Reissek. (espinheira-santa) e Passiora alata Curtis (maracuj). Alm disso, foi realizada a validao da metodologia de determinao de gua em analisador de umidade para essas mesmas plantas. MATERIAL E MTODOS Material vegetal Os lotes das espcies analisadas (inorescncias de Calendula ofcinalis L. - calndula, folhas de Maytenus ilicifolia Mart. ex. Reissek - espinheira-santa, frutos de Foeniculum vulgare Miller - funcho e partes areas de Passiora alata Curtis - maracuj) foram adquiridos junto Cooperativa de Pequenos Agricultores de Estado de Santa Catarina, atravs da empresa Shambala, em quantidade suciente para a realizao de todas as anlises (1,0 Kg de cada planta). Os materiais vegetais foram triturados em moinho de facas (Maqmont) e tamisados para viabilizar a obteno das granulometrias sugeridas pela Organizao Mundial da Sade (1998): calndula (500), espinheira-santa (350), funcho (710), e maracuj (350). Os mesmos foram acondicionados em recipiente de vidro, devidamente fechados, armazenados em ambiente com temperatura controlada (18C) e protegidos da luz. Determinao de farmacopicas gua segundo metodologias

A determinao de gua para calndula, espinheira-santa, funcho e maracuj foi realizada segundo as metodologias: Determinao da perda por dessecao; Determinao de gua em drogas vegetais em estufa (V.4.2.3) e Determinao de gua por destilao azeotrpica (V.2.20.2), preconizadas na Farmacopia Brasileira. Na determinao de gua por destilao azeotrpica, a gua destilada juntamente com o tolueno, antes e aps a adio da droga vegetal, foi transferida para tubo de centrifuga graduado e, em seguida, centrifugado, sendo que o volume de gua da amostra foi obtido atravs da diferena dos volumes nal

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e do inicial. Os resultados obtidos foram expressos atravs da mdia desvio padro (DP) de oito determinaes, em porcentagens. Todas as anlises foram realizadas com a umidade relativa do ar inferior a 90%. Determinao de gua atravs de analisador de umidade A determinao de gua em analisador de umidade foi realizada em dois laboratrios (Laboratrio de Farmacognosia da Universidade Federal de Santa Catarina e no Laboratrio Farmacutico do Estado de Santa Catarina - LAFESC). Para a realizao das anlises foram utilizados dois analisadores de umidade: o da marca Ohaus, modelo MB 45 (EUA) e o da marca Metller Toledo, modelo HB 43 (Sua). Em ambos, a fonte de aquecimento uma lmpada de halognio (400 W) e a sensibilidade da balana de 0,001 g. Os parmetros de anlise empregados foram: a) massa das amostras: 1,00 g; b) temperatura de anlise: 105C; c) trmino da anlise: perda menor que 1 mg em 120 e 140 segundos; e) Intervalo entre as anlises: 30 min, 2 min e sem intervalos. Validao da metodologia de determinao de gua em analisador de umidade A validao foi realizada utilizando-se as drogas vegetais citadas anteriormente. Os ensaios foram realizados de acordo a Conferncia Internacional de Harmonizao (ICH, 1998) e com o Guia de Validao de Mtodos Analticos e Bio-analticos (Brasil, 2003). A exatido foi avaliada atravs da relao entre os resultados obtidos em analisador de umidade com os obtidos atravs da metodologia farmacopica Determinao da perda por dessecao, em porcentagem (Brasil, 2003). Os resultados obtidos atravs da metodologia farmacopica foram registrados e considerados como valores de referncias para avaliar o grau de concordncia com os resultados obtidos por intermdio da determinao de gua em analisador de umidade. Para determinao de gua em analisador de umidade, os resultados foram obtidos pela leitura direta no visor do aparelho, em porcentagens. A preciso da metodologia proposta foi avaliada atravs da anlise da disperso dos resultados entre os ensaios independentes, repetidos para a mesma amostra, expressos por meio da repetibilidade, preciso intermediria e da reprodutibilidade. A repetibilidade foi avaliada atravs de medies sucessivas da mesma amostra, efetuadas sob as mesmas condies (mesmo procedimento de medio; mesmo analista; mesmo equipamento, usado sob as mesmas condies; mesmo laboratrio) e com oito determinaes ao dia. A preciso intermediria foi avaliada atravs dos resultados das 8 determinaes realizadas para uma mesma amostra, obtidos atravs de dois analistas durante um perodo de 7 dias. A reproditibilidade foi avaliada atravs da

concordncia entre os resultados obtidos atravs das 8 determinaes realizadas no segundo laboratrio, durante um perodo de 7 dias. A disperso dos resultados foi avaliada atravs dos desvios padres (DP) e do coeciente de variao (CV), no se admitindo valores superiores a 5% (Brasil, 2003). Anlise estatstica Os resultados obtidos na determinao de gua, atravs das metodologias farmacopicas, assim como, atravs do analisador de umidade foram analisados empregando-se o teste t de Student, com signicncia de p < 0,05. RESULTADOS E DISCUSSO Determinao de farmacopicas gua segundo metodologias

Os resultados obtidos atravs das metodologias farmacopicas Determinao da perda por dessecao, Determinao de gua em drogas vegetais e Determinao de gua por destilao azeotrpica so apresentados na Tabela 1. Quanto aos resultados obtidos atravs da Determinao de gua em drogas vegetais e da Determinao de gua por destilao azeotrpica, no foram observadas diferenas estatisticamente signicativa para o maracuj e para a espinheira-santa. No entanto, foram observadas diferenas estatisticamente signicativas entre os resultados obtidos para calndula e para o funcho, sendo essas, duas espcies que contm leos volteis (Bisset, 1994). A Farmacopia Brasileira IV preconiza um teor mximo de 12% para calndula (Farmacopia Brasileira, 2001) e 10% para funcho (Farmacopia Brasileira, 2000b), e portanto, as duas amostras estariam reprovadas, pois os resultados obtidos foram, respectivamente, 13,33% e 10,41%. No entanto, ambas seriam aprovadas, segundo os resultados obtidos atravs da destilao azeotrpica, a saber, 9,1% e 8,2% respectivamente. importante observar que apenas o funcho considerado rica em leo voltil, o que reala a importncia de especicar nas respectivas monograas qual metodologia deve ser empregada para a determinao de gua. Na comparao dos resultados obtidos atravs da Determinao da perda por dessecao e da Determinao de gua em drogas vegetais, foi observada diferena estatisticamente signicativa apenas para a calndula, que poderia estar relacionada com a presena de leo voltil e/ou de outros constituintes termo-sensveis dependentes do tempo de exposio ao calor. Em relao ao tempo total de anlise para a Determinao da perda por dessecao e da Determinao de gua em drogas vegetais, observouRev. Bras. Farmacogn. Braz J. Pharmacogn. 15(3):jul/set. 2005

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Tabela 1. Teores de gua nas drogas vegetais Calendula ofcinalis (calndula), Maytenus ilicifolia (espinheira-santa), Foeniculum vulgare (funcho) e Passiora alata (maracuj), atravs das metodologias Determinao de gua em drogas vegetais, Determinao de gua por destilao azeotrpica e Determinao da perda por dessecao (n = 8).

Droga vegetal

Determinao de gua em drogas vegetais

Determinao de gua por destilao azeotrpica

Determinao da perda por dessecao

X DP
(CV%) 13,33 0,44 a,c (3,31) 7,19 0,24 (3,31) 10,41 0,23 b (2,22) 10,58 0,26 (2,42)

X DP *
(CV%) 9,1 0,4 a (4,9) 7,2 0,3 (3,60) 8,2 0,5 b (6,1) 10,5 0,3 (3,0)

X DP
(CV%) 12,44 0,50 c (4,03) 7,29 0,12 (1,70) 10,54 0,18 (1,77) 10,51 0,21 (2,04)

Calndula Espinheira-santa Funcho Maracuj

Letras iguais indicam diferena estatisticamente signicativa entre si (teste-t studant, p<0,05); * Na Determinao de gua por destilao azeotrpica os resultados so apresentados com preciso de 0,1 mL.

Tabela 2. Tempo mdio total (n= 8) necessrio para a realizao das metodologias Determinao da Perda por dessecao, Determinao de gua em drogas vegetais e Determinao de gua por destilao azeotrpica nas drogas vegetais calndula, espinheira-santa, funcho e maracuj.

Tempo total (h) Droga vegetal

Determinao de gua drogas vegetais 8:30 7:30 7:30 9:30

Determinao de gua por destilao azeotrpica 3:30 3:30 3:30 3:30

Determinao da perda por dessecao 7:30 5:30 5:30 7:30

Calndula Espinheira-santa Funcho Maracuj

se que, apesar de existirem diferenas entre os dois procedimentos operacionais, ambos so demasiadamente longos, exigindo a dedicao dos operadores durante quase todo o procedimento. Quanto ao mtodo azeotrpico, o tempo total de anlise foi praticamente a metade do tempo necessrio para a realizao da Determinao da perda por dessecao (Tabela 2), sem considerar o tempo necessrio a montagem dos aparelhos de destilao. Na Determinao de gua em drogas vegetais, constatou-se que necessrio um nmero menor de pesagens at obter a diferena de massa, entre duas pesagens sucessivas, menor que o preconizado na metodologia (5,0 mg). Na Determinao da perda por dessecao, a maior diculdade encontrada foi a necessidade de chegar ao peso constante, pois observou-se que, a partir de um determinado ponto, algumas amostras passavam a absorver umidade do ambiente e, conseqentemente, aumentavam de peso, enquanto outras continuavam a perdendo-o; no entanto, os valores dos teores de gua no 232
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variavam mais. Observou-se tambm que, apesar de no se chegar a peso constante, as diferenas obtidas entre as duas ltimas pesagens consecutivas foram maiores que 0,5 mg, porm menores que 1,0 mg. Diante desta constatao, considerou-se a anlise concluda quando no foram observadas variaes entre as mdias de duas pesagens sucessivas (Tabela 3). Ainda em relao ao estabelecimento do trmino das anlises, foi feita a comparao dos resultados da determinao de gua, obtidos atravs da Determinao da perda por dessecao quando a diferena entre duas pesagens consecutivas foi menor que 1,0 mg e 5,0 mg. Os resultados so apresentados na Tabela 4, onde pode-se vericar, que no foram observadas diferenas estatisticamente signicativas entre os resultados obtidos. Quanto Determinao de gua em drogas vegetais, constatou-se que os coecientes de variao obtidos para as quatro plantas analisadas, ao nal de cada

Comparao das metodologias da Farmacopia Brasileira para determinao de gua em matrias-primas vegetais

Tabela 3. Teores de gua nas drogas vegetais Calendula ofcinalis (calndula), Maytenus ilicifolia (espinheira-santa), Foeniculum vulgare (funcho) e Passiora alata (maracuj), obtidas atravs das metodologias Determinao de gua em drogas vegetais e Determinao da perda por dessecao, aps cada uma das pesagens realizadas (n = 8).

Pesagem

Calndula

Espinheira-santa

Funcho

Maracuj

X DP
(CV%) 9,81 1,73 (17,68) 12,00 0,51 (4,28) 12,44 0,41 (3,26) 12,44 0,50 (4,03) 12,61 0,36 (2,38) 13,24 0,40 (3,04) 13,33 0,44 (3,27) 13,34 0,45 (3,36) 13,32 0,42 (3,13) 13,33 0,44 (3,31)

X DP
(CV%) 7,16 0,23 (3,23) 7,19 0,24 (3,31) 7,21 0,15 (2,03) 7,27 0,11 (1,49) 7,29 0,12 (1,70) (CV%)

X DP
(CV%) 9,84 0,20 (2,01) 10,17 0,21 (2,04) 10,29 0,22 (2,17) 10,45 0,23 (2,20) 10,51 0,21 (2,04) 10,09 0,37 (3,69) 10,53 0,27 (2,52) 10,54 0,31 (2,95) 10,57 0,29 (2,78) 10,57 0,27 (2,59) 10,58 0,26 (2,42)

X DP
10,50 0,22 (2,07) 10,48 0,18 (1,76) 10,41 0,18 (1,77) 10,63 0,42 (3,91) 10,46 0,20 (1,87) 10,49 0,24 (2,26) 10,54 0,23 (2,22)

Determinao de gua em drogas vegetais (%) Determinao da perda por dessecao (%)

1a 2a 3a 4a 5a 1a 2a 3a 4a 5a 6a

anlise, foram semelhantes aos obtidos na Determinao da perda por dessecao (Tabela 3). Cabe ressaltar que a quantidade de amostra utilizada na primeira tcnica foi trs vezes maior do que a utilizada na segunda; alm disso, o tempo de secagem na estufa da primeira mais que o dobro da segunda. No entanto, os resultados obtidos no apresentaram diferenas estatisticamente signicativas, o que representa um gasto maior em termos de energia, tempo e mo de obra, quando da execuo da Determinao de gua em drogas vegetais. Diante da similaridade dos resultados apresentados e das vantagens acima expostas prope-se

que o teor de gua em drogas vegetais seja realizado de acordo com a metodologia Determinao da perda por dessecao, considerando-se a anlise concluda quando a diferena entre duas pesagens consecutivas for menor do que 5 mg. Determinao de gua atravs de analisador de umidade Nesta metodologia, os parmetros de anlise (massa da amostra e temperatura de anlise) foram selecionados de acordo com os parmetros

Tabela 4. Teores de gua nas drogas vegetais Calendula ofcinalis (calndula), Maytenus ilicifolia (espinheira-santa), Foeniculum vulgare (funcho) e Passiora alata (maracuj), obtidos atravs da metodologia Determinao da perda por dessecao, aps duas pesagens consecutivas, cujas, diferenas foram menores que 5,0 ou 1,0 mg (n = 8).

Calndula

Espinheira-santa

Funcho

Maracuj

X DP
Diferena < 1,0 mg * Diferena < 5,0 mg * (CV%) 13,33 0,44 (3,31) 13,33 0,44 (3,27)

X DP
(CV%) 7,29 0,12 (1,70) 7,21 0,15 (2,03)

X DP
(CV%) 10,54 0,23 (2,22) 10,49 0,24 (2,26)

X DP
(CV%) 10,58 0,26 (2,42) 10,54 0,31 (2,95)

* diferena de massa entre duas pesagens consecutivas.

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Tabela 5. Teores de gua nas drogas vegetais Calendula ofcinalis (calndula), Maytenus ilicifolia (espinheira-santa), Foeniculum vulgare (funcho) e Passiora alata (maracuj), obtidos atravs da Determinao da perda por dessecao e em analisador de umidade (n = 8).

Droga vegetal Calndula Espinheira-santa Funcho Maracuj

Determinao da perda por dessecao

Determinao de gua em analisador de umidade

X DP
(CV%) 8,27 0,16 (1,96) 6,23 0,12 (1,97) 8,60 0,17 (2,03) 8,51 0,17 (1,95)

X DP
(CV%) 8,27 0,11 (1,96) 6,37 0,13 (1,97) 8,44 0,12 (1,36) 8,46 0,13 (1,49)

Exatido (%) 100,00 102,25 98,14 99,41

preconizados na metodologia Determinao da perda por dessecao. Um ponto crtico para a determinao do teor de gua atravs do analisador de umidade, e que no pde ser estabelecido de acordo com as metodologias farmacopicas, est relacionado com o trmino das anlises. Nos dois aparelhos utilizados, aps testes preliminares, selecionou-se, entre as opes de programao existentes, aquela que apresentou resultados mais prximos aos obtidos atravs da Determinao da perda por dessecao. No analisador de umidade Ohau, MB45, o critrio selecionado para o trmino da anlise foi: perda de massa menor do que 1,0 mg em 120 segundos; e no analisador de Umidade Metller Toledo, MB43, foi a perda de massa menor do que 1,0 mg em 140 segundos. Outro aspecto importante a ser observado o intervalo entre as anlises. Segundo Isengard e Fber (1999), os resultados da determinao de gua em analisador de umidade dependem da temperatura em que o equipamento se encontra no incio de cada anlise. Por isso, com relao ao intervalo entre as anlises testouse a utilizao do aparelho quente e sem intervalos; a utilizao do aparelho frio, ou seja, com 30 minutos de intervalo entre as anlises; e a sua utilizao com 2 min de intervalo entre o nal de uma anlise e o incio de outra. Para as anlises realizadas com o aparelho quente e sem intervalos entre as anlises observou-se que ocorre uma perda de massa substancial, antes mesmo do incio da anlise, o que leva a resultados errneos. Para as anlises realizadas com o aparelho frio, observou-se que os resultados obtidos so bastante precisos (dados no mostrados), no entanto, ao utilizar o aparelho frio, o intervalo necessrio para a realizao das anlises (30 min), caracteriza-se como uma desvantagem em relao ao tempo total das anlises. Ao xar o intervalo de tempo entre o nal de uma anlise e o incio de outra em 2 min, observou-se que os resultados das medies foram similares e com baixos coecientes de variao e, com isto, viabilizou-se o tempo total para a realizao das anlises, corroborando com os resultados apresentados 234
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por Isengard e Frber,1999; Isengard e colaboradores, 2001. Validao da metodologia de determinao de gua em analisador de umidade Aps o estabelecimento dos parmetros de anlise, realizou-se a validao da metodologia proposta para as quatro drogas vegetais em estudo. Tendo em vista os resultados obtidos anteriormente atravs da comparao das metodologias farmacopicas, a exatido da metodologia proposta em analisador de umidade foi avaliada atravs do quociente entre os resultados obtidos com o analisador de umidade da marca Ohaus, com aqueles obtidos atravs da Determinao da Perda por dessecao, considerando como critrio para o trmino da anlise a diferena menor que 5,0 mg entre duas pesagens sucessivas. A anlise estatstica dos resultados mostrou que no houve diferenas estatisticamente signicativas (p<0,05) entre os resultados obtidos atravs do uso do analisador de umidade, levando-se em conta os parmetros de anlise xados e os resultados da Determinao da perda por dessecao (Tabela 5). Quanto a preciso, os coecientes de variao (CV%) obtidos atravs das anlises, relativas a repetibilidade, preciso intermediria e a reprodutibilidade, em analisador de umidade foram menores do que 2%. Alm disso, no foram vericadas diferenas estatisticamente signicativas (p < 0,05) entre os resultados obtidos paras as mesmas, conrmando, assim, a preciso da metodologia proposta (Tabela 6). CONCLUSO Os resultados apresentados demonstram a importncia de especicar nas monograas farmacopicas a metodologia a ser empregada para a determinao do teor de gua em drogas vegetais. Ao contrrio do mencionado na Farmacopia Brasileira (1988), este trabalho demonstra que as metodologias de secagem em estufa so demasiadamente longas, exigindo a dedicao

Comparao das metodologias da Farmacopia Brasileira para determinao de gua em matrias-primas vegetais

Tabela 6. Teores de gua nas drogas vegetais Calendula ofcinalis (calndula), Maytenus ilicifolia (espinheira-santa), Foeniculum vulgare (funcho) e Passiora alata (maracuj), obtidas atravs das anlises, em analisador de umidade, relativas a repetibilidade, preciso intemediria e reprodutibilidade (n = 8).

Condio 1 Dia 1 2 3 4 5 6 7 X DP (CV%)

Calndula Condio 2

Condio 3

Condio 1

Funcho Condio 2

Condio 3

X DP
(CV%) 8,38 0,18 (2,10) 8,21 0,17 (2,03) 8,31 0,13 (1,55) 8,22 0,16 (1,96) 8,27 0,11 (1,28) 8,13 0,22 (2,70) 8,49 0,18 (2,11) 8,29 0,11 1,35 Condio 1

X DP
(CV%) 8,32 0,24 (2,85) 8,30 0,11 (1,37) 8,55 0,16 (1,84) 8,26 0,11 (1,34) 8,34 0,14 (1,72) 8,41 0,15 (1,74) 8,51 0,11 (1,31) 8,38 0,10 1,22 Espinheira-santa Condio 2

X DP
(CV%) 8,50 0,15 (1,76) 8,21 0,14 (1,67) 8,47 0,21 (2,43) 8,49 0,13 (1,52) 8,35 0,19 (2,27) 8,26 0,16 (1,88) 8,33 0,17 (2,09) 8,37 0,11 1,29 Condio 3

X DP
(CV%) 8,38 0,26 (3,16) 8,55 0,14 (1,63) 8,30 0,24 (2,93) 8,58 0,16 (1,83) 8,44 0,12 (1,36) 8,36 0,20 (2,41) 8,30 0,14 (1,74) 8,41 0,10 1,24 Condio 1

X DP
(CV%) 8,51 0,13 (1,53) 8,39 0,15 (1,80) 8,63 0,18 (2,11) 8,50 0,18 (2,11) 8,41 0,20 (2,40) 8,33 0,21 (2,51) 8,32 0,17 (2,10) 8,44 0,10 1,21 Maracuj Condio 2

X DP
(CV%) 8,62 0,23 (2,64) 8,42 0,18 (2,13) 8,38 0,19 (2,26) 8,35 0,12 (1,44) 8,34 0,15 (1,82) 8,43 0,13 (1,54) 8,32 0,15 (1,84) 8,41 0,10 1,24 Condio 3

X DP (CV%) (CV%) (CV%) (CV%) (CV%) (CV%) 1 6,25 0,14 6,35 0,18 6,30 0,18 8,52 0,23 8,61 0,24 8,58 0,21 (2,18) (2,88) (2,82) (2,66) (2,76) (2,45) 2 6,23 0,16 6,31 0,10 6,27 0,16 8,71 0,16 8,59 0,18 8,59 0,22 2,64 (1,62) (2,50) (1,78) 2,11 (2,58) 3 6,30 0,09 6,44 0,07 6,40 0,18 8,42 0,22 8,74 0,17 8,70 0,20 (1,35) (1,09) (2,84) (2,58) (1,98) (2,27) 4 6,37 0,13 6,28 0,14 6,34 0,17 8,46 0,13 8,58 0,18 8,60 0,18 (1,97) (2,30) (2,65) (1,49) (2,15) (2,11) 5 6,26 0,19 6,49 0,07 6,23 0,11 8,79 0,11 8,62 0,18 8,51 0,15 (2,99) (1,06) (1,71) (1,24) (2,07) (1,77) 6 6,34 0,07 6,22 0,17 6,41 0,17 8,69 0,13 8,87 0,15 8,59 0,17 1,16 (2,71) (2,60) (1,48) (1,71) (2,01) 7 6,47 0,12 6,45 0,17 6,22 0,13 8,73 0,12 8,63 0,14 8,66 0,16 (1,82) (2,58) (2,15) (1,41) (1,61) (1,83) X 6,31 6,36 6,31 8,62 8,66 8,60 DP 0,08 0,09 0,07 0,14 0,10 0,06 (CV%) 1,21 1,44 1,14 1,58 1,11 0,65 Condio 1: Analista 1, Aparelho 1, Laboratrio 1; Condio 2: Analista 2, Aparelho 1, Laboratrio 1; Condio 3: Analista 1; Aparelho 2; Laboratrio 2. Aparelho 1: Ohaus, MB45; Aparelho 2: Metllet Toledo, HB43; Analista 1: 1 autora; Analista 2: colaboradora; Laboratrio 1: Laboratrio de Farmacognosia da UFSC; Laboratrio 2: Laboratrio Farmacutico do Estado de Santa Catarina - LAFESC.
dos operadores durante quase todo o procedimento. Para a determinao do teor de gua em drogas vegetais em estufa, prope-se ento, a realizao da Determinao da perda por dessecao, considerando a anlise concluda quando a diferena entre duas pesagens sucessivas for menor do que 5,0 mg, pois isto signica economia de tempo, energia, mo de obra e quantidade de amostra. Quanto determinao de gua em analisador de umidade, a metodologia proposta, alm de rpida e prtica, mostrou-se exata e precisa, desde que os parmetros de anlise sejam prvia e corretamente estabelecidos. No entanto, a validao da metodologia deve ser feita para cada matria-prima, de modo a conrmar se os parmetros selecionados permitem a obteno de resultados correspondentes aos obtidos atravs das metodologias farmacopicas ociais.

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D.B. Borges, M.R. Farias, C.M.O. Simes, E.P. Schenkel

AGRADECIMENTOS Os autores agradecem ao Laboratrio Farmacutico do Estado de Santa Catarina - LAFESC, por permitir a realizao das anlises referentes reprodutibilidade; Ao Prof. Dr. Maurcio Sedrez dos Reis (Curso de Ps-Graduao em Recursos Genticos Vegetais/UFSC) pelo apoio na anlise estatstica e a Andressa Gazola, como segundo analista e ao CNPq e Funcitec pelo apoio nanceiro atravs do Plano Sul de pesquisa e Ps-Graduao (Processo: 521021/99-5). REFERNCIAS
Berntsson O, Zackrisson G, stling G 1997. Determinations of moisture in hard gelatin capsules using near-infrared spectroscopy: applications to at-line process control of pharmaceutics. J Pharm Biomel Anal 15: 895-900. Bisset NG 1994. Herbal drugs and phytopharmaceuticals: a handbook on a scientic basis. Boca Raton: CRC; Stuttgart: Medpharm Scientic. Brasil, Ministrio da Sade. Determina a publicao da lista de registro simplicado de toterpicos. Resoluo RE, n. 89, de 16 de maro de 2004. Disponvel em: http://www.anvisa .goc.br/legis/index.htm. Acessado em setembro de 2004. De Caro CA, Aichert A, Walter CM 2001. Efcient, precise and fast water determination by the Karl Fischer titration. Food Control 12: 431-436. Farias MR 2003. Avaliao da qualidade de matrias-primas vegetais In: Simes, C.M.O. et al (Org.) 2003. Farmacognosia: da planta ao medicamento. 5.ed. Porto Alegre / Florianpolis: Ed. Universidade UFRGS/ Ed. da UFSC. Farmacopia Brasileira 1988. 4.ed. So Paulo: Atheneu, v.1. Farmacopia Brasileira 2000a. 4.ed. So Paulo: Atheneu, v.1. Farmacopia Brasileira 2000b. 4.ed. So Paulo: Atheneu, v.2. Farmacopia Brasileira 2001. 4.ed. So Paulo: Atheneu, v.2. Farmacopia Brasileira 2002. 4.ed. So Paulo: Atheneu, v.2. Farmacopia Portuguesa 2002. 7.ed. Lisboa: Ministrio da Sade, Instituto Nacional da Farmcia e do Medicamento. v.2. International Conference on Harmonisation (ICH). Validation of analytical procedures: methodology. 1996. Disponvel em: <http://www.ich.org/MediaServer. jser?@_ID=418@_TYPE=MULTIMEDIA&@_ TEMPLATE=616&@_MODE=GLB>. Acessado em janeiro de 2004. Isengard HD 1995. Rapid water determination in foodstuffs. Trends Food Sci Tecnol 6: 155-162. Isengard HD, Frber JM 1999. Hidden parameters of infrared drying for determining low water contents in instant powders. Talanta 50: 239-246. Isengard HD, Schulthei D, Radovic B, Anklam E 2001. Alternatives to ofcial analytical methods used for the water determination in honey. Food Control 12: 459-466. Isengard HD, Frber JM 2003. Water determination in products with high sugar content by infrared drying. Food Chem 82: 161-167.

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