ARMANDO LOPEZ RAMlREZ

CENTRO DE GENETICA FORESTAL

UNIVERSIDAD VERACRUZANA

NOTAS TECNICAS 22
 PRESENTACION

En
el C U ~ ~ ~deV Oloe hongos ha predominado desde siempre un elemento
de misterio, a diferencia de 10s cultivos de otros productoe, talee como 10s fru-
tales o las gramlneas. A mi parecer esto es debido a la dificultad de entender
-por falta de informacibn (aiin en el nivel universitarj.0)- la6 relaciones entre
"lae esporas", "el micelio" y su transformaci6n en estructuras f ~ c t i f i c a n t e e
grandee.
Los hongos cultivadoe han seguido frecuentemente reglas emplricae y
su deearrollo es semejante a1 que se ha llevado a cab0 en el ganado y 10s cerea-
lee por muchos siglos antee del descubrimiento de lae leyes de la herencia o la
fisiologia.
Ee por el10 que solo hasta hace relativamente poco tiempo se ha empe-
zado a comprender en el m i t o cientifico y m6s poco aiin la difusidn del conoci-
miento de, la morfologia, anatomia y algunas propiedades fisioldgicae de 10s hon-
gos bajo cultivo.
Predomina en MBxico aiin el deeconocimiento y una inseguridad en la
manipulacidn de 10s hongos bajo condiciones de laboratorio como es requerido para
10s procedimientos aplicables a1 nivel de planta productiva. Predomina tambit5n
una carencia de conocimientos acerca de 10s parhetros gengticos que ee requieren
para completar el ciclo de vida de 10s hongos bajo condiciones de planta
product iva.
Todavla existe poca cooperacidn entre 10s cientlficos de la invee-
tigacidn b&sica en 6sta Area y eptre aquellos involucrados en el trabajo
productivo aplicado.
Lae tecnicas aqui presentadas son sumamente sencillas, recomendamoe
practicarlas hasta su dominio y a1 mismo tiempo nos suscribimos a sue
consideracionee para la consulta y asesorla en:

Xalapa 91000,Veracruz
Apartado Postal #222

Los esquemas de este manual se deben a la inepiracibn y pluma de mi

colega y amigo el Bidlogo Juventino Garcla Alvarado a quien agradezco su apoyo.
 El hongo se coloca con las
laminillas hacia abajo como se muestra en
el esquema de abajo, d e b clavarse al
papel limpio con un alfiler, evitando que
toque la superficie.

Trate de escoger el hongo con

caracteristicas mas sobresalientes tales
como, tamafio, consistencia, color, forma,
y que no se encuentre deteriorado o defor-
me,adem&s debe de limpiarse previamente
de cualquier adherencia de tierra u otros .
materiales contaminantes, es importante
tambi6n quitarle animales e insectos que
pudieran estar en su superficie,y en caso de que estos estuvieran en el interior del hongo (son
muy frecuentes las larvas de insectos) es mejor descartarlo ya que la intromisidn de insectos
u otros animales conlleva tambidn la introducci6n de bacterias y otros contaminantes.

Las caracteristicas morfoldgicas del h o ~go son una representacidn de sus cualidades
geneticas heredadas de sus progenitores y
muy probablemente tambi6n s e r b transmi-
tidas a sus descendientes por lo que nues-
tra recomendaci6n sobre escoger a 10s hon-
gos con mejores cualidades morfol6gicas
es de vital importancia para asegurar una
descendenciacon caracteristicasdeseables
y deimportancia comercial. Ya desde aqul
estamos llevando a cab0 una selecci6n ge-
ndtica de nuestros materiales biol6gicos.

L 1
&mra2.CIPr.#k,m1Jm+rdp~peld~. Despues de colocar al hongo como
indicamos coloque ahora una caja de car-
t6n s un frasco cubriendo al hongo sin tocarlo para evitar que las corrientes de aire se lleven
a las esporas que son tan diminutas como
milesimas de un milimetro.

Pasados unos 55 minlitos veremos al

quitar el hongo unas rayas blanqueci-
nas,como si se hubieran dibujado las
laminillas de la parte inferior del hongo,
esas son las esporas y podemos tomar un
fragment0 del papel como se observa en el
esquema de la izquierda.
 Cuando colocamos un ejemplar de hongo sobre una hoja de papel limpio y con las lami-
nillas orientadas hacia el papel, despues de unos 50 minutos a 2 horas, las esporas que se
producen en la superficie de las laminillas caer6n por influencia de la gravedad y en grandes
cantidades. de tal manera que podriarnos comparar esto con una lluvia de esporas
microsc6picas. tal y como se ilustra e n las figuras.

Las esporas son tan diminutas y blancas(casi transparentes) que solo son visibles a
nuestros ojos cuando el nlimero de ellas esth
por arriba de 10s 20 millones o m6s y con un
fondo de color contrastante; asi de esta ma-
nera las podemos observar como un polvo
blanquecino a de color crema adherido a la .. ,

superficie del papel.

En u n corte a l o largo del hongo podemos

observar lateralmente como las esporas a ma-
nera de un polvillo blanquecino caen por millo-
nes l o acaso trillones? sobre la superficie del 7
papel y all[ se acumulan y se adhieren debido
a que poseen una sustancia pegajosa.

Debe tenerse cuidado en que el hongo no toque la superficie del papel pu6s existen
bacterias y otras esporas que pueden contaminar la esporada. Una distancia de uno a tres
centimetros entre el papel y el hongo es suficiente para evitar esto. pero es necesario tomar
en cuenta que mhs distancia puede provocar que las coirientes de aire se lleven a las esporas
y estas no caigan en el papel, por lo que se recomienda cubrir el hongo con un frasco o bote
o bien una caja mientras se capturan las esporas.

Por otro lado se recomienda obtener dos esporadas del hongo,es decir que si el hongo es
fresco v estd en buenas condiciones
produci;6 m6s de una esporada.

La prirnera esporada puede estar

contaminada con bacterias y otras
esporas diferentes, por l o que se
sugiere emplear la segunda esporada
que es la mejor.
 Tambien podemos obtener las
esporas del hongo (mejor llamada
"esporada") directamente sobre
agua, hervida previamente y lim-
pia, de un recipiente (este puede
ser un frasco de boca ancha o un
:'+.:-.,.'-,t ; ."" . vaso combn).
-.& ;--. >--
Colocamos el hongo de igual
manera como se muestra en el es-
quema de la izquierda para que de
..estemod0 las esporas se deposi-
ten sobre la superficie del agua
del recipiente.
Las esporas aunque diminutas
podemos observarlas indirectamen-
te pu6s a1 caer en el agua la en-
turbian como si se tratase de un
polvo blanquecino a grisaceo.
EI grado de enturbiamien-
to del agua nos indica la canti-
dad de esporas depositadas en soluci6n en el agua. As1 a mayor
enturbiamiento del agua quiere decir que hay mayor cantidad de
esporas y a menor enturbiamiento obviamente menor cantidad de
esporas; ahora bien que si el agua no se enturbia quiere decir que
o cayeron muy pocas esporas o el hongo.ya no contenia esporas por
ser demasiado viejo. En ambos casos debe descartarse el agua pugs
no nos servird para nuestros prop6sitos.
Podemos dejar las esporas en el agua una hora con la finalidad
de que se humedezcan y esto propicie la germinaci6n de las mismas
y as1 asegurar que produzcan el micelio deseado.
Sabemos que las esporas de Pleurotus ostreatus germinan en unas
6 a 8 horas cuando se encuentran en un medio apropiado, es decir
hbmedo y con una buena temperatura 18-25 grados centigrados y
nutrientes adecuados. Existen otros factores de importancia que
explicaremos mas adelante.
Si dejamos las esporas por mds tiempo estas morirdn pues
recordernos que estos hongos se desarrollan en la superficie de
nuestro planeta y no en el agua ya que no son acuaticos, de tal
manera que demasiado tiempo sumergidas en agua las ahogaria como a
cualquiera de 10s organismos terrestres.
 Ya .que hemos obtenido las esporas del
-- ---. hongo sobre la superficie de un papel limpio
procedemos ahora a cortar con la ayuda de una
',\ navaja un pedazo del papel con esporas, aproxi-
madamente de un centimetro cuadrado, manejan-
dolo con cuidado para no contaminarlo con nues-
tros dedossucios o con las superficies polvosas del
iugar de trabajo, ya que eso podrla dificultar
--_ _ ____-- nuestra labor o perjudicar nuestros resultados.

Colocamos ahora el pedazo de papel en el

interior de un recipiente que contenga agua pre-
viamente hervida, puede ser u n frasco perfecta-
mente lavado y limpio o un vaso con las mismas
carasteristicas como se rnuestra en el esquema de
la izquierda.

Este procedimiento tiene como objetivo humedecer las esporas y al mismo tiempo se-
pararlas del papel al cual se encuentran adheridas (por una sustancia que ellgs segregan
cuando se forman en el hongo).

Con la ayuda de uha cuchara limpia u

otro utensilio semejante debemos sumergir el
fragment0 de papel con esporas en el agua del
recipiente y a1 misrno tiempo agitar gentil-
mente el agua con movirnientos rotatorios sua-
ves con la finalidad de separar a las esporas
del papel como se muestra en el esquema de
la derecha.

Podemos ahora observar que las esporas al

separarse del papel enturbian el agua confi-
riendole una coloracidn blanquecina a lechosa
dependiendo de la cantidad de esporas que se
encuentren en el papel. E n este momento deci-
mos que las esporas se encuentran "en solu-
cibn" .

Podemos almacenar esta solucibn de

esporas en refrigeracidn por algunas horas o en
situaciones extraordinarias por un dia, por un
tiempo mayor las esporas pueden morir.
 Y8 teniendo a las esporas en "dilu-
ci6nwy observando que el agua hervida toma
un aspect0 opalescente a lechoso por la can-
tidad de esporas suspendidas en el agua, to-
mamos el recipiente y vertimos un chorrito
(1 a 2 mili1itros)sobre cada uno de 10s frascos
que contengan semilla de trigo u de sorgo pre-
viamente cocinado y enfriado durante 45 mi-
nutos en una olla Express '.
Esta operacihn debe de efectuarse cer-
ca de la flama de una estufa o cerca de una
ldmpara de alcohol o en el peor de 10s casos .
cerca de la llama de una vela.

Tapamos el frasco con cuidado de no expo-

nerlo demasiado a 10s agentes contaminantes
como son el polvo,la tierra,las manos sucias e
incluso una exposici6n de m6s de 30 segun-
dos al aire.

Como en el caso anterior podemos vertir las esporas

"en soluci6nwdirectamente sobre el sustrato que queremos
emplear para la producci6n de 10s hongos.En este caso em-
pleamos como ejemplo un month de paja la cual ha sido
tratada proviamente con agua caliente y fria,es decir que ha
sufrido una "pasteurizaci6nw casera2. La cantidad vertida
sobre la paja sera mayor que lo recomendado para 10s fras-
cos con semilla, recomendamos aplicar un chorrito equiva-
lente cuando menos a 10s 1 0 0 mililitros de agua con esporas
con la finalidad de obtener resultados satisfactorios. Una
ves vertida la suspensi6n de esporas sobre la paja, se cierra
la bolsa para incubar y esperar 15 dias para ver si se desa-
rroll6 el micelio a partir de las esporas3

COMlTE EDITORIAL: Bid. Armando L6pez R. y Biol. Juventino Garcia A. 1995