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PROGRAMA DE QUIMICA BIOLOGICA METODOLOGIA DE TRABAJO: a) 58 clases tericas de 2 hs cada una con tcnicas expositivas e interrogativas, lectura dirigida

y/o medios audiovisuales. b) 56 trabajos prcticos, la mitad de 2 hs y la otra mitad de 3 hs de duracin a realizar en pequeos grupos con planificacin orientada, trabajo experimental, debate conjunto de los resultados obtenidos, resolucin de problemas y exposicin de bsquedas bibliogrficas, acceso bioinformtico en Internet y prcticas con tutoriales en formato digital. c) Estudios autogestionados: preparacin de Seminarios y Bsqueda Bibliogrfica sobre temas especficos (Total: 14 hs). EVALUACION: 1) En el curso de los trabajos prcticos se efectuar un seguimiento individual del alumno como evaluacin de reajuste para el alumno. 2) Se tomarn tres pruebas parciales escritas con un recuperatorio para cada una, consistentes en cuestionarios y problemas; conjuntamente con la presentacin de la bsqueda bibliogrfica. La condicin de alumno regular se determina con la aprobacin de los parciales y la asistencia (80%). 3) La evaluacin final se har por medio de un examen oral, individual o con un exmen escrito terico prctico previo al oral en el caso de alumnos libres. BIBLIOGRAFIA GENERAL: Se recomendar un libro de texto bsico entre los publicados (disponibles) al comienzo de cada curso y bibliografa alternativa y complementaria. Textos bsicos: - Lehninger, A.L., Nelson, D.L., Cox, M.M. Principios de Bioqumica. - Stryer, L. Bioqumica. Revert, Barcelona. Bibliografa complementaria: - Dixon, M., Webb, E.C. Enzymes. 3rd. ed. Academic Press, New York, 1979. - Rawn, J.D. Bioqumica. Interamericana, Madrid, 1989 (Tomos I y II). - Metzler, D.E. Biochemistry. Academic Press, New York, 1977. - Devlin, T.M., ed. Textbook of Biochemistry. 2nd. ed. John Wiley & Sons, Singapore, 1986. CONTENIDOS Tema 1. Concepto de Bioqumica. Papel de la investigacin cientfica en el desarrollo de la Bioqumica. Concepto de Bioenergtica. Flujo de materia y energa en la biosfera y en la clula. Introduccin al estudio del metabolismo intermedio. Los seres vivos como sistemas metablicos abiertos: aproximaciones experimentales para su estudio. Niveles de organizacin, alteraciones metablicas. Organizacin intracelular y funcin. Anabolismo, catabolismo, vas anaplerticas y anfiblicas. Control metablico. Tema 2. Aminocidos: estructura, clasificacin y propiedades. Pptidos: estructura y purificacin. Pptidos naturales, clasificacin. Secuenciacin. Sntesis peptdica.

Protenas: clasificacin, estructuras primaria, secundaria, supersecundaria, terciaria y cuaternaria. Propiedades de las protenas, mtodos de separacin, mtodos analticos de cuantificacin, criterios de pureza, determinacin de PM y evolucin de las protenas. Tema 3. Enzimologa. Clasificacin. Apoenzimas y cofactores. Definiciones termodinmicas. Interacciones sustrato-enzima. Especificidad de reaccin. Sitio activo. Curso de la reaccin enzimtica. Intermediarios. Complejo enzima-sustrato. Mecanismos de catlisis. Efecto de concentracin, catlisis cido-base, catlisis covalente. Grupos especficos que contribuyen a la catlisis. Cintica enzimtica. Efecto de la concentracin de sustrato sobre la velocidad de reaccin. Velocidad inicial. Linealidad en funcin del tiempo y de la concentracin de enzima. Aproximacin de equilibrio rpido y de estado estacionario. Ecuacin de Michaeles-Menten. Km y Vmax. Mtodos de linealizacin de la ecuacin de MichaelesMenten. Purificacin de enzimas. Velocidad especfica. Rendimiento y purificacin. Indice de recambio. Unidades enzimticas. Desviaciones de la ecuacin de MichaelesMenten. Cooperatividad. Ecuacin de Hill. Inhibidores. Inhibidores irreversibles y reversibles, completos y parciales. Inhibidores reversibles completos: competitivo, no competitivo, acompetitivo y mixto. Caracterizacin y determinacin de constantes de inhibicin. Grficos primarios, secundarios y de Dixon. Efecto del pH. Efectos reversibles e irreversibles. Diferenciacin. Efecto sobre enzima libre o sobre complejo enzima sustrato. Efecto sobre el sustrato. Modificacin de Km y Vmax. Grupos de la enzima implicados. Determinacin de la Ka del o los grupos implicados. Efecto de la temperatura. Efectos reversibles e irreversibles. Diferenciacin. Determinacin dela Energa de Activacin. Ecuacin de Arrhenius. Activadores. Activadores esenciales y no esenciales. Criterios para determinacin del mecanismo. Efecto inespecfico de iones. Sistemas BI-BI. Mecanismos secuenciales y ping-pong. Diferenciacin entre distintos mecanismos. Determinacin de los parmetros cinticos. Grficos primarios y secundarios. Regulacin de la actividad enzimtica. Regulacin alostrica. Efecto homotrpico y heterotrpico. Regulacin por modificacin covalente: fosforilacin, adenilacin, formacin puentes disulfuro. Represin e induccin de genes. Aplicacin a vas metablicas. Cofactores. Coenzimas y grupos prostticos. Vitaminas. Nucletidos como cofactores: Distintas rupturas del ATP. Coenzimas transferidoras de hidrgeno. NAD y NADP. FMN y FAD. Funcin biolgica. Mecanismos de reaccin. Potenciales de reduccin. Ejemplos. Propiedades espectrofotomtricas. Coenzima A. Estructura y funcin. Ejemplos. Otras protenas transportadoras de grupos acilo. Biotina. Mecanismo de reaccin. Carboxilasas y transcarboxilasas. Tiamina pirofosfato. Reacciones enzimticas que involucran tiamina. Piridoxal fosfato y piridoxamina fosfato. Funcin general. Reacciones de transaminacin, racemizacin y decarboxilacin.

Tetrahidrofolato. Transferencia de unidades de un carbono. Vitamina B12. Reacciones en las que participa. Tema 4 Hidratos de Carbono. Definicin, estructuras, clasificacin, propiedades, funciones y distribucin biolgica. Oligosacridos, Homo- y Hetero polisacridos: estructuras, clasificacin, propiedades y funciones. Gliclisis y catabolismo de hexosas. Etapas de la gliclisis. Rendimiento energtico. Enzimas implicadas: ubicacin subcelular, propiedades, mecanismos de catlisis, complejos multienzimticos. Fosforilacin a nivel de sustrato. Importancia de los intermediarios. Formacin de 2,3 bisfosfoglicerato. Puntos de regulacin de la va. Regulacin alostrica y por modificacin covalente: hexoquinasa, fosfofructoquinasa I y piruvato quinasa. Hidrlisis de disacridos. Enzimas implicadas. Catabolismo de las diferentes hexosas: fructosa, manosa. Metabolismo de la galactosa. Nuclesido-difosfo-azcares. Destinos del piruvato. Fermentacin y respiracin. Rendimiento energtico. Efecto Pasteur. Fermentacin lctica y alcohlica. Otros ejemplos de fermentaciones. Tema 5. Ciclo de los cidos tricarboxlicos. Estructura de la mitocondria. Transportadores. Complejo de la piruvato deshidrogenasa. Ubicacin sub-celular. Enzimas que lo conforman. Cofactores que participan. Enzimas implicadas en el ciclo de los cidos tricarboxlicos: ubicacin subcelular, propiedades, mecanismos de catlisis, estereoespecificidad de las reacciones. Isoenzimas. Fosforilacin a nivel de sustrato. Destino de los cofactores reducidos. Balance energtico. Regulacin alostrica y por modificacin covalente. Vas anaplerticas y reacciones que consumen intermediarios del ciclo de Krebs. Tema 6. Ciclo del glioxilato. Enzimas participantes. Localizacin. Funcin. Regulacin coordinada con el ciclo de los cidos tricarboxlicos en bacterias. Importancia en plntulas en germinacin. Ruta de las pentosas fosfato. Etapas. Funcin. Enzimas implicadas: ubicacin subcelular, propiedades, mecanismos de catlisis. Distintas estequiometras dependiendo de la necesidad celular. Regulacin de la va. Gluconeognesis. Importancia. Organos implicados. Enzimas participantes: ubicacin subcelular, propiedades, mecanismos de catlisis, complejos multienzimticos. Precursores de la glucosa. Ciclo de Cori. Puntos de regulacin de la va. Regulacin alostrica y por modificacin covalente. Regulacin coordinada de la glicolisis y la gluconeognesis. Accin del glucagon, adrenalina e insulina. Metabolismo del glucgeno. Glucgeno: estructura y localizacin. Degradacin: glucgeno fosforilasa y enzimas desramificantes. Regulacin alostrica y por modificacin covalente. Regulacin diferencial en hgado y msculo. Sntesis: Participacin de los nuclesido-difosfo-azcares. Glucgeno sintasa y enzimas ramificantes. Glucogenina. Regulacin coordinada con la glucogenolisis. Otros polmeros de glucosa: almidn. Integracin del metabolismo de hidratos de carbono. Metabolismo especfico de tejido: hgado, msculo, cerebro. Bases bioqumicas de la diferenciacin. Regulacin

hormonal coordinada y enzimas claves. Tema 7. Lpidos. Definicin. Nomenclatura. Clasificacin, estructura, funcin y distribucin de los distintos tipos de lpidos. Membranas biolgicas: estructura, composicin y propiedades. Membranas artificiales: obtencin, propiedades y aplicaciones. Degradacin metablica de los lpidos: hidrlisis de los triacilgliceroles por lipasas dependiente de AMP. Degradacin de los cidos grasos por la remocin secuencial de fragmentos de 2 carbonos ( oxidacin). Otras formas de degradacin: - y oxidacin. Degradacin de cidos grasos saturados e insaturados y de nmero par e impar de carbonos. Degradacin mitocondrial y microsomal de los cidos grasos, similitudes y diferencias. Rendimiento energtico de la oxidacin de los cidos grasos. Cuerpos cetnicos: su formacin, funcin y caractersticas. Sntesis de cidos grasos: formacin de malonil-CoA, rol del ACP, ciclo de elongacin y estequeometra de la sntesis de cidos grasos. Estudio de las enzimas que participan en la biosntesis de cidos grasos, complejo multienzimtico. Descripcin de las enzimas accesorias requeridas para la elongacin e insaturacin de cidos grasos. Control de la sntesis de cidos grasos. Biosntesis de fosfolpidos y triacilgliceroles, rol del fosfatidato. Rol del CDPdiacilglicerol en la formacin de fosfoglicridos. Anlisis de las distintas vas de sntesis de los fosfolpidos. Sntesis de ceramida, la unidad bsica para la formacin de esfingolpidos. Sntesis de esfingolpidos y ganglisidos. Sntesis de colesterol, descripcin de los principales intermediarios y reacciones. Formacin de cidos biliares. Formacin de hormonas esteroideas a partir del colesterol. Tema 8. Oxidaciones biolgicas. Dehidrogenacin. Potencial redox y energa libre. Sistemas redox biolgicos. Oxidasas, oxigenasas y oxidoreductasas. Dehidrogenasas dependientes de nucletidos de nicotinamida, flavoprotenas y cuproprotenas. Ferrosulfoprotenas. Quinonas. Citocromos. La cadena respiratoria. Localizacin en mitocondrias. Fraccionamiento en complejos. Descripcin y mecanismo de las enzimas y coenzimas que intervienen. Inhibidores de la cadena respiratoria. Respiracin en bacterias. Fosforilacin oxidativa. Concepto. Estequiometra. Indice P/O: su determinacin. Control respiratorio. Desacoplantes e inhibidores de la fosforilacin. Estados metablicos mitocondriales. Mecanismo de la fosforilacin oxidativa: teora quimiosmtica. La protn ATPasa. Utilizacin de los componentes de alta energa. Transporte inico mitocondrial y antibiticos ionoforticos. Fosforilacin oxidativa en bacterias. Fotosntesis. Definicin y ecuacin general. Localizacin del proceso fotosinttico, cloroplastos y cromoplastos. Fases del proceso fotosinttico. Estructura y funcin de las clorofilas y pigmentos accesorios. Eventos primarios de la fotosntesis. Fotosistemas. Centros de reaccin. Transporte fotosinttico de electrones. Fotlisis del agua y generacin de NADPH. Fotofosforilacin, mecanismo. Desacoplantes e inhibidores Caractersticas del complejo CF0-CF1. Asimilacin fotosinttica del carbono. Ciclo reductivo de las pentosas fosforiladas, descripcin de la va, anlisis de los distintos componentes y su regulacin. Vas auxiliares para la asimilacin del carbono atmosfrico, plantas C4, plantas CAM e intermediarias, anlisis de las distintas vas de fijacin de CO2. Fotorespiracin.

Tema 9. Metabolismo de aminocidos y otros compuestos nitrogenados: Ciclo del nitrgeno: fijacin biolgica de nitrgeno (fijadores libres, asociativos y simbiticos), reaccin y mecanismo de la nitrogenasa, nitrificacin y desnitrificacin del suelo. Conversin de nitrato y nitrito en amonio y su incorporacin a compuestos orgnicos. Degradacin de protenas. Metabolismo central de aminocidos (rol de glutamato deshidrogenasa y transaminasas). Otras reacciones de desaminacin y reacciones de decarboxilacin. Degradacin del esqueleto carbonado de los aminocidos. Formas de excrecin del nitrgeno (amoniotlicos, ureotlicos y uricotlicos). Ciclo de la urea y su interconexin con el ciclo de Krebs. Ciclo de la glucosa-alanina. Degradacin de los aminocidos aromticos y la formacin de compuestos relacionados. Biosntesis de aminocidos no esenciales. Ciclo del metilo activo. Biosntesis de otros compuestos nitrogenados relacionados. Tema 10. Nucletidos. Estructura y clasificacin. Biosntesis y degradacin de bases pricas y pirimidnicas y su regulacin. Formacin de cido rico. Recuperacin de bases provenientes de la ingesta o de la degradacin de cidos nucleicos endgenos. Sntesis de d-NTP. Sntesis de d-TTP y su inhibicin por frmacos (quimioterapia). Tema 11. Acidos nucleicos. Las unidades monomricas: bases, nuclesidos, nucletidos. Estructura y propiedades del DNA. Estructura y propiedades del RNA. DNA e informacin gentica. Principio transformante. Reglas de Chargaff. Modelo de Watson y Crick. Experiencias y determinaciones que apoyan el modelo de Watson y Crick. Acidos nucleicos de doble cadena y de cadena simple. Desnaturalizacin del DNA. Hidrlisis qumica y enzimtica del DNA y del RNA. Biosntesis de cidos nucleicos. Replicacin: DNA polimerasas, DNA ligasa, RNA replicasa, transcriptasa inversa. Transcripcin: RNA polimerasa. Polinucletido fosforilasa. Tema 12. Cdigo gentico: Caractersticas generales, universalidad, degeneracin y ambigedad. Pruebas experimentales. Evolucin del cdigo. Biosntesis proteica. Generalidades. Papel del RNA de transferencia, RNA mensajero y RNA ribosomal. Etapas de la biosntesis: activacin de los aminocidos, iniciacin, elongacin y terminacin. Modificaciones postransduccionales. Inhibidores de la biosntesis proteica. Destino de las protenas, destruccin programada. TEMAS A DESARROLLAR EN LOS TRABAJOS PRACTICOS 1.- Bsqueda bibliogrfica. Introduccin. Laboratorio: Manejo de bases de datos. Acceso bioinformtico en Internet. Preparacin y presentacin de una monografa sobre temas sugeridos. (2 sesiones) 2.- Pptidos y protenas. Laboratorio: Cuantificacin, separacin, purificacin, criterios de pureza. Resolucin de problemas prcticos. (7 sesiones) 3.- Enzimologa. Laboratorio: Determinacin de actividad enzimtica, parmetros cinticos, inhibidores, efecto de pH y temperatura. Resolucin de problemas

prcticos. (12 sesiones) 4.- Hidratos de carbono. Laboratorio: Cuantificacin e identificacin. Resolucin de problemas prcticos. (3 sesiones) 5.- Metabolismo de hidratos de carbono. Laboratorio: Efecto de diferentes compuestos sobre el consumo de glucosa por la va glucoltica. Resolucin de problemas prcticos. (7 sesiones) 6.- Lpidos. Laboratorio: Cuantificacin, identificacin y cromatografa. Resolucin de problemas prcticos. (4 sesiones) 7.- Respiracin mitocondrial. Laboratorio: Transporte de electrones mitocondrial. Efecto de inhibidores y desacoplantes. Resolucin de problemas prcticos. (6 sesiones) 8.- Fotosntesis. Laboratorio: Transporte de electrones y medida de la actividad de enzimas fotosintticas en plantas C3 y C4. Resolucin de problemas prcticos. (6 sesiones) 9.- Metabolismo de compuestos nitrogenados. Laboratorio: Determinacin de aminocidos en distintos tejidos. Resolucin de problemas prcticos. (4 sesiones) 10.- Acidos nucleicos. Laboratorio: Extraccin y cuantificacin de ADN. Electroforesis y determinacin de la temperatura de fusin. Resolucin de problemas prcticos. (5 sesiones)

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