You are on page 1of 19

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

7.2 Tehnici spectrometrice (spectrometria de absorbie/emisie atomic cu flacr, FAAS, GF-AAS, FEAS). Teoria spectroscopiei atomice. Cnd o prob este atomizat, prin oricare surs de atomizare, o bun parte a constituenilor moleculelor sunt adui n stare de atomi gazoi. n funcie de timp i de tipul de atomizor, o parte din compui pot trece n stare ionic, lucru nedorit deoarece n final se obine un spectru al atomilor i ionilor excitai. n general spectrele atomilor sunt formate din linii apropiate, care rezult n urma tranziiilor electronilor exteriori pe nivele energetice superioare (absorbie) sau revenirea n stare fundamental (emisie). Datorit unor condiii de atomizare constante i energia care ajut la tranziia electronilor este i ea constant i n consecin tranziiile care au loc sunt aceleai. Prin urmare i spectrul atomului analizat, efectuat n aceleai condiii va avea permanent acelai aspect, respectiv aceleai valori de lungimi de und la care apar liniile caracteristice. Din acest motiv spectrele atomilor i al moleculelor pot fi considerate o constant caracteristic fiecrui substrat chimic analizat. Diagrama de nivel energetic pentru atomul de Na (Figura 1) poate s explice n mod convenabil tranziiile electronilor exteriori responsabili de apariia spectrului atomic. La temperatura mediului ambiant un atom se gsete n stare fundamental:

Figura 1. Diagrama de nivel energetic pentru atomul de Na.

n diagram sunt ilustrate civa orbitali atomici ai atomului de Na, care include i gradul de degenerare a lor, de exemplu a celor de tip p, datorit diferenelor energetice care pot apare ca urmare a micrii de rotaie a electronului n jurul propriei axe i micarea electronilor pe orbit. n cazul cnd aceste micri sun n acelai sens cu sensul cmpului magnetic, aceste micri se resping iar cnd sunt de sens pus, se atrag. Astfel, energia electronului al crui spin este opus n raport cu micarea propriului orbital, va fi mai mic dect n situaia n care sensul spinului este de acelai sens cu micarea orbital. Diferenele care apar sunt foarte mici pentru orbitalii de tip p n schimb ele devin semnificative pentru electronii din orbitalii d i f. Aceste scindri sunt caracteristice tuturor speciilor care conin un electron de valen. n cazul n care un atom posed doi electroni de valen, atunci scindarea orbitalilor este mult mai complicat iar spinul ionului este mult diferit fat de cel al atomului din care provine. Acesta se explic prin apariia strilor de singlet sau triplet. Cu ct numrul de electroni de valen crete i diagrama nivelelor energetice se complic deoarece strile de singlet sau triplet pot s apar scindate (Figura 2). n aceste situaii interpretarea diagramelor de nivel energetic pentru atomii respectivi se complic, n comparaie cu diagramele corespunztoare atomilor cu un singur electron de valen, fapt
Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU Lector Dr. Cecilia ARSENE Notie curs 09+10 1

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

ce se reflect i n numrul mult mai mare de linii, care pot s apar n spectrul atomic caracteristic.

Figura 2. Diagramele nivelelor energetice pentru atomul de Mg (strile de singlet sau triplet pot s apar scindate).

Spectrele atomice de emisie. La temperatura camerei toi atomii probei sunt n stare fundamental (Na este n starea 3s). Excitarea atomilor de Na se poate realiza cu ajutorul flcrii, arcului electric, etc. Timpul de via al atomului excitat este foarte scurt, iar la revenire se emite o radiaie luminoas. La revenirea de pe 3p pe 3s apar dou linii foarte intense al cror spectru de emisie se nregistreaz la lungimile de und cuprinse ntre 589-589,6 nm. Cele dou linii sunt cele mai intense din spectrul atomic al Na i sunt utilizate n scopuri analitice. Spectrul de emisie al Na mai prezint o serie de linii n jurul valorilor de lungimi de und cuprins ntre 568,2-568,6 nm care au o intensitate mai mic i care se folosesc mai puin n scopuri analitice. De cele mai multe ori liniile cele mai intense i a cror intensitate scad atunci cnd se fac diluii foarte mari, sunt considerate linii analitice utilizate pentru identificarea unui atom i permit unele aproximri semi-cantitative. Energiile fotonilor emii vor fi de valoare egal cu cea a fotonilor absorbii. Tranziia se face pn la primul nivel energetic excitat iar procesul de emisie va readuce sistemul (atomul) pe nivelul energetic fundamental (Figura 3). Cnd tranziiile au loc pn la primul nivel energetic, se obin liniile de rezonan liniile cele mai intense din spectru i folosite n analizele calitative i semi-cantitative. n afar de aceste linii, n spectrul atomic mai apar i alte linii, de intensitate mult mai mic, datorate tranziiilor pe nivele energetice superioare primului nivel energetic excitat. Aceste linii pot fi folosite n analiza chimic, numindu-se i linii analitice. E2

E1 he emisie
Figura 3. Tranziia de rezonan.

absorbtie ha

Ea=Ee a=e E0

Caracteristicile spectrelor atomice de absorbie.

Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

Lector Dr. Cecilia ARSENE

Notie curs 09+10 2

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

Atomii gazoi la o temperatur ridicat, creat de o surs de excitare atomic, absorb radiaii cu lungimi de und caracteristice tranziiilor de pe nivelul fundamental pe nivele superioare din punct de vedere energetic. Din diagrama nivelelor energetice (Figura 4) i spectrul de emisie (Figura 5) se poate observa faptul c liniile caracteristice pentru atomul de H din domeniul vizibil sunt cele pentru tranziiile de pe 1s pe 2p, 3p i 4p

Figura 4. Diagrama nivelelor energetice ale atomului de hidrogen.

410,1 nm

434,0 nm 486,1 nm 656,3 nm

Figura 5. Spectrul de absorbie al atomului de hidrogen din regiunea vizibil.

Ca i pentru spectrele tipic de emisie i spectrele de absorbie sunt caracterizate de linii de rezonan. Spectrele de fluorescen atomic. Atomii n flacr pot produce fluorescen prin iradierea cu o surs care emite radiaii cu lungimi de und care pot fi absorbite de ctre atomi. Fluorescena se msoar de obicei sub un unghi de 90 de grade ( in mod identic ca la spectroscopia molecular), fa de direcia sursei. Fluorescena poate fi de mai multe tipuri: 1. De rezonan tranziiile se fac de pe starea fundamental pe starea energetic cea mai de jos a nivelului excitat, iar fluorescen presupune revenirea la aceeai stare fundamental.
E1 he emisie Ea=Ee a=e E0

absorbtie ha

Figura 6. Fluorescena de rezonan. 2. Direct presupune setul de procese: absorbie, fluorescen, relaxare.

Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

Lector Dr. Cecilia ARSENE

Notie curs 09+10 3

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

E1 he emisie haabsorbtie Ea>Ee a<e

relaxare E0 Figura 7. Fluorescena direct. 3. n trepte - are loc dup urmtorul procedeu: absorbie, relaxare, fluorescen. E1 absorbtie ha E0 Figura 8. Fluorescena n trepte. 4. Mixt presupune o combinare ntre tipurile de mai sus. n practic s-a observat faptul c cea mai des ntlnit form de fluorescen este cea de rezonan. he emisie relaxare Ea>Ee a<e

Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

Lector Dr. Cecilia ARSENE

Notie curs 09+10 4

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

Aparatura utilizat n spectroscopia optic atomic. Schemele bloc ale aparaturii folosite n spectroscopia optic atomic:
lentila Sursa detector

EMISIE

O opturator

M monocromator

I inregistrator

flacara/atomizor Sursa

detector

ABSORBIE

O F opturator Sursa S O F opturator

M monocromator flacara/atomizor M 90 o

I inregistrator

monocromator

FLUORESCEN
D detector

inregistrator

Spectrofotometria de flacr - FLAMFOTOMETRIA Spectrofotometria de flacr, sau flamfotometria, are la baz emisia rezultat la excitarea atomilor cu ajutorul flcrii. Fiind o metod de spectral, denumirea generic a instrumentului este cunoscut sub numele de flamfotometru sau/i flamspectrometru. Ca n toate metodele optice atomice (de emisie sau absorbie) dou componente sunt foarte importante, care le difereniaz de celelalte tipuri de spectrometre. Primul este pulverizatorul componenta care aduce proba n stare de aerosoli i o disperseaz n flacr, pentru a facilita o atomizare mai rapid i eficient. Al doilea component este flacr nsi, care are n primul rnd rolul de atomizare a probei i n cazul spectrometriei de emisie i rol de surs de excitare a atomilor formai. Flamfotometria, sau spectrometria n flacr de emisie atomic, urmrete cinici mari pai: 1. Eliberarea compusului de analizat n flacr i atomizarea lui 2. Producerea tranziiilor spectrale 3. Izolarea i localizarea liniilor spectrale obinute 4. Stabilirea creterii i/sau descreterii intensitii liniilor spectrale 5. nregistrarea datelor. Flacra. Din punct de vederea spectral flacra este o surs termic cu o temperatur cuprins n intervalul 1500-3100 oC. Energia flcrii, este o energie slab, i este utilizat doar pentru elementele al cror potenial de ionizare este sczut. Principial flacra este realizat prin amestecul i arderea a cel puin dou gaze (Tabelul 1.):
Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU Lector Dr. Cecilia ARSENE Notie curs 09+10 5

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

a) Gazul care arde carburantul b) Gazul care ntreine arderea gazul oxidant comburant. Tabelul 1. Tipuri de gaze utilizate la obinerea flcrii. Carburant Comburant Posibilele reacii Hidrogen Oxigen H2 + 1/2O2 H2O Aer H2 + 1/2O2 + 2 N2 H2O + 2N2 Propan Oxigen C3H8 + 5O2 3CO2 + 4H2O Aer C3H8 + 5O2 +20N2 3CO2 + 4H2O + 20N2 Butan Oxigen C4H10 + 13/2O2 4CO2 + 5H2O Aer C3H8 + 13/2O2 +26N2 4CO2 + 5H2O + 26N2 Acetilena Oxigen C2H2 + O2 2CO + H2 Aer C2H2 + O2 +4N2 2CO + H2 + 4N2 Temperatura (oC) 2660 2045 2850 1925 2900 1895 3100 2325

Structura flcrii (Figura 9). Analiza spectral n flacr este funcie de natura flcrii i de procesele care au loc n fiecare zon a acesteia. n principiu se pot distinge patru mari zone (zone principale) i una care este atribuit zonei de amestecare a celor dou gaze ( zona A din figura 9). Figura 9. Structura unei flcrii laminare. A- Zona de amestecare a gazelor B- Zona de prenclzire C- Zona preliminar de combustie ( conul albastru al flcrii) D- Zona interconic sau zona alb E- Conul exterior sau zona secundar de combustie flacr laminar - liniile de curgere a gazelor sunt aproximativ paralele, cu schimburi lente n timp i spaiu. n zona A (zona de amestecare) se introduce i proba care ajunge sub form de aerosoli n zona B unde gazele sunt nclzite printr-o form de energie provenit din zona C. Gazele traverseaz zona de combustie cu o vitez cuprins ntre 1-10 m/s, iar cnd ajung n zona C ele sunt constituite n majoritate din CO2, CO, H2O, N2 ( dac se utilizeaz aerul ca i comburant). Se pot ntlnii urme slabe de H2, O atomic, radicali HO, NO, NO2. Tot n zona C, concentraia n specii precum CH, H3O+, HCO+ este foarte ridicat, fapt ce conduce la imposibilitatea atingerii unui echilibru termic. Acest fapt conduce la creterea zgomotului n detector. Cnd gazele ajung n zona D, se atinge i echilibru termic. Din punct de vedere al valorii temperaturii, regiunea este mai rece i mai oxidant, dect regiunea C, iar arderea devine complet n ultima regiune E, datorit aerului din exteriorul flcrii. Pentru spectrometria atomic cea mai favorabil zon este zona D. Temperatura este suficient pentru atomizare ct i pentru excitarea speciilor atomice care au un potenial de ionizare sczut. Din punct de vedere tehnic, temperatura flcrii se poate regla din raportul carburant/comburant. Pe de alt parte o temperatur mult prea mare a flcrii ar putea genera ionizarea probei, fapt nedorit, pentru ca rezultatul ar fi analiza spectral a ionilor i nu a atomilor. Pentru a prentmpina astfel de situaii, se pot introduce n flacr, aa numitele tampoane de ionizare, adic un element uor ionizabil, care s suprime ionizarea probei.

Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

Lector Dr. Cecilia ARSENE

Notie curs 09+10 6

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

Procese n flacr. Principalele procese n flacr sunt prezentate n Figura 10.


M +X
+ -

solutie 1 absorbtie si emisie atomica aerosol solid M X


+ -

MO MOH etc.

absorbtie emisie

MO* MOH* etc

5 absorbtie emisie

MX gaz

M atom in stare gazoasa

M* atom in stare gazoasa

absorbtie

emisie

7 absorbtie emisie

* stare excitata 1 evaporare solvent 2 sublimare sare 3 disociere 4 ionizare 5 reactie secundara 6 descompunere 7 recombinare

MX*

M +e

M *

Figura 10. Principalele procese n flacr. Pulverizatoarele (Figura 11). Asigur o dispersie ct mai bun a probelor de analizat sub form de aerosoli.

Figura 11. Schema de principiu a unui pulverizator

Atomizoarele: Rolul acestora este de a aduce proba n stare de atomi. Atomizoarele pot fi: A- cu flacr - care poate fi laminar sau turbulent. Un exemplu, schematic, de atomizor laminar utilizat n spectrometria optic atomic este prezentat n Figura 12. B- cu cuptor electrotermal (din grafit). Un exemplu, schematic, al unui cuptor de grafit utilizat n spectroscopia optic atomic este prezentat n Figura 13.
Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU Lector Dr. Cecilia ARSENE Notie curs 09+10 7

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

Figura 12. Prezentarea schematic a unui atomizor cu flacr laminar.

Figura 13. Prezentarea schematic a unui cuptor electrotermal.

Cuptorul este un tub de grafit care prezint un orificiu central, prin care se introduce proba n stare lichid sau solid. Dimensiunile tubului de grafit sunt de cca 5 cm lungime i un diametru de 1,5 cm. Temperatura cuptorului se regleaz n funcie de temperatura de lucru necesar. Prin interiorul tubului circul un gaz inert (de regul azot), care are urmtorul rol: 1. previne depunerea vaporilor de ap pe pereii tubului. 2. Contribuire la eliminarea produilor rezultai n urma atomizrii. 3. Previne intrarea aerului n cuptor. Cuptor de grafit este nclzit uniform prin nclzire transversal sau echivalent, cu ajutorul unor rezistene electrice, temperatur care poate fi controlat i programat n pai ct mai mici. Atomizoarele cu cuptorul de grafit pot ajunge la o temperatur, n interior, de 3000 0C. Spre deosebire de atomizoarele cu flacr, cele cu cuptor electrotermal pot fi folosite i la analiza probelor solide. Aceste tipuri de atomizoare se folosesc de regula n spectrometria de absorbie atomic, fiind caracterizate de o sensibilitate mult mai nalt, utiliznd i cantiti mici de prob fr o tratare suplimentar a probelor. Influena temperaturii asupra absorbiei, emisie i fluorescenei. Toate aceste tipuri de analiz sunt direct influenate de temperatura flcrii, dar n mod special emisia, deoarece temperatura flcrii are un efect semnificativ asupra raportului dintre numrul atomilor excitai i neexcitai. Relaia dintre numrul de atomi excitai, N1, i cei aflai n stare fundamental, N0, este cunoscut sub denumirea de ecuaia lui Boltzmann i se poate scrie: E N1 P1 = e kT (1) N 0 P0 unde: N1 este numrul de atomi n stare excitat pe nivelul 1,
Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU Lector Dr. Cecilia ARSENE Notie curs 09+10 8

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

N0 numrul de atomi aflai n stare fundamental, P1/P0 reprezint raportul ponderilor statistice pentru starea excitat respectiv fundamental, mrimi ce depind de numerele cuantice ale nivelelor existente n fiecare atom n parte, E = h variaia de energie a tranziiei, k 1,38 10-23 J/K, constanta lui Boltzmann T temperatura absolut n K. n mod obinuit raportul N1/N0 este subunitar. Se poate observa c N1/N0 depinde att de E ct i de T. O cretere a temperaturii i o scdere a valorii intervalului energetic, E, va conduce implicit la o mrire a raportului N1/N0. Calculele demonstreaz c, n cele mai favorabile condiii, doar o mic parte din atomi se gsesc n stare excitat, lucru vizibil i din datele prezentate n tabelul 2, pentru cteva linii de rezonan tipice. Din acest punct de vedere, absorbia i fluorescena, teoretic, depind mai puin de temperatura flcrii, deoarece ambele tipuri de msurtori se realizeaz cu atomi iniiali neexcitai. n schimb fluctuaiile n temperatura flcrii pot afecta absorbia i fluorescena prin alte modaliti: a. Creterea temperaturi, conduce la creterea eficacitii procesului de atomizare, implicit la creterea numrului de atomi din flacr. b. Creterea temperaturii poate conduce la descreterea nlimii picului, practic la descreterea intensitii benzii de absorbie datorat creterii numrului de atomi din flacr i mobilitii acestora. Creterea concentraiei speciilor gazoase la temperatur ridicat duce la lrgirea benzii de absorbie datorat creterii gardului de ionizare a compusului de analizat i implicit a celor neionizai. Raportul mare al atomilor neexcitai face ca absorbia i fluorescena s aib o sensibilitate mai nalt fa de emisie. Tabelul 2. Raportul dintre numrul de atomi din strile excitat, N1, respectiv fundamental, N0, la dou temperaturi, 2000 K, respectiv 4000 K. Element Na K Y E (eV) 2,1 2,93 5,97 Lungime de unda (nm) 589,0 422,7 213,9 N1/N0 2000 K 9,8610 1,9110-6 7,3110-6
-6

4000 K 4,4410-3 6,0310-3 1,4810-4

Spectroscopia de absorbie atomic Metoda analizei prin absorbie atomic (AA), introdus n analiza chimic din anul 1952 de ctre australianul Sir Alan Walsh, se bazeaz pe fenomenul cunoscut cu aproape o sut de ani nainte (1859), descoperit de germanul Gustav Robert Kirchhoff i anume inversia liniilor spectrale. Principiul, stabilit pe baze experimentale, se poate enuna sub form de lege fizic (legea lui Kirchhoff) astfel: fiecare element chimic absoarbe acele radiaii pe care le poate emite n aceleai condiii, bine determinate, de temperatur i presiune. Primul instrument folosit a fost o improvizaie pentru a se obine absorbia atomic n cadrul unui fotometru cu flacr (un spectrometru de emisie n care excitarea atomilor se realizeaz ntr-o flacr). Acesta, ca i celelalte instrumente care au urmat, msoar concentraia unui element dintr-o prob, prin determinarea absorbiei realizate de ctre
Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU Lector Dr. Cecilia ARSENE Notie curs 09+10 9

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

atomii probei, adui ntr-o flacr sau, mai general, n faz gazoas (la o temperatur suficient de ridicat) asupra unei radiaii monocromatice furnizate de o surs extern. Radiaia respectiv este astfel aleas nct s fie caracteristic unui anumit atom. Spectrometrul de absorbie atomic msoar radiaia absorbit de atomii care rmn n stare fundamental (neexcitai) n stare gazoas. Spectrometria de absorbie atomic (AAS atomic absobtion spectrometry) este o metod foarte sensibil (poate determina cantiti de ordinul ppb) i are aplicabilitate n numeroase arii: analize clinice (analiza de metale n lichidele biologice snge, urin etc.), analize de mediu (analiza unor elemente din ape, aer, sol, petrol etc.), procese farmaceutice (determinarea concentraiei n produsul final a unor metale folosite drept catalizatori n cadrul proceselor de fabricaie), industrie (verificarea produselor industriale n vederea determinrii concentraiei de metale grele), minerit (determinarea concentraiei aurului n diverse roci pentru a estima dac extracia acestuia este rentabil) etc. Principiul metodei Ionii din soluia de analizat, prin pulverizare (sau nebulizare) ptrund o dat cu gazul purttor ntr-o zon cu temperatura ridicat i devin atomi. Acetia trebuie adui ntro stare energetic potrivit n vederea favorizrii absorbiei i reducerii la minim a emisiei. Acest lucru se realizeaz la temperaturi cuprinse n domeniul 2000-3000K. Procesul prin care proba este convertit n vapori de atomi poart numele de atomizare. Atomizarea poate fi de 3 tipuri: in flacr; electrotermal (n cuptoare de grafit); n plasm. Des ntlnit n practic este atomizarea n flacr. La aspirarea soluiei ntr-o flacr se petrec, ntr-o succesiune rapid, urmtoarele etape: evaporarea solventului pn la un reziduu solid; vaporizarea solidului i disocierea n atomii componeni, care dau, ntr-o prim etap, atomi n stare fundamental; o parte din atomii din etapa precedent pot fi adui n stare excitat, prelund cldura din flacr i devenind atomi excitai, care constituie ei nii surse de radiaii. Spectrul de emisie rezultant const din linii caracteristice mai ales ale atomilor dar i ale ionilor excitai care pot aprea. O parte dintre atomi se pot transforma i n alte specii MO, MOH, cnd nu mai iau parte la procesul de absorbie atomic. De aceea, pentru a se realiza o selectivitate bun, sursa de radiaii ce emite fascicolul care urmeaz s parcurg celula trebuie s fie o surs monocromatic avnd o frecven egal cu cea a liniei de rezonan a atomilor din proba de analizat (Figura 1).
E3 E2 absorbtie E1 linii in emisie absorbtie de rezonanta E0 stare fundamentala

Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

Lector Dr. Cecilia ARSENE

Notie curs 09+10 10

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

Figura 1. Absorbia de rezonan este una din cele mai utilizate linii n analiza chimic prin absorbie atomic A. Walsh a fost cel care a propus primul, pentru aceast metod, n calitate de surse de lumin, nite lmpi de construcie special denumite lmpi cu catod cavitar (Figura 2) care emit un spectru atomic, format din linii, caracteristice materialului (metalului) din care este confecionat catodul. Lmpile conin un anod din wolfram i un cadod cavitar cilindric confecionat din elementul ce se dorete a fi determinat. Acestea sunt inchise ntr-un tub de sticl umplut cu un gaz inert (neon sau argon) la o presiune cuprins ntre 1-5 Nm-2. Ionizarea moleculelor de gaz are loc sub aplicarea unei diferene de potenial de 300-400 V ntre anod i catod. Ionii formai bombardeaz catodul smulgnd atomi metalici din acesta; unii atomi smuli se afl n stare excitat i emit, n trecerea lor n starea fundamental, radiaii caracteristice metalului respectiv (Figura 3). Pb* Pb + h Forma catodului concentreaz radiaia ntr-un fascicol ce trece printr-o fereastr de cuar, n timp ce atomii smuli sunt redepozitai pe catod. Un spectrometru de absorbie atomic conine de regul mai multe lmpi, fiecare caracteristic unui anumit element ce se dorete a fi investigat. Acestea sunt fixate ntr-un dispozitiv rotativ ce permite selectarea rapid a lmpii necesare unei determinri.

Figura 2. Lamp cu catod cavitar.


+ + M
0 +

Ne

Ne

Ne Smulgere

+ -

M* M
0

Ne

+ -

M* M
0

Radiatie

Ionizare

Excitare

Emisie

Figura 3. Procesele ce au loc n lampa cu catod cavitar. n afara sursei, deosebit de toate sursele utilizate n celelalte metode optice, schema bloc a acestei metode (Figura 4) este identic cu spectrofotometriei de absorbie n general. Deosebirea este aceea c, n cazul absorbiei atomice, n loc de soluii lichide, probele se afla n stare gazoas ntr-o flacr i nu sunt constituite din molecule ci din atomi n stare fundamental.
Lampa cu catod cavitar (sursa) Flacara sau cuptor (celula) Monocromator Detector

Figura 4. Schema bloc a spectrometrului de absorbie atomic

Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

Lector Dr. Cecilia ARSENE

Notie curs 09+10 11

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

Legea absorbiei radiaiilor Analogia cu metoda spectrofotometriei de absorbie merge mai departe i anume legea absorbiei radiaiilor n cazul unui fascicol incident, monocromatic este aceeai. Dac un fascicul incident, de intensitate I0, n urma trecerii prin stratul absorbant, de grosime l, devine un fascicul de intensitate I, relaia dintre I i I0 este dat tot de legea Lambert-Beer scris diferit: I = I0eklN unde: k este coeficientul de absorbie atomic, l lungimea flcrii, N numrul de atomi, aflai n stare fundamental, din unitatea de volum. Analog cu cele nvate la spectrofotometria de absorbie, dac notm cu A absorbana: A = ln (I0/I) ecuaia de mai sus devine prin logaritmarea ambilor membri: A = klN Deci A, pentru un atom dat, pentru parametrii fizici ai sistemului optic constani i o flacr fix, este proporional cu N. Cum numrul de atomi din unitatea de volum N depinde de mai muli factori constani (debit, vscozitate etc.) dar mai ales de concentraia C a soluiei pulverizate n flacr, introducnd concentraia n locul numrului de atomi, N, ecuaia devine: A = kC unde k este un coeficient constant, propriu fiecrui element la lungimea de und aleas i n condiiile unui instrument dat i ale unei flcri stabile. Relaia, liniar n coordonatele AC, este util pentru analiza cantitativ propriu-zis i exploatat cu totul analog ca n spectrofotometria de absorbie UV-VIS. Aparatura Schema de principiu, ilustrat anterior pentru spectrometrul de absorbie atomic (Figura 4), poate fi completat cu mai multe amnunte (Figura 5). ntre electrozii lmpii cu catod cavitar se aplic 400V i un curent de 10-40 mA, foarte bine stabilizat, pentru a emite un flux luminos de intensitate constant. Soluia coninnd proba etalon, sau cea de analizat, este transformat ntr-un aerosol fin, n interiorul unei incinte numite sistem de pulverizare, sau pulverizator (nebulizor). Aerosolul, amestecat intim cu amestecul de gaze, oxidant plus carburant, este condus apoi n flacr. Se pot utiliza variate amestecuri carburant-comburant prezentate n Tabelul 1. Flacra sau cuptorul tubular din grafit (o variant mai puin frecvent folosit a metodei) n care se introduce proba, se extinde pe direcia sursei de lumin, respectiv a fantei monocromatorului. Acesta selecteaz un interval foarte ngust din spectrul luminos.

Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

Lector Dr. Cecilia ARSENE

Notie curs 09+10 12

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR


Lampa cu catod cavitar Flacara Monocromator Fotomultiplicator

Semnal Arzator

Carburant (acetilena) Aer

Nebulizor

Proba

Figura 5. Schem ilustrnd principul funcionrii analizorului prin absorbie atomic. Tabelul 1. Tipuri de flcri folosite n absorbia atomic n funcie de carburantul i comburantul folosit. Flacr Elemente de analizat Li, Na, K, Mg, Ca, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn, Aer+propan sau aer+oxid de carbon As, Mo, Ag, Au, Pb, Bi Aceleai ca mai sus dar Cr, Co, Au, Fe, Aer+acetilen Mg se determin mai bine n flacr aeracetilen Aer+hidrogen sau oxigen+hidrogen Ca, Sn Oxigen+acetilen (flacr bogat n Be, B, Al, Ti, V, Nb, Y, Sn, La i lantanide acetilen) Protoxid de azot+acetilen (N2O+C2H2) Al, Si, B, Zr Atomii unui anumit element absorb doar lumina cu lungimea de und specific elementului respectiv. Tocmai aceste lungimi de und caracteristice sunt emise de surs i trecute prin flacr iar diminuarea, exprimat n unit i de absorban, este proporional cu numrul de atomi ai elementului de analizat, prezeni n flacra. Atomii celorlalte elemente nsoitoare nu absorb lumina la aceeai lungime de und ci fiecare la alte valori ale acesteia. Acest lucru se asigur prin selectarea lungimii de und i cunoaterea elementelor nsoitoare. Detectorul, de regul un foto-multiplicator, msoar intensitatea luminii monocromatice, obinut dup parcurgerea unui monocromator. Metoda descris este o metod relativ, adic pentru etalonare se msoar mai nti cel puin o prob cunoscut (numit prob etalon). Operaia este denumit n mod curent calibrare sau etalonare. Se lucreaz de cele mai multe ori prin metoda curbei de etalonare sau prin metoda adaosului de standard. Analiza chimic prin absorbie atomic este extrem de specific, lrgimea benzii de absorbie, fiind foarte ngust (de ordinul a 10-3 nm) face aproape imposibile orice confuzii privind analitul. De aceea cu aceast metod se pot analiza 66 elemente metalice sau semimetalice, fiind puin recomandat pentru nemetale. Metoda analizei prin AA este principala metod de analiz a elementelor metalice minore din materiale sau din mediu, inclusiv poluarea organismelor cu acestea. Liniile specifice cad n domeniul 190-850 nm permind analize de ordinul microgramelor iar n anumite cazuri chiar a nanogramelor dintr-un mililitru de soluie. Sensibilitatea practic difer de la element la element i este acea concentraie ce d o cre tere de 0,00434
Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU Lector Dr. Cecilia ARSENE Notie curs 09+10 13

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

uniti de absorban (aproximativ 1% din intensitatea luminii incidente). Aceasta se exprim n g/mL sau, ceea ce este acelai lucru, n ppm (pri per milion). Calibrarea O curb de calibrare este folosit pentru a determina concentraia unui element dintr-o soluie. Instrumentul se calibreaz folosind soluii stoc de concentraie cunoscut. Se construiete o curb de calibrare asemntoare celei prezentate n Figura 6. Curba reprezint o dependena a concentraiei elementului investigat de cantitatea de radiaie absorbit. Cu ct concentraia elementului n soluie este mai mare cu att absorbana va fi mai mare. Dup construirea curbei de calibrare se trece la analiza soluiilor de concentraie necunoscut. Reprezentnd absorbanele obinute pentru acestea n curba de calibrare se obin prin interpolare concentraiile cutate.
Absorbanta

Concentratia

Figura 6. Curb de calibrare folosit n spectrometria de absorbia atomic. Majoritatea spectrometrelor de absorbie atomic sunt cuplate la un calculator personal care traseaz automat curba de calibrare i efectueaz interpolarea absorbanelor probelor analizate, afind direct concentraiile cutate. Probleme speciale n practic apar totui interferene cu alte elemente din prob, de exemplu are loc formarea unor combinaii greu disociabile (Mg2P2O7, ZrO2 sau Ca3PO4 etc.) sau efecte legate de temperatura flcrii cu care se lucreaz (prea mare sau prea mic) ceea ce afecteaz numrul atomilor n stare fundamental. Acestea, indiferent de natura lor fizic, au cptat denumirea de efect de matrice. De aceea trebuie luate contramsuri. Toate aceste probleme se studiaz individual, folosind publicaiile de specialitate. Pentru a se asigura o limit de detecie ct mai joas, este necesar neutralizarea fluctuaiilor fondului. Pentru acest scop s-au pus la punct instrumente cu dublu fascicul, ale cror detectoare primesc alternativ semnale de la raza incident care, odat traverseaz proba (flacra sau cuptorul) i, alternativ, trece nemodificat sub form de radiaie de referin (Figura 7). n cazul atomizoarelor cu flacr efectul de matrice este mai redus. n cazul utilizrii cuptoarelor tubulare efectul devine foarte important datorit concentraiei mai ridicate a acesteia.

Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

Lector Dr. Cecilia ARSENE

Notie curs 09+10 14

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

Raza de referinta

Monocromator Flacara Sursa splitter Recombinator de raze

Fotomultiplicator

Semnal

Figura 7. Instrument la care se face corecia fondului. Cele mai importante mijloace de corecie a fondului sunt cele bazate pe lmpi cu deuteriu i cele care utilizeaz efectul Zeeman. n cazul dispozitivelor cu lmpi cu deuteriu flacra este traversat de lumina care iese din lampa cu catod cavitar amestecat cu raza emis de o lamp cu arc de deuteriu (250-350 nm). Cu ajutorul unei oglinzi semitransparente i a unui chopper, amestecul celor dou raze este trimis alternativ prin flacr i pe un drum care ocolete flacra, constituind raza de referin. Detectorul primete, cu frecvena dictat de chopper, att semnalul de referin ct i cel de msur, iar raportul celor dou raze se nregistreaz dup corecia de fond, sub form de absorban. Rezumnd, interferenele n spectrometria de absorbie atomic sunt de dou tipuri: - Spectrale o Cauze interne Temperatura flcrii Raportul carburant/comburant o Cauze externe Utilizarea soluiilor tampon de radiaii - Chimice o Formare de compui greu volatili o Formarea unor oxizi metalici o Ionizarea probei Un mare avantaj al metodei analizei prin absorbie atomic l constituie posibilitatea de a utiliza solveni organici pentru concentrarea probei. Acetia, prin posibilitatea lor de a extrage doar anumii ioni din soluie apoas, ntr-un volum mic, mresc i sensibilitatea i specificitatea metodei. Cei mai adecvai solveni sunt esterii i cetonele alifatice. Aa cum s-a precizat la nceput, atomizarea probei se poate face n trei moduri: n flacr, electrotermal i n plasm. n funcie de tehnica aleas pentru atomizare distingem trei tipuri de spectrometrie bazat pe absorbia atomic: FAAS (flame atomic absorbtion spectrometry); ETA-AAS (electrothermal atomisation -atomic absorbtion spectrometry); ICP-AAS (iductively couplated plasma-atomic absorbtion spectrometry). O comparaie ntre aceste tipuri este prezentat n tabelul 2. Tabelul 2. Comparaie ntre FAAS, ETA-AAS i ICP-AAS Analiza calitativ Analiza cantitativ FAAS Slab Foarte bun ETA-AAS Slab Excelent
Lector Dr. Cecilia ARSENE

ICP-AAS Bun Excelent


Notie curs 09+10 15

Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

Cost Analiz simultan multielement Limita de detecie

$15000+ Dificil ppm

$30000+ Foarte dificil <ppb

$100000+ Uoar <ppb-ppt

Spectrometrul de absorbie atomic Perkin Elmer 3300 Spectrometria de absorbie atomic cu surs continu de nalt rezoluie (HR-CS AAS). HR-CS AAS este o alternativ real la AAS cu surs discontinu (de linii). Ideea nu este nou, ea fost prezentat n anii 1980 de ctre O'Haver. Din pcate la acel moment nu se putea realiza practic, deoarece nu erau optimizate elemente decisive tehnice, cum ar fi sursa i algoritmi de corecie necesari. ncepnd cu anul 2004, este disponibil pe piaa de instrumente analitice un astfel de aparat, sistemul CS AAS care poate s utilizeze i flacra i cuptorul electrotermal de grafit ca i atomizor. n continuare vom prezenta principalele diferene care apar din punct de vedere instrumental ntre AAS clasic i HR-CS AAS, evideniind i principiile fundamentale pentru HR-CS-AAS. Avantajele HR-CS AAS - Prezint o singur surs de radiaii pentru ntreg domeniul spectral UV-vis. - Este un instrument cu dublu fascicul. - Prezint un raport S/N mbuntit - Utilizeaz pentru analiz i linii secundare (linii analitice) - Poate determina elemente pe baza benzilor moleculare - Realizeaz o corecie real a semnalului de fond. HR-CS AAS Schema optic.

Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

Lector Dr. Cecilia ARSENE

Notie curs 09+10 16

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

Figura 8. Schema optic la HR-CS AAS. Sursa continu (Figura 9) Sursa continu este reprezentat de o lamp cu descrcare n arc ntr-o atmosfer de xenon. Funcioneaz ca un radiator continuu de radiaii, acoperind ntreaga gam de lungimi de und de la 185 la 900 nm. Poate fi utilizat pentru determinarea simultan de 67 elemente. Este perfect funcional n orice moment pentru orice tip de element.

Figura 9. Sursa continu de Xe. Atomizorul (Figura 10). HR-CS AAS poate lucra i cu flacr i cu cuptor de grafit sau celul de atomizare din cuar.

flacr
Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

cuptor de grafit
Lector Dr. Cecilia ARSENE

celul de atomizare din cuar


Notie curs 09+10 17

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

Figura 10. Atomizoare. Monocromatorul (Figura 11) n Figura 11 este prezentat, schematic, ansamblul monocromatorului de nalt rezoluie utilizat n HR-CS AAS.

Legend: 1. fanta de intrare; 2. oglinzi; 3. prism; 4. fant intermediar; 5. monocromator tip Echelle grating (75gr/mm, 76); 6. ansamblu liniar de diode. Figura 11. Schem bloc monocromator. Detectorul CCD (solid state detector/charge-coupled device) (Figura 12) Acest tip de detector n comparaie cu un detector fotonic prezint urmtoarele avantaje: - rezoluie spaial bun; - eficiena cuantic mrit; - fereastra spectral mare; - zgomot foarte redus; - permite nregistrarea unor variaii mari n puterea semnalului (cu interval dinamic ridicat); - precizie fotometric nalt; - foarte bun liniaritate.

Figura 12. Exemplu de detector CCD. Cu ajutorul acestui tip de detector se pot identifica i rezolva multe din problemele spectrometriei atomice de absorbie clasic cum ar fi: - recunoaterea interferenelor spectrale - recunoaterea i compensare a structurilor formate n flacr - recunoaterea i corecia structurilor moleculare Aplicaii HR-CS-AAS Pe lng aplicaiile tipice AAS, prin noua tehnic, folosind linii analitice suplimentare se pot realiza analize de - determinarea fosforului prin PO - benzi moleculare - determinarea sulfului prin CS benzi moleculare
Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU Lector Dr. Cecilia ARSENE Notie curs 09+10 18

CERCETAREA CRIMINALISTIC A MICROURMELOR

determinarea fluorurilor i clorurilor prin AlF i AlCl benzi moleculare determinarea elementelor Se, As, Te, determinarea simultan a mai multor elemente dintr-o prob, printr-o singur analiz.

Analiza multielement Cu
AAS-clasic

Pb

Fe

Cd

Ni

Zn

Metoda uni element

Cx

Cu

Pb

Fe

Cd

Ni

Zn

HR-CS AAS

Cu, Pb, Fe, Cd, Ni, Zn

Metoda secventiala multielement

21

Conf. Dr. Romeo Iulian OLARIU

Lector Dr. Cecilia ARSENE

Notie curs 09+10 19

You might also like