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La citometra de flujo es un mtodo analtico que permite la medicin rpida de ciertas caractersticas fsicas y qumicas de clulas o partculas microscpicas en suspensin que producen una seal de forma individual al interferir con una fuente de luz
NIVELES DE ANALISIS
MOLECULAR
(esferas fluorescentes)
SUBCELULAR
Viriones individuales
CELULAR
Bacterias
SUPRACELULAR
Hibridomas
Protenas extracelulares
Secuencias de Liposomas ADN o ARN libres Complejos inmunes circulantes Cromosomas aislados Orgnulos aislados Ncleos aislados
Fusiones celulares
NUCLEARES
CITOPLASMATICO
DE SUPERFICIE
EXTRACELULARES
Qu es un fluorocromo?
HO 488 nm CO2H O 530 nm
Luz Incidente
Molcula de Fluorescena
El fluorocromo absorbe la luz del lser El fluorocromo emite un rayo luminoso de diferente longitud de onda
DATOS OBTENIDOS
1. PARAMETROS ESTRUCTURALES El tamao relativo (Forward scatter-FSC) La granularidad o complejidad citoplasmtica. (Side scatter-SSC) 2. CD (antigenos de superficie): La intensidad de fluorescencia (Identidad) Linaje Recuento Activacin 4. ALTERACION EN EL INMUNOFENOTIPO Inmunoproliferacion/inmunodeficiencia 5. ALTERACION EN EL GENOTIPO Cambios en contenido DNA Cambio en la expresion de genes
REGISTRO PRIMARIO
DISPERCION NORMAL
Granulocitos
Detritos
Monocitos
Linfocitos
Countour Plot
Density Plot
APLICACIONES CLINICAS
INMUNOFENOTIPIFICACIONi
o LEUCEMIAS Y LINFOMAS o ENFERMEDAD MINIMA RESIDUAL o SUBPOBLACIONES LINFOIDES (INMUNODEFICIENCIAS) o RAZON LtCD4/CD8(VIH-SIDA)
o o o o
CANCERi
CONTENIDO DE DNA (ploidia DNA) FASES DEL CICLO CELULAR PROTEINAS DEL CICLO CELULAR ONCOGENES (p53 y otros)
PLAQUETASi
o GLICOPROTEINAS (TROMBASTENIA DE GLANZMANN) o FISIOLOGIA PLAQUETARIA o Igs ASOCIADAS A PLAQUETAS (PURPURA TROMBOCITOPENIA INMUNE)
TRANSPLANTES
o CELULAS PROGENITORAS(CD34, CD117) o CROSS MATCH
ESTUDIOS FUNCIONALES
CUANTIFICACION DE MOLECULAS
VENTAJAS EN HEMATOLOGIA
Anlisis multiparamtrico Acceso mnimamente invasivo a parmetros celulares Analiza grandes cantidades en poco tiempo. 4000 cel/seg. Resolucin de heterogeneidad celular Aprox: 500-
INMUNOFENOTIPIFICACION DE LEUCEMIAS Los distintos tipos de leucemias son un grupo heterogneo de patologas resultantes de una proliferacin descontrolada de una o ms tipos celulares hematopoyeticos tanto en mdula sea como sangre perifrica
RETENCION DE ANTIGENOS
Clulas malignas frecuentemente conservan antgenos asociados con la clula normal a partir de la cual fueron derivados. Ejm:
BIBLIOGRAFIA
1. BARRERA RAMREZ LOURDES MARA, DRAGO SERRANO MA. ELISA, PREZ RAMOS JULIA, SAINZ ESPUES TERESITA DEL ROSARIO, ZAMORA ANA CECILIA, GMEZ ARROYO FABIOLA et al . CITOMETRA DE FLUJO: VNCULO ENTRE LA INVESTIGACIN BSICA Y LA APLICACIN CLNICA. Rev. Inst. Nal. Enf. Resp. Mex. [revista en la Internet]. 2004 Mar [citado 2012 Mar 12] ; 17(1): 42-55. Disponible en: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S018775852004000100007&lng=es
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