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NUTRIO MICROBIANA
Todos os seres vivos para crescer e manter suas necessidades
metablicas necessitam : - Energia
- Nutrientes
- Fatores fsicos no cultivo: temperatura, pH, exigncias atmosfricas
NUTRIO MICROBIANA
Uma clula viva requer energia e nutrientes para realizar diferentes tipos de trabalho, incluindo: Biossntese das partes estruturais da clula, tais como paredes celulares, membrana ou apndices externos;
Sntese de enzimas, cidos nucleicos, polissacardeos, fosfolipdeos e outros componentes qumicos da clula;
Reparo de danos e manuteno da clula em boas condies; Crescimento e multiplicao; Armazenamento de nutrientes e excreo de produtos de escria; Mobilidade
NUTRIO MICROBIANA
Quimioautotrficos
CO2
Compostos inorgnicos
Fotoautotrficos Quimioheterotrficos
Fotoheterotrficos
NUTRIO MICROBIANA
Para o cultivo laboratorial (in vitro) so utilizados meios de cultura que simulam e at melhoram as condies naturais.
So necessrios: MACROnutrientes: - Em grande quantidade. - Papel importante na estrutura e metabolismo. MICROnutrientes: - Em quantidades mnimas. - Componentes de protenas e co-fatores de enzimas
Uma clula tpica
C N H P, S, K, Na ...
Matria seca gua
Nitrognio elemento mais abundante depois do C, cerca de 12% Parte essencial dos aminocidos e cidos nuclicos Em geral, compostos orgnicos de nitrognio: aminocidos e peptdeos Podem utilizar o N2 (fixao biolgica), nitratos, nitritos e sais de amnia
Hidrognio
- Principal elemento dos compostos orgnicos e de diversos inorgnicos (gua, sais e gases) Funo do H: Manuteno do pH Formao de ligaes de H entre molculas Serve como uma fonte de energia nas reaes de oxi-reduo da respirao
Oxignio
- Elemento comum encontrado nas molculas biolgicas (aminocidos, nucleotdeos, glicerdeos ...) - obtido a partir das protenas e gorduras. Na forma de oxignio molecular (O2), requerido por muitos para os processos de gerao de energia.
Mg Estabilidade dos ribossomos; Ca Estabilidade da parede celular Na Requerido em maior quantidade por micro-organismos marinhos; Fe Papel-chave na respirao, componente dos citocromos e das protenas envolvidas no transporte de eltrons.
Metais so em quantidades muito pequenas (trao) necessrios na composio de um meio de cultura: Zn, Cu, Mn, Ni, Se, Cr, Co, Mo e B
- Co-fatores de enzimas - Nem sempre sua adio necessria, presentes na gua. - Meios sintticos com compostos de alto grau de pureza e gua ultra pura podem apresentar deficincias desses elementos.
Outros aditivos Funes: evitar precipitao de ons, controlar a espuma, provocar inibio, estabilizar o pH. Quelantes: na autoclavagem ocorre a precipitao dos fosfatos metlicos Ex.: EDTA, cido ctrico, polifosfatos
Outros aditivos
Outros aditivos
Agentes solidificantes: usados em meios de cultura solidificados ou semisolidificados Tabela 2. Tipos de agentes solidificantes para meio de cultura
Componente Agar ou Agar-Agar Composio Polissacardeo, extrado de algas marinhas Polissacardeo Caractersticas Difcil hidrlise por micro-organismos, solidifica a 45oC, 12-20g/L a pH>5,0 Facilmente hidrolisvel por bactrias, solidifica de 15 a 20oC, 150200g/L No pode ser hidrolisado por micro-organismos, difcil manuseio
Gelatina
Slica-gel
Inorgnica
2- Finalidade:
Meios para Bactrias: caldo simples, gua peptonada, caldo glicosado, gelose simples com agar-agar, meio com tioglicolato de sdio (para anaerbias), meio de leite , meio com lcool etc. Meios para Leveduras: Gelose Sabouraud, caldo glicosado, caldo melaoamnia, Godoy.
4- Meio de Enriquecimento:
Geralmente lquido, de composio qumica rica em nutrientes, com a finalidade de permitir que as bactrias contidas em uma amostra clnica aumentem em nmero.
6- Meio Seletivo
A finalidade deste tipo de meio selecionar as espcies que se deseja isolar e
impedir o desenvolvimento de outros germes (adio de corantes, antibiticos e outras substncias com capacidade inibitria para alguns germes.
7- Meio Diferencial
Possibilita a distino entre vrios gneros e espcies de micro-organismos, por
possuir substncias que permitem uma diferenciao presuntiva, evidenciada na mudana de colorao ou na morfologia das colnias.
Ex.: Agar Eosin Methilene Blue (EMB), Agar McConkey e Agar Hektoen.
EMB
McConkey
Os micro-organismos no possuem qualquer mecanismo de controle interno deste fator, o que pode afetar as reaes qumicas da clula.
Termfilos extremos
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Psicrfilos:
Temperatura tima: 15C; Encontrados em oceanos e regies da rtica; Temperatura tima: 20 a 30C; crescem em temperatura de refrigeradores (4C);
Psicrotrficos:
Mesfilos:
Temperatura tima: 25 a 40C (mais encontrados); Corpo de animais (temperatura da pele); Bactrias patognicas: temp. tima 37C; Degradam alimentos e so patognicos; Temperatura tima: 50 a 60 C Ambiente de guas termais (no crescem em temp. <45C) Material estocado (altas temp.) = compostagem.
Termfilos:
Aerbio
Anaerbio aerotolerante
Micro-organismos anaerbios podem ser mortos pelo oxignio, no crescem em presena do ar e no utilizam oxignio para reaes de produo de energia;
Cmara de anaerobiose ou jarra de anaerobiose.
Diferentes gneros de micro-organismos tm tolerncias diferentes de pH mas a maioria dos micro-organismos cresce melhor perto da neutralidade (pH 6,5 7,5). - Bactrias: 4 a 9; - Bolores e leveduras: timo de 5 a 6; - Protozorios: 6,7 a 7,7; - Algas: 4 a 8,5.
Frasco de Kolle
Garrafa de Roux
Fernbarch
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Mesas agitadoras
c) Adio forada de ar esterilizado: atravs de compressor
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O sistema Gaspak Plus H2 + CO2 produz uma atmosfera de hidrognio e dixido de carbono (uma atmosfera anaerbia enriquecida com dixido de carbono).
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