cidos Nucleicos Estrutura e Funo

HISTRICO DA BIOLOGIA MOLECULAR

1866: Gregor Mendel

HISTRICO DA BIOLOGIA MOLECULAR

1869 Miescher
#

Johann

Friedrich

Buscava determinar os componentes qumicos do ncleo celular.

# Usava os glbulos brancos contidos no pus para suas pesquisas (clulas que apresentam ncleos grandes e fceis de serem isolados do citoplasma). # Descobriu a presena de um composto de natureza cida desconhecido at o momento (rico em fsforo e em nitrognio, desprovido de enxofre e resistente ao da pepsina - enzima proteoltica)) nuclena

HISTRICO DA BIOLOGIA MOLECULAR

1880 Albrecht Kossel

# Demonstrou que a nuclena continha bases nitrogenadas em sua estrutura.

1889 Richard Altmann

# Obteve nuclena com alto grau de pureza, comprovando sua natureza cida e dandolhe o nome de cido nuclico.

HISTRICO DA BIOLOGIA MOLECULAR

1900: Hugo de Vries, Erich von Tschermak e Carl Correns

Redescoberta de Mendel Leis da Hereditariedade Leis de Mendel

HISTRICO DA BIOLOGIA MOLECULAR

1928: Frederick Griffith:Transformao

HISTRICO DA BIOLOGIA MOLECULAR

HISTRICO DA BIOLOGIA MOLECULAR

1944: Avery, MacLeod e MacCarty: Princpio transformante

HISTRICO DA BIOLOGIA MOLECULAR

1953: Alfred Hershey e Martha Chase

DNA

32P

Protena

35S

HISTRICO DA BIOLOGIA MOLECULAR

1953: James Watson e Francis Crick

Maurice Wilkins e Rosalind Franklin

DNA INTRODUO
Entre todas as propriedades dos organismos vivos, a capacidade de auto-replicao fundamental. Conter a informao gentica significa armazen-la, transmiti-la ao longo das geraes, e express-la na forma de protenas. Avanos significativos tem sido alcanados na rea da Biologia Molecular a partir do isolamento, anlise e sntese de seqncias de DNA. DNA recombinante estudos de funo e dos mecanismos que controlam a expresso gnica

CIDO NUCLICO PROTENA

DNA INTRODUO

DNA INTRODUO

GENOMA HUMANO

Autossomos x Sexuais

99%

1%

GENOMA HUMANO
Nucleotdeo

Genoma

DNA

Cromossomo

DEFINIO DE GENE
rRNA
Ribossomos

tRNA

AA

RNP

snRNA

mRNA

Protena

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Pentose (Acar)

OH
-D-Ribofuranose

H
-D-2-desoxirribofuranose

Ribose

2-Desoxirribose

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Bases Nitrogenadas = Anis Aromticos Heterocclicos

PURINAS Bicclicas

Purina

Adenina

Guanina

PIRIMIDINAS Monocclicas

Pirimidina

Citosina

Uracil

Timina

Adenina = Timina Uracil

Guanina Citosina

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Curiosidade sobre as Bases Nitrogenadas
PIRIMIDINAS

Uracil

Timina
5-Metiluracil

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Posies dos tomos

Grupamento Fosfato Bases Nitrogenadas Pentose

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Nucleotdeo

(2-) Desoxirribonucleotdeo
Nucleosdeo

Ribonucleotdeo

Nucleosdeo

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Nucleosdeo

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Esquema bsico dos cidos nucleicos

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Grupamento Fosfato = steres de Fosfato
Monofosfato

5-Monofosfato de Adenosina - AMP 5-Monofosfato de Desoxiadenosina - dAMP

Difosfato

5-Difosfato de Adenosina - ADP

5-Difosfato de Desoxiadenosina - dADP

Trifosfato

5-Trifosfato de Adenosina - ATP 5-Trifosfato de Desoxiadenosina - dATP

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Grupamento Fosfato = steres de Fosfato

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Bases Nitrogenadas

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Sentido da Fita de DNA

Base

Base

Base

5 3

5AACGTTGCTATCGT3

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Bases Nitrogenadas
Grupo Ceto (C=O) e Amino (C-NH2)

Relao Molar (1949)

(A+G) = (T+C) A = 1,0 T C = 1,0 G

AT = CG (?)

Chargaff

ESTRUTURA PRIMRIA DO DNA

Ligaes Importantes

Ligaes Fosfodister

Ligao (-) Glicosdica (Glicoslica)

DUPLA-HLICE DO DNA
Estabilidade do DNA: Integridade e Flexibilidade
Ligaes Covalentes

Foras de Van der Walls

Interaes Inicas (Mg+2) Stios Hidrofbicos

Stios Hidroflicos

Pontes de Hidrognio

O CDIGO GENTICO
A gerao da informao gentica

DESNATURAO E RENATURAO
Fenmenos fsicos que ocorrem com o DNA dupla-hlice fundamentais para os processos de replicao, transcrio e recombinao.

DESNATURAO rompimento das pontes de hidrognio entre as cadeias complementares do DNA.

RENATURAO ligamento das pontes de hidrognio entre as cadeias complementares do DNA. Esses processos podem ser observados in vitro

DESNATURAO E RENATURAO

A desnaturao da estrutura secundria do DNA pode ser obtida atravs dos seguintes mecanismos:
aumento de temperatura

titulao com cidos ou lcalis (protonizam ou desprotonizam os anis aromticos)

agentes desnaturantes (formamida)

# Tais tratamentos geram grupos carregados no interior da dupla-hlice (levando ao rompimento das pontes de hidrognio entre as bases complementares).

DESNATURAO E RENATURAO
A desnaturao do DNA pode ser acompanhada pela medida em espectrofotmetro de absorbncia de luz ultravioleta (UV).

Efeito Hipercrmico

DESNATURAO E RENATURAO
A temperatura necessria para a desnaturao de um dado DNA est diretamente relacionada com sua seqncias de pares de bases.

Adenina = Timina Uracil

Guanina Citosina

Tm (oC) = 69,3 + 0,41(GC%)

Em condies fisiolgicas, a dupla-hlice muito estvel.

Para que estes processos ocorram h a necessidade da participao de enzimas especializadas (DNA-helicases e SSBs)

DESNATURAO E RENATURAO
Rompimento das Pontes de Hidrognio

Tm (oC) = 69,3 + 0,41(GC%) T (anelamento) (oC) = Tm 25oC

DESNATURAO E RENATURAO
Mesmo quando as duas fitas do DNA esto completamente separadas, o processo pode ser revertido.
Se uma soluo contendo DNA desnaturado por calor for lentamente resfriada, as fitas complementares reassociam-se. T (anelamento) (oC) = Tm 25oC No incio, a renaturao ocorre lentamente. Porm, medida que as bases complementares se associam, a velocidade do processo aumenta. Resfriamentos abruptos colapsam a renaturao # Quanto maior a complexidade do genoma, maior ser o tempo de sua renaturao.

DESNATURAO E RENATURAO

DUPLA-HLICE DO DNA

As ligaes glicosdicas no DNA, por no estarem diretamente opostas na dupla-hlice, geram duas cavidades desiguais em seu contorno:
cavidade maior

cavidade menor
# Nestas regies, as bases esto expostas ao meio solvente. # Molculas que agem com seqncias especficas de bases (protenas) podem identificar estas seqncias sem romper a estrutura da duplahlice.

DUPLA-HLICE DO DNA

DUPLA-HLICE DO DNA

Antiparalelas

DUPLA-HLICE DO DNA
Cavidades Maior e Menor

Cavidade Menor

Volta

Cavidade Maior

0.34 nm

DUPLA-HLICE DO DNA
Cavidades Maior e Menor

DUPLA-HLICE DO DNA
Cavidades Maior e Menor

TIPOS DE DNA
O DNA pode assumir diferentes conformaes, dependendo da sua composio de bases e do meio em que se encontra DNA A

DNA B
DNA Z Tipo A forma mais abundante encontrada na clula (forma de duplahlice clssica) Tipo B formado a partir da desidratao ou diminuio do teor de sal no meio em que se encontra o Tipo A.

TIPOS DE DNA
Tipo Z encontrado, aparentemente, em apenas algumas regies do DNA Tipo B ou Tipo A. # Fatores que estabilizam sua formao: metilao ou bromao de bases estresse torcional ligao de protenas especficas ao DNA Alteraes nas conformaes podem facilitar ou dificultar a interao do DNA com protenas.

TIPOS DE DNA

TIPOS DE DNA

DNA B

DNA A

DNA Z

TIPOS DE DNA

DNA B

DNA A

DNA Z

DESNATURAO E RENATURAO
Conformao anti e syn
Umidade Relativa (92%)

Dupla RNA DNA B

C2-endo

Etanol 75%
[Sal]

DNA A

C3-endo
DNA Z Metilao ou Bromao

DESNATURAO E RENATURAO
Principais caractersticas dos DNAs A, B e Z

CARACTERSTICAS Sentido helicoidal (Giro) Dimetro (nm) Pb por giro (n) Espao entre as bases (nm) Inclinao da base Sulco maior Sulco menor Ligao glicosdica

FORMA A Direita ~2,6 11 0,26 20o Estreito/Profundo Largo/Raso anti

FORMA B Direita ~2,0 10 0,34 6o Largo/Profundo Estreito/Profundo anti

FORMA Z Esquerda ~1,8 12 0,37 7o Achatado Estreito/Profundo anti(pir) sin(pur)

FORMAS DE DNA E SUPERTORO

Linear x Circular

Plamdeos e Vrus

FORMAS DE DNA E SUPERTORO

Alm da estrutura secundria da dupla-hlice, o DNA assume uma conformao tridimensional supertorcida.

# A dupla-hlice enrola-se sob si mesma (extremamente importante nos processos de replicao, transcrio, recombinao e expresso gnica).

FORMAS DE DNA E SUPERTORO

Supertores

FORMAS DE DNA E SUPERTORO

Estrutura Supertorcida, Suprerenrolada ou Super-hlice

C Topoismeros

Grau de superenrolamento crescente A: Relaxada B: Superenrolamentos parciais C: Totalmente Superenrolado

FORMAS DE DNA E SUPERTORO

Tipos de Superenrolamentos

Plectonmico

Soluo Toroidal

Histonas

TOPOISOMERASES

Topoismeros molculas com seqncias e tamanhos idnticos, que diferem apenas na sua topologia.

Topoismerases enzimas que, quando presentes, promovem a quebra transitria nas pontes fosfodister adicionando ou removendo superenrolamentos.
A enzima permanece ligada covalentemente ao DNA e permite que as fitas passem umas sobre as outras. Estas enzimas mostram-se presentes tanto em clulas procariticas como eucariticas.

CONSIDERAES GERAIS
cidos Nuclicos maiores representantes do gentipo (DNA)

Protenas maiores representantes do fentipo

DNA Envolvido com todo metabolismo do organismo Molcula da Hereditariedade: Seqncias de bases nitrogenadas Informaes

DNA Molculas principais

RNA Molculas intermedirias

Protena Resultado final da informao

DESTINO DOS COMPOSTOS NITROGENADOS

FLUXO DA INFORMAO GENTICA

Expresso Gnica
DESOXIRRIBONUCLEOTDEOS

DNA

fita molde
transcrio RIBONUCLEOTDEOS RNAm

cdon Traduo

AMINOCIDOS

Protena (cadeia de aminocidos)

metionina

prolina

leucina

alanina

arginina

RNA x DNA

RNA x DNA

RNA x DNA

RNA mensageiro (mRNA)

Sinal de ligao ao Ribossomo

AUG

Cdon de Iniciao (Start Cdon)

CAU

AGGAGGU

Incio da Transcrio

AAAAA

Hairpin

Fim da mensagem

RNA transportador (tRNA)

RNA ribossomal (rRNA)

REVERSO DA TRANSCRIO

Os Virus da Imunodeficiencia Humana

RNA RIBOSSMICO PROCARIOTO x EUCARIOTO

RNA RIBOSSMICO PROCARIOTO

RNA RIBOSSMICO EUCARIOTO

Associado a protenas eles formam o ribossomo que serve como organelas para a sntese de protenas.

ETAPAS DA TRADUO

CHEEEEEEEGA!!!!!!!!!!!

FINAL