El ADN portador del mensaje gentico: Hechos que apoyan la idea que el ADN es portador de la informacin gentica

Las protenas son las misma a pesar de tratarse de especies diferentes La cantidad de ADN en las clulas de un individuo de la misma especie es constante A mayor complejidad de la especie, mayor es la cantidad de ADN

EXPERIMENTO DE GRIFFITH
Trabajo con bacterias que provocan neumona en mamferos
una cepa que posee una cubierta lisa: es virulenta llamada tipo s una cepa que posee cubierta rugosa: no es virulenta tipo r

 DUPLICACIN DEL ADN El ADN presenta una doble hlice, que al separarse permite la sntesis de la otra hebra.

Explicacin:
la hiptesis semiconservativa (Watson y Crick) sostiene que de las dos hebras, una seria antigua y la otra es moderna La hiptesis conservativa: tras la duplicacin quedan dos hebras antiguas y dos modernas hiptesis dispersiva: Las dos hebras resultantes estn constituidas por fragmentos de ADN nuevo y ADN antiguo

Los experimentos realizados muestran que la hiptesis semiconservativa es el mecanismo por el cual el ADN se reproduce

 Trabajo experimental que apoyan esta hiptesis(Meselson y Stahl): Se cultivaron bacterias en nitrgeno pesado (N15) por varias generaciones, luego se traspasaron a nitrgeno normal (N14), por media hora. Se aislaron las clulas resultantes y se obtuvo el ADN final y se centrifugo, observando que este ADN ocupa una posicin intermedia entre en N15 y el N14 . Se trata pues de un ADN hbrido. Si se dejan a las bacterias durante una generacin ms, aparecen dos ADN, uno hbrido y uno ligero. Si dejan durante 3 generaciones el ADN hbrido esta en una menor proporcin

 EXPERIMENTO ADICIONAL al aislar el ADN hbrido y someterlo a 80 C, este se separa en las dos hebras y por centrifugacin se observa que una hebra es ligera (N14) otra pesada (N15) SINTESIS IN VITRO

La sntesis la realiza la ADN polimerasa, para lo cual necesita de los siguientes elementos:
nucletidos de A, T, C, G Mg un ADN como patrn (o cebador)

 Enzima ADN polimerasa se encuentra en el ncleo, mitocondrias y cloroplastos, y es capaz de unir 1.000 nucletidos por min.. No puede construir ADN de Novo, esto significa que necesita un ADN cebador, por tanto, aade nucletidos a una cadena preexistente. La sntesis la realiza en el sentido 5 a 3, por lo que la hebra nueva es anti paralela y complementaria La Replicacin es bidireccional Como las dos hebras crecen en paralelo si una de ellas tiene direccin 5 a 3 y la otra es 3 a 5, en esta ltima no hay ADN polimerasa que acte?

 SOLUCION Okazaki descubre unos fragmentos formados por 50 nucletidos de ARN y uno de 1000 a 2000 de ADN, que son sintetizados por una ARN polimerasa y la ADN polimerasa en direccin 5 a 3, sobre diferentes regiones de la hebra patrn, luego los fragmentos de ARN son retirados.

 DUPLICACION EN BACTERIAS 1.- Existe una secuencia de nucletidos de ADN llamado origen de la Replicacin que acta como seal de iniciacin. 2.- La enzima helicasa rompe los puentes de hidrgeno entre las hebras complementarias y las separa (formacin de la hebra patrn) 3.- las protenas SSB se unen a la cadena nica de ADN para estabilizarlas. 4.- el proceso es bidireccional, formando las burbujas de Replicacin. 5.- Como ninguna ADN polimerasa puede actuar sin cebador, interviene una ARN polimerasa (que si lo puede hacer) llamada primasa que sintetiza un fragmento corto de ARN(10 nucletidos) que acta como cebador. 6.- Luego acta la ADN polimerasa III que a partir del cebador comienza la sntesis en direccin 5 3. La energa requerida es aportada por los propios nucletidos que pierden dos grupos fosfatos (esta es de crecimiento continuo).

 7.- Sobre la otra hebra la ARN polimerasa sintetiza 40 nucletidos de ARN distante unos 1000 nucletidos de la seal de inicio y a partir de ellos la ADN polimerasa III sintetiza ADN (1000 nucletidos) formando los fragmentos de Okazaki. 8.- Luego la ADN polimerasa I retira los segmentos de ARN y luego rellena los espacios con ADN. 9.- Finalmente la ADN ligasa empalma los fragmentos (crecimiento lento)

 DUPLICACION EN EUCARIONTES El proceso es similar a los procariontes, con dos diferencias fundamentales
El ADN esta asociado a histonas, una hebra se queda con las histonas (hebra patrn), mientras que a la hebra retardada se le asocia histonas nuevas Como el ADN eucariotico es mas grande, existen varios sitios de Replicacin (varias burbujas) que se activan en forma coordinada llamada unidades de Replicacin o Replicones.

Otro aspecto importante es que los fragmentos de Kazaka son mas pequeos

La Replicacin se realiza durante e periodo S del ciclo celular que dura una 6 a 8 horas.

 ALTERACION DE LA SECUENCIA Se puede dar varios tipos:

Espontaneas: errores de la ADN polimerasa Provocadas: inducidas por ciertas sustancias qumicas y por determinada radiaciones.

La correccin la realiza la ADN polimerasa (autocorreccin). Los sistemas de reparacin provocan que solo exista 1 error por cada 109 pares, este error heredable se denomina mutacin puntual o gnica, lo que permite una cierta variabilidad de la descendencias.

 TEORIA UN GEN UNA ENZIMA gen: es un fragmento de ADN que tiene la informacin para una determinado carcter y tiene una ubicacin fija en el filamento de ADN, denominado locus. El locus puede ser ocupado por mas de un gen, por tanto a cada uno de estos genes se denominan Alelos. Enz1 enz 2 enz3 Sustrato producto1 producto 2 producto3

 EXPRESIN DEL MENSAJE GENETICO El mecanismo mediante el cual se pasa el mensaje se divide en dos etapas:
1.- Paso de la secuencia del ADN (un gen) a un ARN mensajero. Esto ocurre en el ncleo o en el nucleoide. 2.- Paso de la secuencia de ARN mensajero a una secuencia de aminocidos, esto ocurre en los ribosomas y se denomina Traduccin transcripcin ADNARNm Replicacin ADN (nuevo) traduccin protena

 TRANSCRIPCION
1.- Existen tres tipos de ARN POLIMERASA ARN polimerasa I sintetiza ARN ribosomal (todas las subunidades) ARN polimerasa II sintetiza ARN m ARN polimerasa III ARNt Los genes estn fragmentados por tanto es necesario un proceso de maduracin, donde se eliminan las secuencias sin sentido (INTRONES) y se empalman las secuencias con sentido (EXONES)

INICIACION Existen dos seales de inicio secuencia de consenso en una regin del ADN llamada regin promotora los TATA y los CAAT. Alargamiento: se inicia en el sentido 5 3 despus de 30 nucleotidos transcrito se le agrega una caperuza (metilguanosin trifosfato).

 Finalizacin: esta relacionada con una secuencia TTATTT. Luego interviene una enzima llamada poli A polimerasa que aade al final la cola poli A, a esta hebra se le llama transcrito primario.

Maduracin Se realiza por una enzima llamada ribonucleoproteina que reconoce a los intrones, los que suelen comenzar con GU y terminan con un AG, los corta y los retira.
Luego una ARN-ligasa empalma los exones .

El ARN r y ARNt tambin sufren el proceso de maduracin.

 SINTESIS DE PROTEINAS Se subdivide en las siguientes etapas: A.- Activacin de aminocidos: los aminocidos en presencia de la aminoacil-ARNt -sintetasa mas ATP se pueden asociar a un ARNt especifico, liberando AMP mas Pi.

B.- Primera etapa de la traduccin: Iniciacin de la sntesis

En bacterias el ARNm no sufre de maduracin El ARNm se une a la subunidad menor del ribosoma Luego se asocia un ARNt -aa que en uno de sus extremos tiene un anticodon y en otro una aa, a un triplete llamado codn en ARNm. Posteriormente se une la subunidad mayor formando el complejo activo con gasto de energa (GTP)., el primer triplete que se traduce es AUG (formilmetionina) que posteriormente suele ser retirado

 C.- segunda etapa: Elongacin de la cadena

El complejo activo posee dos sitios de unin o centro Centro peptidil (sitio P): se sita el primer ARNt-aa Centro aceptor (sitio A): se sita el siguiente ARNt-aa El radical COO- del primer aa se une al radical amino del siguiente aa (enlace peptidico), catalizado por la peptidil-transferasa El sitio P queda ocupado por ARNt solo, el que sale del ribosoma Se produce la traslocacin ribosomal, donde el sitio P vuelve a ser ocupado por ARNt -aa

D.- Tercera etapa Finalizacin

Esta formado por los llamados tripletes sin sentidos UAA, UGA, UAG (no hay ARNt con anticodon complementario) El factor de liberacin asocia al COO- H2O liberando la cadena polipeptidica, separndose las subunidades ribosomales

 Un mismo ARNm si es suficientemente largo puede ser traducido por varios ribosomas a la vez , uno tras otro. E.- Asociacin de varias cadenas :
durante la sntesis, la cadena va adoptando determinadas estructura espacial (2 , 3) a travs de los enlaces por puentes de hidrogeno o de azufre Las protenas pueden estar constituidas por cadenas polipeptidicas o varias subunidades, las que puede ser iguales o desiguales segn provengan del mismo gen o de genes diferentes.

 CLAVE GENETICA: Mas de un triplete para un mismo aminocido Cdigo degenerado Regulacin de la Expresin gentica Las clulas no estn constantemente sintetizando todos los tipos de protenas La cantidad de protenas depende de la cantidad de ARNm presente en el citoplasma y su vida media es corta (min.) Por tanto la concentracin de ARNm regula los niveles enzimticos En los procariontes depende del sustrato disponible, mientras que en eucariontes depende del ambiente hormonal del medio interno.

 MODELO DEL OPERON Surge del problema de cmo se controla la sntesis de ARNm En el modelo de operon aparecen dos tipos de genes:
Genes estructurales: codifican las protenas estructurales y las enzimticas Genes reguladores: codifican las protenas cuya misin es controlar la actividad de los genes estructurales, estas protenas se denominan Represores.

El opern lac tiene un gen regulador y 3 genes estructurales, los que se transcriben todos a la vez.

Junto al primer gen estructural existen dos zonas especificas

zona promotor: a el se fijan la ARN polimerasa zona operador: donde se fija el represor

 El represor producido por el gen i se asocia al operado e impide la unin de ARN polimerasa por lo que se impide la transcripcin de genes estructurales... este operon funciona por el sistema de induccin enzimtica.. El inductor es la lactosa, que al unirse al represor, cambia su configuracin, impidiendo que este se una al operador, facilitando la unin de la ARN polimerasa y por tanto se realice la transcripcin.

 Control de la expresin gentica en Eucariontes Los segmentos de ADN condensados no se expresan, mientras que los segmentos estirados se transcriben Durante el desarrollo embrionario quedan condensado o no los segmentos, lo que genera la diferenciacin celular y a organognesis, por tanto, las clulas tendrn receptores con respecto a una u otra hormona A.- hormonas lipidica: Atraviesan la membrana clula fcilmente, luego se une a un receptor citoplasmtico (protena) luego se dirige al ncleo donde se fija a determinadas secuencias de ADN poniendo en marcha la transcripcin. B.- Hormonas proteicas: no atraviesan la membrana, por lo que se unen a protenas de la membrana, de esta unin, se activa una enzima llamada adenilatociclasa que se encuentra en la cara interna de la membrana, catalizando el ATP y transformndolo en AMPciclico .

 El AMPciclico es considerado el segundo mensajero, este se dirige al ncleo, donde activa las protenas reguladoras de la transcripcin.

FIN