Transporte a travs de la membrana celular

Departamento de Biofsica Facultad de Medicina

Objetivos

Analizar parte de las funciones de las membranas celulares. Estudiar el pasaje de sustancias a travs de la misma. Expresar en forma cuantitativa las leyes que gobiernan dicho pasaje.

Estructura bsica
Bicapa lipdica: Carbohidratos Protenas de membrana (intrnsecas y extrnsecas).

Una de las principales funciones de las membranas biolgicas es la compartimentacin.

Las protenas de membrana son las macromolculas que determinan el grado de especializacin de esta.

Transporte activo de iones y metabolitos Comunicacin intercelular Formacin de canales inicos Generacin de segundos mensajeros de distintas vas metablicas Transduccin de energa Reconocimiento celular

Permeabilidad
Es la capacidad que posee una membrana (sea sta natural o artificial), de permitir el pasaje de una sustancia a travs de ella.

Impermeables Semipermeables De permeabilidad selectiva Sin selectividad

A pesar de la naturaleza hidrfoba del interior de la bicapa, las membranas no son completamente impermeables.
Se considera a las membranas biolgicas como de permeabilidad selectiva. Deben existir por tanto, mecanismos capaces de disminuir la barrera de energa que presenta la bicapa lipdica para que exista pasaje apreciable de molculas cargadas a travs de ella.

Definiciones bsicas
FLUJO Cantidad de sustancia (moles o gramos) que atraviesa una determinada seccin perpendicular a la direccin del desplazamiento por unidad de tiempo

J=
DENSIDAD DE FLUJO

n t

(mmol/seg)

Flujo que atraviesa la seccin por unidad de rea

m=

A . t

(mmol/seg.cm2)

Equilibrio
Es el estado al que llega un sistema despus de cierto tiempo sin que acten fuerzas exteriores, mantenindose invariable con el tiempo.

Estado Estacionario
En contraposicin al anterior, podemos definirlo como un estado de no equilibrio el cual se mantiene constante en el tiempo. Esto requiere aporte de energa.

m = mo

C= 1M y m : Cte. ( m = m o si f = 0) R : Cte. de los gases (julio / grado.mol) T : Temperatura absoluta ( Kelvin) z : Carga / ion F : Cte. de Faraday ( carga de un mol de iones monovalentes 96500 coul.) m : julio/mol

ECUACIN DE NERNST

= 1 2 RTlnC zF = RTlnC zF 0 1 1 0 2 2

ECUACIN DE NERNST

= 1 2 RTlnC zF = RTlnC zF 0 1 1 0 2 2

ECUACIN DE NERNST

= 1 2 RTlnC zF = RTlnC zF 1 1 2 2

ECUACIN DE NERNST
1= 2 RTlnC 1 = RTlnC 2 1 zF 2 zF zF( 1 2 ) = RT(lnC 2 lnC 1) C2 zF( 1 2 ) = RTln C1

ECUACIN DE NERNST
1 = 2 C2 zF( 1 2 ) = RT ln C1 RT C 2 ( 1 2 ) = ln zF C1

RT C = ln 2 zF C 1

Consecuencias de la ley de Nernst

Un ion puede estar en equilibrio qumico aun cuando su concentracin no sea la misma en ambos compartimientos.
Si C1 = C2, =0, ln (1)=0

Clasificacin de transporte
Difusin simple Transporte PASIVO Transporte Facilitado - transportadores - canales Primario Transporte ACTIVO Secundario

cotransporte
contratransporte

Transporte PASIVO
Producido por la diferencia de potencial electroqumico de la especie transportada. Incluye: a) Difusin simple b) Transporte facilitado
a) DIFUSIN SIMPLE El desplazamiento de una especie qumica de donde hay mayor concentracin a otra de menor, en trminos termodinmicos, produce una liberacin de energa libre (prdida de energa, - G). G=-RTln C2 C1

Si el gradiente de concentracin es cte, la densidad de flujo entre dos puntos ser proporcional a la diferencia de concentracin (C) e inversamente proporcional a la distancia (x).

m = D. C1-C2 x J = D. C .A x Ley de Fick

x
C/x: gradiente de concentracin D: coeficiente de difusin

Se puede calcular el flujo neto de una sustancia, siendo la suma de flujos unidireccionales La ley de Fick es aplicable en un medio homogneo, (D = cte)

Flujo a travs de la membrana

Dm, se supone cte y las concentraciones en el espesor de la membrana hacia cada lado De acuerdo con Ley de Fick:
a = espesor de membrana A = superficie de la membrana

J = Dm c1- c2 . A a

c1 = k.C1 c2 = k.C2

k = ci Ci
Coeficiente de particin (k): razn de concentraciones entre la bicapa y la fase acuosa. Indica cuan fcil se disuelve una sustancia qumica en un hidrocarburo

Para una membrana y un soluto determinados, k, a y Dm son ctes:

P = k . Dm a

P (permeabilidad de la membrana) - composicin, estructura de membrana - espesor de membrana - especie qumica que difunde

Entonces:

J = P (C1- C2) A

EN

RESUMEN

En la membrana celular, la difusin simple se produce a travs de la bicapa lipdica y obedece a la expresin: J = P (C1 C2) A
que deriva de la primera ley de Fick. J
Difunden segn esta ecuacin sustancias liposolubles. k desempea un papel importante Transporte de iones a travs de la membrana por difusin simple es despreciable

b) TRANSPORTE FACILITADO Permite el transporte PASIVO de iones y sustancias hidrosolubles Se da por sitios especficos: - canales - transportadores

Los 2 mecanismos no son excluyentes Un canal con mltiples estados conformacionales puede aproximarse al comportamiento cintico de un transportador

Disminuyen la barrera de energa para que exista un flujo apreciable de molculas cargas o polares

Transportadores
Estructuras proteicas con uno o ms sitios de unin, que exponen alternativamente uno o varios sitios de unin a un lado y otro de la membrana Etapas:

1- atrapar in y despojarlo de las molculas de hidratacin 2- cruzar el in 3- liberarlo y rehidratarlo en la otra orilla Mecanismos: encerrar el in, brindado refugio con cubierta hidrofbica (ej: antibitico valinomicina, transporta K+).
Transporte mediante cambios conformacionales

Canales
Importancia: participan en diversos procesos celulares (Excitabilidad) Definicin: Son protenas transmembrana que poseen un poro cuya apertura es controlada por voltaje, ligando, mecnicamente, y permite el flujo de iones a travs de la membrana

Presentes en tejidos excitables y no excitables, involucrados en procesos de sealizacin Canales:

Na+ y K+: participan en la generacin del potencial de accin Ca++: transmisin de seales. Acoplamiento excitacincontraccin Acetilcolina: placa neuromotora

Flujo por canales y transportadores tiene una cintica de saturacin

J = Jmx .[S] K+[S]
J
J mx

[A] + [S]

[AS]

1/2 J mx

K: cte de equilibrio A: sitio de unin S: ligando

[S]

Transporte ACTIVO Incluye todos los mecanismos de transporte que no son producidos por la diferencia de potencial electroqumico La energa libre para el transporte puede provenir de procesos metablicos directamente, o del transporte de otra especie a favor de su gradiente Primario: bomba de Na+/K+, con importante funcin electrognica T Activo

Cotransporte (mismo sentido)

Secundario Contratransporte

PREGUNTAS
1- Explique las diferencias entre flujo y densidad de flujo. 2- Defina el potencial electroqumico y explique el equilibrio con base en este concepto. 3- Utilizando la expresin matemtica de la ley de Fick, justifique el hecho de que los iones NO atraviesan la membrana por el mecanismo de difusin simple.

4- En un recipiente, en un determinado instante se mide la concentracin de soluto a diferentes distancias de la pared del recipiente:

-indique el sentido de los flujos a XA, XB, XC y XD. -a qu estado llegar el sistema luego de un largo perodo de tiempo?

5- Defina un canal y hable sobre la importancia en la fisiologa normal del hombre. 6- Cul es la importancia en las ciencias biomdicas conocer las funciones, estructuras y mecanismos de los canales? 7- Menciones las diferencias entre los dos mecanismos de transporte activo (cotransporte y contratransporte).