CULTIVO DE MUESTRAS CLINICAS

Docentes:
- Lizzie Becerra, Microbiloga - Carlos Abanto, Microbilogo - Max Siaden, Microbilogo - Juan Giles, Mdico

INFECCION URINARIA
Es la invasin, multiplicacin y colonizacin de cualquier lugar anatomico del tracto urinario desde el parnquima renal y/o sus vas de excrecin, por grmenes y provoca una serie de alteraciones morfolgicas y funcionales
con o sin presencia de sntomas y con recuento 105 ufc/mL

INFECCIN URINARIA

Bacteriuria sintomtica

Pielonefritis

Vas urinarias altas Riones Urteres (ureteritis)

Fiebre Dolor lumbar Disuria (ardor al orinar). Polaquiuria (ir mucho al bao). Tenesmo (dificultada para orinar) Dolor abdominal Malestar.

Cistitis

Vas urinarias bajas Vejiga Uretra(uretritis)

Disuria Urgencia Frecuencia y urgencia urinaria. Nocturia Dolor suprapubico. +/- Hematuria

ITU UROCULTIVO
ITU NO COMPLICADAS Escherichia coli pueden encontrarse

Gram + Staphylococcus saprophyticus Staphylococcus epidermidis Enterococcus sp

Gram Escherichia coli (80%) Klebsiella sp Proteus sp Enterobacter sp Pseudomonas aeruginosa

ITU COMPLICADAS: Instrumentacin, Catter, anomalas del tracto urinario E. coli y otras Enterobacterias Pseudomonas aeruginosa Candida albicans Acinetobacter baumannii

UROCULTIVO

Probable ITU - Bacterias y Leucocitos presentes.

La presencia de leucocitos mayor de 5 por campo microscopico (piuria) aparecen en la orina nocontaminada, el espcimen es probablemente anormal La evidencia de infeccin est cuando esta acompaada de bacteriuria.

Sedimento

INFECCIN DEL APARATO GASTROINTESTINAL

Cuadro Clnico: Diarrea aguda

* Etiologa: Bacteriana, viral, parasitaria TRANSMISION

Fecal oral Ciclo corto: ano mano boca Ciclo largo: contaminacin por aguas servidas

alimentos, verduras de tallo corto, etc

COPROCULTIVO
Es el mtodo ms til para el diagnostico de infecciones

gastrointestinales de origen bacteriana y el indicado para el aislamiento de enteropatgenos.

Este aislamiento no presenta mayores dificultades si se

siguen los lineamientos prescritos para cada caso.

Familia Enterobaceriaceae.
Esta presentacin esta orientada a el aislamiento e

identificacin primaria de Salmonella, bacteria que ha demostrado ser agente etiolgico de un alto porcentaje de infecciones entricas.

COPROCULTIVO
pueden encontrarse

Gram +

Gram -

Staphylococcus aureus Clostridium difficile.

Salmonella Shigella Escherichia coli EP Campylobarter sp Yersinia enterocoltica Vibrio cholerae

MUESTRA DE HECES

Seleccionar la muestra con moco o sangre Si la muestra es slida, antes de sembrarla, diluirla en solucin salina isotnica (SSI) Sembrar la muestra inmediatamente despus de su recoleccin, en caso contrario, utilizar medio de transporte No debe usarse papel higinico: Sustancias Inhibidoras Las muestras contaminadas con orina deben descartarse Muestras mltiples recibidas en un mismo da no son tiles

CULTIVO:
DC XLD HE MacConkey Medio de enriquecimiento selectivo: Caldo selenito
Incubar a 37C x 18-24 hrs

Incubar a 37C por 18-24 hrs Colonias transparentes e incoloras

Incubar a 37C por 18-24 hrs Colonias rojas y secas

Agar SS

Incubar a 37C por 18-24 hrs TSI / LIA Cultivo puro Colonias transparentes e incoloras

Medio de transporte
Cary Blair Stuart Amies TSI / LIA Cultivo puro

SEROLOGA SEROLOGA Salmonella Shigella E. coli enteropatgeno* SEROLOGA Salmonella TSI / LIA Cultivo puro

ANTIBIOGRAMA: Importante para establecer la susceptibilidad antibitica

Hemocultivo

El hemocultivo es un cultivo microbiolgico de la sangre.

Mtodo diagnostico que permite determinar la presencia de microorganismos (infecciones bacterianas) en sangre a travs de una muestra obtenida por una puncin diferente y de manera asptica
El hemocultivo o cultivo microbiolgico de la sangre constituye en los casos de septicemia, el nico examen que permite su confirmacin. En caso de bacteremia permite aislar el agente causal.

En que situaciones se indica hemocultivos? Sospecha de bacteremia en pacientes con

o sin foco de infeccin, de origen desconocido Sepsis o septicemia: presencia y crecimiento de microorganismos en la sangre. Neumona Para la identificacin del agente causal de Endocarditis infecciosa Septicemia severa Episodios febriles de origen Meningitispatologa: alguna
Osteomielitis Artritis antecedente de drogadiccin intravenosa desconocido Fungemia TB diseminada

Pacientes que ya tienen terapia antimicrobiana, continan con fiebre y los cultivos iniciales fueron negativos

Sntomas de la septicemia
Fiebre (>38C) o hipotermia Hiperventilacin (>20 respiraciones x minuto) Escalofros Temblor Piel caliente Erupcin en la piel Taquicardia (>90 latidos x minuto) Confusin o delirio Disminucin del gasto urinario

FACTORES PREDISPONENTES PARA TENER HEMOCULTIVOS POSITIVOS:

Maniobras invasivas: cirugas, sondas, catteres. Alteracin de las defensas del husped : cncer, diabetes, cirrosis, HIV, quemados, tratamiento inmunosupresor. Neonatos Drogadictos endovenosos.

Toma de muestras:
En lo posible, 3 (tres) muestras. CADA PUNCIN ES UNA MUESTRA: Volmen: 10 ml por puncin en adulto 1-2 ml en neonato, hasta 5 ml en nios mayores de 5 aos. Antes del tratamiento antibitico 2 a 3 muestras separadas en perodos de 20 a 30 minutos ( depende de la gravedad)

hemocultivos: para mtodos convencionales

Botella con caldo BHI Medio Ruiz Castaeda (Hemocultivo manual)

Hemocultivo Automatizado Botella BACTEC

Procesamiento de las muestras:

Mtodos convencionales: Incubar 6 a 24 horas: observacin macroscpica: presencia de gas, turbidez: si es negativo: coloracin de GRAM. Si persisite negativo al 7mo da: subcultivo a ciegas. Si es +: Coloracin de GRAM. subcultivos a medios adecuados, ATBgrama presuntivo. Cultivo en anaerobiosis. Incubacin 7 das total: 95% de los gmenes habituales crecern. Ms de 7 das: para hongos, leptospira, Brucella, Micobacterias, endocarditis, ATB previa.

LECTURA Turbidez o pelcula (Fase lquida) Manto o colonias (Fase slida)

MIELOCULTIVO
Es el cultivo del aspirado de mdula sea.

Infecciones con reservorio en Mdula sea Alta sensibilidad y especificidad Indicado en

Recada o recidivas de Brucelosis.

Complicaciones
Aunque el procedimiento produce una molestia transitoria, en general es bien tolerado y los cultivos son ms rpidamente positivos. Se recomienda sea practicado por personal con experiencia. Pueden ser positivos an cuando los hemocultivos sean negativos.

LECTURA Turbidez o pelcula (Fase lquida) Manto o colonias (Fase slida)

En Medio Bifsico TSB/TSA

Obtencin de muestra puncin de mdula sea

Inclinar 10 minutos incubar a 37C hasta los 7 das Observar horas cada 24

INFECCIONES DEL APARATO GENITAL VAGINOSIS Y VAGINITIS

VAGINOSIS VAGINITIS BACTERIANA POR CANDIDA ALBICANS

VAGINITIS POR TRICOMONA VAGINALIS

Flujo vaginal pH Olor Microscopa

Ligero, blanco, adherente 4.2 - 4.5 Sin olor + de una clula epitelial por c/PMN Bacilos grampositivos (Lactobacillus)

VAGINOSIS BACTERIANA
alteracin del equilibrio de la flora normal vaginal

Sndrome caracteizado por una disminucion de la bacteria protectora Lactobacilos que son remplazados por un sobrecrecimiento de bacterias patogenas anaerobicas como (Gardenella vaginalis, Prevotella, Mycoplasma hominis, Bacteroides, Fusobacterium , Peptoestreptococcus y Mobiluncus;)y se acompaan con aumento en el pH. Es la causa mas comn de descarga vaginal anormal. Puede tener comienzo y remisin espontanea. El 50% casos pacientes Asintomticas.

CAUSAS: algunas actividades o conductas alteran el equilibrio de las bacterias en la vagina:

Tener una nueva pareja sexual o mltiples parejas sexuales. Utilizar duchas vaginales, jabones o suavizantes de ropa, lubricantes, espermicidas Las mujeres que nunca han tenido relaciones sexuales tambin pueden padecer esta infeccin. Duchas vaginales Estrs, Dispositivo intrauterino, uso de ropa ajustada, escaza higiene

Secrecin homognea poco espesa con burbujas blanca o blanco-griscea a amarillo

Prurito vulvar si ocurre mucha secrecin

Sntomas

Descarga vaginal excesiva irritacion

Olor ftido aminado (olor a pescado)

El olor puede ser ms intenso durante el periodo menstrual o despus de tener relaciones sexuales.

Definicin de la vaginitis
La vaginitis es una inflamacin de la mucosa de la vagina que causa los siguientes sntomas: Picazn Ardor durante la miccin. Sangrado ligero. Irritacion .Secrecion vaginal Es causada por la infeccion con microoganismos patogenos como: Candida albicans Trichomona vaginalis Herpes genital, etc

Tipos comunes de Vulvovaginitis:

Trastorno
Vaginitis inflamatoria
Signos y Sntomas
Secrecin purulenta y adelgazamiento vaginal, disuria, dispareunia
Secrecin gris con olor a pescado, prurito, irritacin sin dispareunia Secrecin blanca espesa,(como nata o leche cortada) prurito vaginal y dispareunia Secrecin profusa frecuente, maloliente de color amarilloverdoso, disuria, dispareunia, eritema

Criterios Diagnsticos
pH >6 Prueba de olor negativa

Hallazgos Microscpicos
Aumento de PMN y cocos, disminucin de bacilos
Clulas clave, disminucin de bacilos, aumento de cocobacilos Levaduras con yemas, seudnimas o micelios Protozoos flagelados con motilidad; aumento de PMN

Diagnostico Diferencial
Liquen plano erosivo

Vaginosis Bacteriana

Secrecin gris pH <4-5

Vaginitis por tricomonas

Candidiasis Vaginal

Secrecin tpica pH <4-5

Vulvitis irritante por contacto o alrgico, irritacin qumica, vulvodinia

Vaginitis por Tricomonas

Identificacin de microorganismo causal mediante microscopia

Vaginosis bacteriana, inflamatoria y vaginitis

DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO DE LA VAGINOSIS

Se introduce un hisopo estril en la vagina y se recoge la muestra de la zona de mayor exudado, y en su defecto, del fondo del saco vaginal posterior. Se introduce el hisopo en medio de transporte. El envo de la muestra al laboratorio debe ser inmediato siempre que sea posible

VAGINOSIS
FLUJO VAGINAL, BLANCO GRISACEO

CRITERIOS DE AMSEL
TEST DE AMINA (+)

PRESENCIA DE CLULAS CLAVE >20% EN LAS CLULAS EPITELIALES

PH>4.5
Tres de los cuatro criterios deben estar presentes

Sensibilidad :92% especificidad :77% DX:3 de 4

Lactobacillu s 4 (+)

Puntuacin 0

CBGV(1) 4 (+)

Puntuacin 4

BGNC(2) 3-4 (+)

Puntuacin 2

INTERPRETACIN Cuantificacin: 4 (+) = > 30 org/campo(3) 3 (+) = 6-30 org/campo 2 (+) = 1-5 org/campo 1 (+) = < 1 org/campo 0 = ningn org/campo

3 (+) 2 (+) 1 (+)

1 2 3

3 (+) 2 (+) 1 (+)

3 2 1

1-2 (+) 0

1 0 Interpretacin Puntuacin De 0 a 3: No vaginosis bacteriana De 4 a 6: flora vaginal alterada De 7 a 10: VAGINOSIS BACTERIANA

Blastoconidias e hifas de Candida spp. Examen directo. KOH al 10% con tinta, 40x
Visualiza protozoos Seguro y fcil
Cultivo de Candida albicans en Agar Sabouraud

URETRITIS
Infeccin uretral por grmenes que se adquieren por contacto sexual. No gonocccica (Chlamydia trachomatis, U.urealyticum y M.hominis) y Gonocccica (Neisseria gonorrhoeae). Secrecin purulenta. Disuria. Polaquiuria. Complicaciones: epididimitis aguda, prostatitis, estrechez uretral secuelar.

Secrecin uretral por Gonococo. Examen directo GRAM de exudado uretral

 Exmen microscpico (ex. En fresco, Gram) 1.Ms de 5 PMN con diplococos gram negativos: Cultivo: agar chocolate MedioThayer Martin. Diplococos G- oxidasa +: Neisseria gonorrhoeae: realizar prueba de betalactamasa

SECRECIN URETRAL

Secrecin Uretral:
2. Ms de 5 PMN sin diplococcos Gram -: Giemsa: buscar Trichomonas vaginalis, y/o Cuerpos de inclusin para Chlamydia trachomatis Cultivo: en agar chocolate, Agar sangre,Medio de Diamond IFD para C. trachomatis

FUNDACION BARCELO FACULTAD DE MEDICINA