E.A.P.

de Medicina Humana

POR CHRISTIAN J. RODRGUEZ V AO

Replicacin Transcripcin inversa ADN ARN Traduccin PROTENAS

Transcripcin
Procariontes citoplasma Eucariontes ncleo

Semiconservativa Semidiscontnua Bidireccional Direccin general del alargamiento es 5 3 Requiere ARN cebadores (Primers) Se produce sectorialmente (lazos de 30 nm, entre 20 y 80 unidades de rep)

Inicio en un sitio llamado origen (sitio Ori), rico en A y T reconocido por la ADN polimerasa III (g)

Agrega los sucesivos nucletidos separa las 2 cadenas complementarias, forma una horquilla de replicacin superenrollamiento del ADN por delante de la horquilla, aumentando el grado de tensin y torsin del ADN consume ATP

Helicasa

Topoisomerasa o girasa

relaja el superenrollamiento al cortar una o las dos cadenas de ADN, esto ocasiona su desenrollamiento y sella la muesca no consume ATP

La burbuja de replicacin es estabilizada por una serie de protenas llamadas desestabilizadoras de la hlice o SSB

Todos los orgenes tienen en comn secuencias conservadas de alrededor de una docena de nucletidos denominados ARS

ARN primasa forman pequeos fragmentos de ARN cebadores (Primers), q son complementarios al molde de ADN Estos fragmentos de ARN son molculas iniciadoras y se sintetizan en la direccin 5 3 Sobre una cadena molde de ADN se forma un solo ARN cebador, mientras que sobre la otra se forman varios ARN cebadores

 Cul

es la diferencia entre el ADN primasa de las otras ADN polimerasa?

Los ARN cebadores dejan libre su extremo 3 donde tienen un grupo OH (oxhidrilo) sobre el que la ADN polimerasa III puede incorporar nucletidos de ADN Una de las cadenas se duplica en forma contnua, mientras que la otra lo hace en forma discontnua

DUPLICACION CONTNUA (ADELANTADA)

Se realiza sobre la cadena del ADN a la que se ha incorporado un solo ARN cebador, esta cadena de ADN se denomina lder o adelantada

La ADN polimerasa III incorpora desoxirribonucletidos trifosfatados en sentido 5 3 luego cataliza la formacin de enlaces fosfodister y se liberan 2 fosfatos orgnicos

DUPLICACIN DISCONTNUA (RETRASADA O RETARDADA)

Se realiza sobre la cadena e la que se han incorporado varios ARN cebadores Se forman pequeos fragmentos de ADN nuevos denominados fragmentos de Okasaki que se encuentran separador por los ARN cebadores

PCNA

Los ARN cebadores son removidos por una nucleasa reparadora acta como exonucleasa en la sntesis contnua y como endonucleasa en la sntesis discontnua

El ADN polimerasa b llena los espacios dejados por la remocin de los cebadores
La ADN ligasa une los fragmentos de Okasaki, formando enlaces fosfodister

Las dos molculas de ADN creadas adquieren forma helicoidal por accin de las topoisomerasas y en las clulas eucariotas se asocian a las histonas

PROCARIOTAS La duplicacin se origina en un solo sitio del cromosoma. Solo existe el Ori (origen de replicacin) y un solo duplicn La duplicacin puede ser unidireccional y/o bidireccional

EUCARIOTAS La duplicacin se origina en forma simultnea en muchos sitios del cromosoma. Existen muchos Ori y muchos duplicones La duplicacin siempre es bidireccional

El ARN cebador est formado por 50 nucletidos

Los fragmentos de Okasaki en la cadena retrasada constan de 200 nucletidos La velocidad del movimiento en horquilla es de 500 nucletidos por segundo

El ARN cebador esta formado por 9 nucletidos

Los fragmentos de Okasaki en la cadena retrasada constan de 1000 a 2000 nucletidos La velocidad del movimiento en horquilla es de 50 nucletidos por segundo

Los genes que codifican ARNm son activados por factores de transcripcin

Basales actan con el promotor del gen Especficos (activadores actan con el regulador y represores)

Regin de contacto con los factores de transcripcin es en el lado externo de la doble hlice a nivel del surco mayor Factores de transcripcin asociados a los promotores y los reguladores exhiben diseos en sus estructuras secundarias y terciarias

Se encastran en el surco mayor, ocupando 2 vueltas sucesivas del ADN, un monmero en cada vuelta

Hlice-vuelta-hlice las hlices encajan en los surcos mayores del ADN Dedos de cinc tomo de cinc ligado tetrahdricamente a 4 cistenas o 2 cis y 2 his son las estructuras ms difundidas Cremallera de leucina > en regulacin de protooncogenes myc, fos y jun Hlice-bucle-hlice similar a la cremallera de leucina, distinguible por la composicin de sus cadenas helicoidales

Helicasa separa las cadenas de ADN Factor sigma () del ARN polimerasa se une al promotor del molde de ADN

Zona promotora contiene secuencia corta de bases ricas en A-T caja TATA

caja Pribnow (en los procariontes) caja de Goldberg-Hogness (en los eucariontes)

La ARN polimerasa desenrrolla un tramo corto de la doble hlice del ADN para utilizar una cadena sencilla como molde para proceder a copiar la informacin El primer nucletido conserva sus tres fosfatos marcador del inicio de la cadena

La elongacin de la transcripcin no necesita del factor Para alargar el ARNm, la ARN polimerasa necesita dos factores adicionales, los factores SII y SIII (elongina) Seleccin e incorporacin de ribonuclesidos trifosfatos complementarios a los que existen en la cadena de ADN molde Incorporacin en direccin de 5 3 mediante uniones fosfodister

Segmentos ricos en citosina y guanina reconocidos por el factor rho () El ARN se desglosa del ADN gracias a puentes transitorios inestables Transcripto primario ARN recin sintetizado ARNhn conjunto de transcriptos primarios precursores de los ARNm RNPhn conjunto de transcriptos primarios asociados a protenas bsicas que se combinan con los ARN apenas stas son sintetizado

ARNhn es procesado por diferentes enzimas para formar el ARNm Remocin de intrones y unin de los exones, por las RNPsn Agregado en sus extremos 5 y 3 de sendas estructuradas llamadas cap y poli A

Cap evita la degradacin del extremo 5 por fosfatasas o nucleasas, requerido durante la remocin de intrones Poli A protege de la degradacin y ayuda a salir del ncleo

Antes de abandonar el ncleo, algunas adeninas de la mayor parte de los ARNm se metilan
ARNm sale del ncleo por los poros hacia los ribosomas citoplasmticos

Cul

es la diferencia entre la poli A polimerasa y la ARN polimerasa?

Exon-AG|GURAGUintrn
Intrn-CAG|G-exn

En las clulas eucariotas el ARN formado durante la transcripcin sufre un procesamiento posterior para convertirse en ARNm

ARNhn 80% de intrones y 20% exones Intrones son destrudos por las endoucleasas

Al extremo 5 se aade la metilguanina y al extremo 3 se aade el Poli A

El ARNm de las procariotas es policistrnico (informacin para la sntesis de muchas protenas)

El ARNm eucaritico es monocistrnico

ARNm ARNt 20 tipos de aminocidos Molculas energticas (ATP y GTP) Cofactores enzimticos Mg+2 Ribosomas 70S en clulas procariotas y ribosomas 80S en clulas eucariotas Factores proteicos

Factores de iniciacin (IF-1, IF-2, IF-3) Factores de prolongacin (EF-T y EF-6)

Factores polipeptdicos de liberacin (R1, R2 y R3)

Equivalencia especfica entre la secuencia de bases nitrogenadas del ARNm y los aminocidos Expresado por medio de un triplete o codn El cdigo gentico es universal 64 combinaciones

61 para cifrar 3 sealan cese de produccin

Polimerasa III es la responsable de transcribir los ARNt en el nucleoplasma Los genes ARNt contienen dos regiones promotoras internas llamadas caja A y caja B, reconocidas por factores de transcripcin TFIIIC y TFIIIB El proceso finaliza cuando la polimerasa reconoce secuencias ricas en timina. Luego es procesado para ser funcional y salir al citoplasma Tienen una longitud de entre 65 y 110 nucletidos Existen 31 tipos diferentes

Las subunidades son de naturaleza nucleoproteica, estn compuestas de ARN y protenas ribosmicas En la subunidad mayor se encuentran los centros o sitios de unin principales para los ARNt

Sitio A (aminocido, aminoacil o aceptor) Sitio P (peptidil, peptidlico o dador) que incorpora aminocidos y otros centros de unin para los factores de iniciacin, los factores de prolongacin y los factores de liberacin

Ribozima peptidil transferasa o Pptido sintetasa, cuya funcin es enlazar aminocidos

Polirribosomas una misma cadena de ARNm asociada a muchos ribosomas

La nica que solo se realiza en el citosol

Los 20 distintos aminocidos se enlazan con sus correspondientes ARNt por la accin de la enzima Aminoacil-ARNt sintetasa requiere ATP y Mg+2

Formacin del complejo: subunidad menor -ARNm- ARNtMetionina complejo de iniciacin y activacin del ribosoma

IF-4 reconoce al cap IF-2 une a la subunidad menor el metionil-ARNt (AUG)

IF-3 adosa el extremo 5 del ARNm a una de las caras de la subunidad menor del ribosoma

 El

ARNt que lleva a la secuencia UAC Qu aminocido transporta?

La subunidad mayor del ribosoma se une a la subunidad menor para constituir el ribosoma funcional se consume la energa del GTP El ARNt queda ocupando el sitio P o peptidilo de la subunidad mayor del ribosoma

Entrada de ARNt al sitio A

Factor de elongacin EF1a promueve la elongacin a partir del tercer codn del ARNm

El extremo 5 del ARNm se aleja y cada 90 nucletidos se establece un nuevo ribosoma

Translocacin o transposicin

Formado el primer enlace peptdico, el dipptido resultante que est unido al segundo ARNt se mueve del sitio A al sitio P Se necesita un GTP como fuente de energa proveniente del EFG El sitio A queda libre para incorporarse otro aminocido-ARNt y se repite el ciclo

Formacin del enlace peptdico

La ribozima peptidil transferasa o pptido-sintetasa (en la subunidad mayor de los ribosomas) cataliza la formacin del enlace peptdico entre el aminocido del sitio P y el del sitio A El ARN del sitio A queda con el dipptido formado, mientras que el del sitio P sale

En las eucariotas, la seal de alto del ARNm (codn UAG, UAG, UGA) es leda por un factor proteico de liberacin, el RF Todo el complejo de iniciacin se disocia, quedando libres el ARNm, el ltimo ARNt y las subunidades 40S y 60S del ribosoma En las procariotas, seales de terminacin son UAG y UGA La metionina situada en el extremo 5 de la protena suele ser removida El grupo carboxilo es cedido por la cadena peptdica en crecimiento (ubicada en el sitio P) y el grupo amino por el aa del aminoacil-ARNt (ingresado al sitio A)

La cadena polipptida formada adopta espontneamente su forma natural, globular, cilndrica o mixta Chaperonas o chaperoninas participan en el plegamiento de la cadena polipeptdicas formadas y adquisicin de su forma tridimensional Protenas que se dirigen a ciertas organelas o a ncleo tienen una secuencia de pocos aa denominado pptido seal

INHIBIDORES DEL TIPO I

Son los que desactiva a la ARN polimerasa de clulas procariotas Rifampicina, la estreptolidigina y la amanitina

INHIBIDORES DEL TIPO II

Son lo que bloquean al ADN que sirve como molde durante la sntesis de ARNm Actinomicina

INHIBIDORES DEL TIPO III

Son los que inactivan a la enzima girasa del ADN de los procariotas cumermicina, novobiocina

TETRACICLINAS bloquean la fijacin del ARNt al sitio A, en los procariotas CLORAMFENICOL impide la transferencia del peptidilo, bloquea a la subunidad 50S, resulta txico por retraer la sntesis de protenas en ribosomas mitocondriales de las clulas del paciente

CICLOHEXIMIDA bloquea la sntesis proteica en ribosomas 80S de clulas eucariotas

ESTREPTOMICINA, NEOMICINA, Y KANAMICINA se fijan a la subunidad 30S del ribosoma procariotico TOXINA DIFTRICA del Corynebacterium diptheriae q inhibe la elongacin