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Biotecnología:

Manipulación de la
información genética

4º Medio
Introducción
 Hoy en día la ciencia y la tecnología han desarrollado
procedimientos que permiten modificar la información genética,
esta disciplina se llama Biotecnología

ADN recombinante: Procedimiento que se basa en la


incorporación de genes de una
especie, en el genoma de otra.

Los organismos modificados de esta manera se llaman


“organismos transgénicos”,y el gen incorporado
“gen foráneo” o “transgen”
Ingeniería genética:
conceptos y definiciones.
INGENIERÍA GENÉTICA: Conjunto de técnicas y procedimientos de
tecnología de ADN recombinante (in vitro) que se utilizan para
aislar, clonar, o manipular genes o secuencias de ADN o ARN de
interés.

VECTOR: Pequeñas moléculas que actúan como transportadoras


de los fragmentos de ADN provenientes del organismo donante.
Ejemplos: plasmidios bacterianos, bacteriófagos.

ADN recombinante: Moléculas de un vector con un inserto de


ADN foráneo, estos pueden ser genes específicos o secuencias
genómicas aleatorias.
Ingeniería genética: Procedimiento general.

Procedimiento general.

1.- Aislar el material hereditario y el


vector.
2.- Cortar en trozos pequeños.
3.- Producir la molécula recombinante.
4.- Insertar en la célula hospedera.
5.- Amplificar (clonar) y estudiar el
Fuente: Griffiths et al. 1996
fragmento de interés.

© 2004 José Gallardo. Todos los derechos reservados


Aislar el material hereditario y el vector.
Obtenció
n del
vector.

Fraccionamiento

Fuente: Griffiths et al. 1996

El ADN se puede extraer de cualquier tejido


Obtenció
biológico: sangre (leucocitos), saliva, tejido vegetal
n del
(hojas, raíces).
ADN de
Usualmente se destruyen el tejido y se eliminan las
estudio.
proteínas, lípidos y azúcares. El ADN usualmente
precipita con etanol 70%.
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2) Cortar el ADN.

Enzimas de restricción: Enzimas que cortan ADN en


secuencias específicas (sitios de restricción) denominados
palíndromes. Las dos cadenas de estas secuencias
específicas tienen la misma secuencia si son leídas en
dirección 5’-3. Presentes en forma natural en bacterias, que
las utilizan para degradar ADN de fagos.
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3) Producir la molécula recombinante

Tratamiento con enzimas de


restricción

Ligamiento de la cadena
Plasmidio
con la enzima ligasa
recombinante

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4) Insertar en la célula hospedera y amplificar.
Clonación

Plasmidio
recombinante

Replicación autónoma
Genoma
bacteria
no

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Tipos y características de los vectores.
Características de los vectores

1.- Replicación independiente.

2.- Sitios de corte por enzimas de


restricción de carácter único.

3.- Presencia de un marcador de selección


para poder distinguir las células huésped
que transportan el vector de las que no lo
contienen.

Tipos de vectores

1.- Plasmidios
2.- Fagos.
3.- Cosmidos: híbridos de plasmidios y el fago lambda.
4.- YACs: Cromosomas artificiales de levadura.
5.- BACs: Cromosoma artificial de bacterias.

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Construcción de un
organismo transgénico.
Paso 1: Diseñar y producir el constructo de ADN que contiene al
transgen.
Promotor Gen de interés

Gen marcador
(resistencia a antibióticos o GFP)

Paso 2: Insertar el trasgen en el genoma del huésped.


Construcción de un organismo
transgénico.
Paso 3: Generar una población de individuos que
contenga y exprese el transgen.
Producción de un animal
transgénico: Inserción del
transgen en el genoma del
huésped.
1.- El primer procedimiento para la obtención de animales
transgénicos fue la microinyección de DNA a ovocitos
fecundados, esto permite la adición de nuevos genes al
genoma de forma aleatoria.

Problemas: Muy baja tasa de expresión (1%). Muchos


problemas colaterales porque la inserción es inespecífica
pudiendo insertarse el transgen sobre otros genes. Muy costoso y
laborioso.
Producción de un animal transgénico:
Inserción del transgen en el genoma del
huésped.
2.- Otra forma de realizar un animal transgénico involucra la
modificación genética directa en cultivos celulares para luego
transferirlas a ovocitos anucleados. El proceso se denomina
transferencia nuclear debido a que el núcleo de las células
modificadas se transfiere a células anucleadas antes de la
implantación.

Problemas: Baja supervivencia de embriones


implantados. Aun muy pocos resultados exitosos en
animales de granja. Procedimiento especie-específico.
Producción de un animal transgénico:
Inserción del transgen en el genoma del
huésped.
3.- La mas nueva forma de producir animales transgénicos y la más
eficiente a la fecha (12% de inserción) involucra el uso de vectores
lentivirales (Ej. VIH, Virus de la anemia infecciosa equina). Los
cuales tienen la singular capacidad de infectar células en división
mitótica. La inserción del gen se determina por medio de la adición de
un gen reportero que codifica para la proteína fluorescente verde
(GFP).
Uso de animales
transgénicos.
• A la fecha no existe en
ninguna parte del mundo la
aprobación de usar un
animal transgénico para
consumo humano.

• Al contrario, existen muchos


animales transgénicos que
se utilizan como
biorreactores para producir
proteínas humanas como la
Antitrombina III Humana
que ayuda regular la
coagulación de la sangre
Producción de plantas transgénicas: Inserción del
transgen en el genoma del huésped.
La bacteria del suelo Agrobacterium tumefasiens tiene la habilidad
natural de introducir algunos de sus genes (T-DNA) al genoma de la
planta produciendo la enfermedad de la agalla. Los genetistas pueden
reemplazar el gen del tumor por otros de interés agronómico.

Fuente: Nature journal


El debate acerca de los transgénicos.

“Existe consenso entre las organizaciones científicas sobre


los beneficios que derivan del uso de los cultivos
transgénicos y que los posibles riesgos deben ser
abordados con investigación seria y rigurosa, libre se mitos
y sensacionalismos”
Fuente: Academia Chilena de Ciencias

La ingeniería genética crea nuevos organismos como soya


o maíz con genes de bacterias que nunca se producirían en
forma natural generándose nuevos, impredecibles e
irreversibles riesgos a la salud humana y el medio
ambiente”

Fuente: greenpeace-chile.

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Beneficios de los organismos transgénicos.

 Microorganismos: Usados para descontaminar


o para aumentar la eficiencia en algún proceso
productivo. Eje. Levadura del pan, bacterias que
descontaminan, biolixibiación del cobre.

 Animales : utilizados para comprender la


fisiopatología de las enfermedades hereditarias
humanas. Utilizadas como bioreactores para
producir proteínas humanas como la insulina, la
hormona del crecimiento o la hemoglobina.

 Plantas: Arroz con betacaroteno (precursor de © 1995-203. European Communities


vitamina A). Soya resistente a herbicidas, maíz
resistente a insectos. The golden rice
Oryza sativa

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Principales cultivos de plantas transgénicas.
124,5

140
120
100 34,6

Mill. 80
26,8 (7,2)
hectáreas 60
18,9 (3,6)
40
41,4
20 15,5
0
No transgenicos Soya Maiz Algodón Canola
Transgenicos

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Tipos de modificaciones más usadas.
Tipo de planta transgenica por producto
Tolerancia a
insectos; 12,2

Tolerancia a
herbicidas; 49,7 Ambas; 5,8

Maíz silvestre mostrando consecuencias


del ataque de un gusano. Algodón silvestre (izq.) y algodón Bt (der.).

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Las plantas transgénicas en Chile.
Superficie cultivada de transgenicos en
Chile

12000
10000
Hectareas

8000
6000
4000
2000
1999 2000 2001 2002 2003

Fuente: SAG

Al contrario de lo que ocurre con la tendencia mundial, la


producción de plantas (cereales) transgénicas se ha mantenido
cercana a las 8.000 hectáreas por año 1999 a la fecha.

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Las plantas transgénicas en Chile.
Composición de plantas transgenicas
cultivadas en Chile
Soya
19%

Maiz Raps
80% 1%

Otros
0%

Los cereales representan casi el 100 % de las plantas


transgénicas cultivadas en Chile. Dentro de los cereales estos
representan casi el 50% de la producción nacional (Total
nacional = 18.000 hectáreas). Total frutales = 210.000
hectáreas.
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El temor a los transgénicos: Riesgos a la
salud humana
Nuevas alergias producto del consumo de transgénicos: “La mayoría de
los ALIMENTOS transgénicos, contiene genes completamente ajenos a
nuestra alimentación, tales como genes de VIRUS, BACTERIAS,
MARIPOSAS e incluso ESCORPIONES. Estos elementos EXTRAÑOS en
nuestra dieta AUMENTAN LOS RIESGOS a presentar NUEVAS alergias,
principalmente en los NIÑOS. ” FUENTE: GREENPEACE-CHILE

Alimentos transgénicos: Alimentos en cuya producción


se hayan utilizado materas primas derivados de
organismos transgénicos.
¿Cuando un alimento es transgénico?

0%, 0.1, 1%, 5%, 10% o 100 % de su composición.

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El temor a los transgénicos

Posibles riesgos a la salud humana: “La


mayoría de los ALIMENTOS transgénicos,
contiene genes completamente ajenos a nuestra
alimentación, tales como genes de VIRUS,
BACTERIAS, MARIPOSAS e incluso
ESCORPIONES. Estos elementos EXTRAÑOS
en nuestra dieta AUMENTAN LOS RIESGOS a
presentar NUEVAS alergias, principalmente en
los NIÑOS. ” FUENTE: GREENPEACE-CHILE

Evidencias científicas:
científicas Los cultivos transgénicos actualmente
disponibles y los alimentos de ellos derivados han sido
considerados seguros para su consumo y los métodos
utilizados para probar su inocuidad se han considerado apropiados
(Comisión del Codex Alimentarius, la Comisión Europea, Nuffield
Council on Bioethics, El Consejo Internacional de Uniones Científicas
(CIUC).
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El temor a los transgénicos: Riesgos a la salud humana.

¿Qué es una alergia?

Una alergia es una reacción del sistema inmune que se manifiesta por una
hipersensibilidad hacia algún componente del alimento, usualmente
proteínas. Todas las alergias son por lo tanto individuo específico.

¿Qué alimentos producen alergia?


En los niños los alimentos más comunes que causan alergias son la leche,
el huevo, la palta y el pescado. A pesar de esto, el Ministerio de salud
recomienda a los niños consumir leche, huevos y pescado como parte de
una dieta sana.

Además producen alergias, el maní, las nueces y la soya.

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El temor a los transgénicos

Resistencia a los antibióticos: “Si los genes


marcadores (resistencia a antibióticos) se
transmiten a bacterias peligrosas del tracto
gastrointestinal, …, es PROBABLE que estas se
tornen resistentes, contrarrestando los resultados
de años de trabajo en la lucha por la erradicación
de las enfermedades”. FUENTE: GREENPEACE-
CHILE

Evidencias científicas: La probabilidad de la transferencia es extremadamente


baja, sin embargo, un grupo de expertos de la FAO y la OMS (2000) y otros
organismos han desaconsejado la utilización de genes resistentes a los
antibióticos.

Actualmente los investigadores han diseñado métodos para eliminar los


marcadores resistentes a los antibióticos de las plantas sometidas a
ingeniería genética.

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El temor a los transgénicos

Posibles menazas al ambiente:

Los genes pueden llegar a


lugares imprevistos: Super
malesas y contaminación
alimentaría .

Interacción con especies


locales: Contaminación
genética en centros de
origen del maíz (Mexico).

* Impacto sobre la biota y


fauna: Mariposa Monarca.

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