PROCARIOTAS

CLASIFICACIN DE LAS BACTERIAS

De acuerdo al rbol de la Vida de Woese, microbilogo creador de la
nueva taxonoma molecular basada en la comparacin entre especies de
la fraccin 16s del ARN ribosomal, se proponen 3 dominios Archaea,
Bacteria y Eucarya, en los que se incluye a todos los seres vivos, aunque
existen controversias.
rbol de la vida segn Carl Woese.
J. Deacon. University of Edinburgh
IMPORTANCIA DE LAS BACTERIAS


A pesar de su menor complejidad en relacin a Eucarya, los integrantes
de los dominios Archeae y Bacteria pueden vivir en hbitats extremos:

Se les encuentra en las profundidades de la Tierra, sobreviviendo
gracias al lento catabolismo del carbono orgnico depositado en los
sedimentos, y en las profundas fuentes hidrotermales submarinas.

Por otra parte, las bacterias presentan un metabolismo tan diverso que
les permite llevar a cabo funciones tales como:
La fijacin de nitrgeno (conversin de nitrgeno gaseoso a amonio),
la fijacin de una cantidad importante de CO2,
la metanognesis (produccin biolgica de metano),
la reduccin de azufre y fierro.

IMPORTANCIA DE LAS BACTERIAS


Hay bacterias con capacidad para metabolizar los plaguicidas clorados
e hidrocarburos.
Actualmente se trabaja en la produccin de polmeros bacterianos
biodegradables para sustituir a los plsticos sintticos.
Mediante procesos vigentes a nivel industrial, las bacterias se utilizan en
la produccin de antibiticos: (bacitracina, cefalosporina, cloranfenicol,
cicloheximida, lincomicina, nistatina, penicilina, polimixina B,
estreptomicina, son algunos de ellos); vitaminas tales como la vitamina
B12 y la riboflavina, cuya sntesis es ms fcil por fermentacin;
aminocidos, por fermentacin directa o sntesis enzimtica, entre ellos
el cido asprtico y la fenilalanina (ingredientes del aspartame), el cido
glutmico (empleado como saborizante bajo la forma de glutamato
monosdico), la lisina (aditivo alimentario).
Enzimas microbianas, se producen comercialmente y se emplean en
la elaboracin de jarabes edulcorantes, detergentes, ablandadores de
carnes.

IMPORTANCIA DE LAS BACTERIAS


Las aplicaciones prcticas de las bacterias en la
ingeniera gentica incluyen: vacunas virales
(citomegalovirus, hepatitis B, sarampin, rabia);
protenas y pptidos (insulina, factor estimulante
del crecimiento, interfern alfa, interfern beta,
factor de necrosis tumoral y otros que an no se
encuentran en el mercado); vegetales y animales
transgnicos; regulacin y terapia gnicas.
CELULA PROCARIOTA
Organismos unicelulares que se reproducen por fisin binaria, la
mayora vive libremente y contienen toda la informacin gentica,
sistemas productores de energa y biosintticos necesarios para el
crecimiento y la reproduccin.
Este grupo incluye las eubacterias o bacterias verdaderas y las
arqueobacterias.
Las caractersticas clave de las clulas procariticas (significa
prencleo en griego) son las siguientes:
Su material gentico (DNA) no est encerrado dentro de una
membrana.
Carecen de otros orgnulos rodeados de membranas.
Su DNA no est asociado a protenas de la clase de las histonas.
Sus paredes celulares contienen casi siempre pptidoglucano.
Suelen dividirse por fisin binaria.
los fsiles ms antiguos conocidos, de casi 3500 millones de aos, son
organismos semejantes a bacterias.

Evolucin en la tierra
Tamao de las bacterias
Son los microorganismos de vida libre de menor tamao que existen en la naturaleza, algunas
son tan pequeas que se considera que tienen el mnimo tamao posible para ser una forma
de vida independiente.

El tamao se mide en micrmetros, m, para microorganismos mas pequeos se usa el
nanmetro, nm.

Las bacterias esfricas se miden por el dimetro, y la gran mayora tienen un dimetro que
vara entre 0,2 y 2 m.

Las bacterias alargadas se miden por el largo y el ancho y la mayora de ellas tienen un ancho
de 0,2 a 2 m por 1 a 15 m de largo.

Las bacterias espiraladas se miden por la longitud total, la amplitud de la espira y la
profundidad de la misma.

Existen bacterias cuyo tamao est en el extremo inferior de la escala, son las rickettsias,
clamidias y micoplasmas, su tamao es similar al de los virus ms grandes, los poxvirus

En el otro extremo de la escala, hay algunas bacterias alargadas que tienen una longitud
semejante al dimetro de una clula eucariota, por ejemplo, los lactobacilos tienen un largo
que puede superar al dimetro de un eritrocito.


Clula bacteriana
Funciones de tas estructuras procariotas
Membrana plasmtica Barrera permeable selectiva, lmite
mecnico de la clula, transpone de
nutrientes y residuos, localizador de
muchos procesos metablicos
(respiracin, fotosntesis), deteccin de
seales ambientales quimiotcticas.
Vacuola de gas Hincha la clula para flotar en un medio
acutico.
Ribosomas Sntesis de protenas.
Cuerpos de inclusin Almacenamiento de carbono, fosfato y otras
sustancias.
Nucleoide Lugar del material gentico (ONA).
Espacio periplsmico Contiene enzimas hidrolticas y protenas
quedantes para el procesamiento y la
captacin de nutrientes.
Pared celular Confiere a las bacterias una forma y las
protege frente a la lisis en soluciones
diluidas.
Cpsulas y slime Resistencia frente a la fagocitosis,
adherencia a superficies.
Fimbrias y pili Fijacin a superficies, conjugacin
bacteriana.
Flagelos Movimiento.
Endospora Supervivencia en condiciones ambientales
adversas.
PARTES DE LA CELULA
ESTRUCTURA INTERNA
Matriz citoplasmica
ADN: ADN Cromosmico.
plsmidos
Ribosomas.
Membrana celular.

ESTRUCTURA EXTERNA
Pared celular
Glucocalix
Flagelo.
Pilis
Clula Bacteriana
ESTRUCTURA INTERNA.
a. Citoplasma

Todo lo que hay en el interior de la membrana
citoplasmtica.
Est formado por un 80% de agua y contiene
principalmente protenas (enzimas), azcares, lpidos,
iones inorgnicos y muchos compuestos de bajo peso
molecular.
Los iones inorgnicos estn presentes en el citoplasma
en concentraciones mucho ms altas que en la mayora
de los medios.
Las principales estructuras que se encuentran en el
citoplasma son DNA, partculas llamadas ribosomas y
depsitos de reserva llamados inclusiones.

b.-Nucloide
Los cromosomas bacterianos no estn rodeados por una
cubierta nuclear.
Las bacterias contienen a menudo, adems del cromosoma
bacteriano, pequeas molculas circulares de DNA
bicatenario llamadas plsmidos.

c. Plsmidos
Los plsmidos son elementos genticos constituidos por
secuencias de ADN cortas circulares que se replican en
forma autnoma

Generalmente son circulares, pero tambin hay algunos
lineales.

Suelen contener de 5 a 100 genes, que no son cruciales
para el crecimiento de la bacteria bajo las condiciones
ambientales normales.

Pueden albergar genes que determinen actividades como
la resistencia a antibiticos, tolerancia a metales
txicos, produccin de toxinas y sntesis de enzimas.
Ribosomas:

En una clula procaritica hay miles de ribosomas, que dan al citoplasma
un aspecto granuloso.
La clula bacteriana presenta ribosomas libres en el citoplasma con
coeficiente de sedimentacin de 70S a diferencia de la clula eucariota que
es de 80S.
La letra S corresponde a unidades Svedberg, que indican la velocidad
relativa de sedimentacin durante la centrifugacin a velocidad
ultraelevada.
Se presentan tambin como polirribosomas que son cadenas de ribosomas
asociados a ARN mensajero y en parte en relacin con el ADN
cromosmico.
Contienen todos los componentes que permiten la sntesis proteica.
Las clulas poseen ms ribosomas si estn creciendo en medios ricos.
El alto contenido de ARN determina gran afinidad por los colorantes
bsicos.

e. Inclusiones
Depsitos de reserva.
Corpsculos metacromticos
Reserva de fosfato inorgnico (polifosfato) que puede utilizarse en la
sntesis de ATP.

Grnulos de polisacridos
Tpicamente de glucgeno y almidn. En presencia de yodo los de
glucgeno aparecen marrn rojizo y azules los de almidn.

Carboxisomas. inclusiones polidricas o exagonales que contienen la
enzima ribulosa-1, 5-dfosfato carboxilasa

Bacuolas de gas. Formadas por filas de vesculas gaseosas individuales,
que son cilindros huecos cubiertos por protenas. Su funcin es mantener la
flotabilidad.

f. Membrana celular
Delimita la clula y controla el contenido qumico

La membrana est constituda de lpidos y protenas.

La parte lipdica de la membrana est formada por una
pelcula biomolecular que le da estructura y constituye una
barrera que impide el paso de substancias hidrosolubles

Las protenas de la membrana estn suspendidas en
forma individual o en grupos dentro de la estructura
lipdica, formando los canales por los cuales entran a las
clulas, en forma selectiva, ciertas substancias.
Estructura de la membrana
TRANSPORTE A NIVEL DE MEMBRANA
g. Mesosonas
Plegamientos de la membrana.
Generalmente se ven asociados a la zona nuclear o
prximos al lugar de divisin de la clula.
Su funcin es desconocida. Podran jugar un papel en la
reproduccin y el metabolismo.
Cuando se divide una clula bacteriana se forma una pared
llamada septo transverso y el material gentico de la clula
parental se reparte entre las dos clulas hijas idnticas.
Los mesosomas podran iniciar la formacin del septo
transverso y unir el DNA bacteriano a la membrana
citoplasmtica
Los mesosomas podran ayudar tambin a separar el DNA
en cada clula hija despus de la fisin binaria.
g. Mesosonas
ESTRUCTURA EXTERNA:
Pared celular
Es una matriz extracelular de bacterias, hongos,
algas y plantas.
Protege los contenidos de la clula, y da rigidez a
la estructura celular.
Determina la forma de la clula.
bacilo, coco, vibrin, etc.
Sin ella todas las clulas tienen forma esfrica
Morfologa de las bacterias

La microscopa ptica permite reconocer bacterias de distintas
formas:
Las bacterias esfricas o ligeramente ovoides se
denominan cocos.
Las bacterias con forma de bastn se denominan bacilos.
Los bacilos de corto tamao que pueden confundirse con un
coco se denominan cocobacilos.
Algunos bacilos tienen extremos afinados y reciben el
nombre de bacilos fusiformes, mientras que otros poseen
forma de clava o garrote.
Los bacilos cortos curvos, con forma de coma reciben el
nombre de vibrios.
Las bacterias espiraladas se llaman comnmente espirilos
cuando son rgidas y espiroquetas si son ms flexibles y
ondulantes.

Tipos de bacterias segn la forma
Agrupacin bacteriana

Algunos gneros bacterianos se agrupan de una manera caracterstica. Esta
agrupacin se debe a la tendencia de las clulas hijas a permanecer
parcialmente adheridas despus de la divisin celular.

Los cocos pueden disponerse:
de a pares y se los llama diplococos
si se disponen en cadena se llaman estreptococos
cuatro clulas esfricas conforman una tetrada
en forma de racimo o irrregular se llaman estafilococos
en paquetes cbicos se denominan sarcinas
Los bacilos pueden disponerse:
aislados
adosados a lo largo, de forma paralela formando una agrupacin en
empalizada (Haemophilus)
pueden quedar adheridos por sus extremos y tomar apariencias de letras
chinas (Corynebacterium)

Agrupacin bacteriana

Morfologa y agrupacin bacteriana
La morfologa y agrupacin bacteriana se ponen de
manifiesto por la observacin microscpica de frotis teidos.
El mtodo de coloracin mas utilizado en bacteriologa es
la coloracin de Gram.
Las bacterias se clasifican en dos grandes grupos teniendo
en cuenta el comportamiento de las mismas frente al
procedimiento de coloracin de Gram:

Gram positivas: G (+), se tie de color violeta.
Gram negativas: G (-), se tien de color rojo o fucsia.

De izq. a der.: cocos Gram positivos, bacilos
Gram negativos, vibrio, espiroqueta.


Bacilos
forma recta en
bastn, pueden
presentarse
separadas
o en largas
cadenas.
Ej: Escherichia coli
y Mycobacterium
tuberculosis
(causante de la
tuberculosis).

Cocos
De forma esfrica
si se unen de a pares
forman diplococos
si forman cadenas se
denominan estreptococos
si forman racimos
estafilococos. Estos ltimos
son los responsables de
muchas infecciones.
Espirilos
espirilos:
varillas largas
en hlices. Ej:
Treponema
pallidum,
causante de la
sfilis
Vibriones
Como una coma
ortogrfica.
Vibrion cholerae
Causa el clera.
Tienen forma de
curva o de
bastoncillo.
Pared celular: Composicin
La pared celular bacteriana est hecha de peptidoglicano.
Que est formado por:
cadenas de polisacrido
entrecruzadas por tetrapptidos.
Segn el tipo de pared celular las bacterias pueden ser de
dos tipos:
Gram (+) retienen el tinte violeta
Gram (-) no retienen el tinte violeta
Peptidoglucano
La unidad disacardica
repetitiva: consiste en N-
acetilglucosamina (NAG)
unida por enlace (14)
a N-acetilmurmico
(NAM).
Las distintas unidades
disacardicas se van
uniendo entre s por
enlaces (14) entre el
NAM de una unidad y la
NAG de la siguiente.
Este enlace es
susceptible a la rotura
catalizada por el enzima
lisozima.
El nmero de
repeticiones (n) puede
oscilar entre 10 y 100.
Uniones peptdicas
La cadena tetrapeptdica: Desde el grupo carboxilo de
cada cido NAM, y mediante un enlace amido, se
encuentra unido el tetrapptido.

Un tetrapptido tpico de muchas bacterias es: L-alanina---
D-glutmico---meso-diaminopimlico---D-alanina.

Los tetra pptidos se enlazan a travs de pentaglicina.

De este modo, la estructura global es una sola
macromolcula gigante que envuelve al protoplasto,
formando un sculo rgido, a modo de tejido continuo, que
tiene el volumen y la forma de la bacteria respectiva
Estructura del
peptidoglicano
Bacterias Gram (+) y Gram (-)
Diferencias de tincin:
Gram (+) mantienen el teido con cristal violeta
Gram (-) Se destien con alcohol.
Esta diferencia en la tincin se debe a diferencias
estructurales de las paredes
Las gram(+): tienen pared gruesa de
peptidoglucano adems de cidos teicoicos, que
son polmeros de glicerol o ribitol fosfato.
Las gram(-): poseen una capa fina de
peptidoglucano revestida de una capa gruesa de
lipoprotenas y lipopolisacridos que impiden la
llegada del colorante.
Pared celular en Gram (+) y Gram (-)
PG EN GRAM POSITIVAS
El PG de Gram-positivas se caracteriza por la existencia
de mltiples capas, existiendo entrecruzamientos tanto
entre cadenas adyacentes en el mismo nivel como entre
niveles distintos.

El resultado es una red tridimensional gruesa (hasta
50 capas en algunos Bacillus), y ms compacta que en
Gram-negativas.

De todas formas, el grado de compacidad vara entre
especies.
Cubierta celular Gram (+)



Al tratar los preparados con cristal violeta y Lugol, se forman agregados entre el
colorante y el mordiente que durante el proceso de decoloracin, no pueden ser
extrados de las bacterias Gram (+) debido a la gruesa capa de peptidoglicano.

En las bacterias Gram (-), la mezcla decolorante puede atravesar fcilmente la capa
de lpidos de la membrana externa y la delgadez de la capa de peptidoglicano
presente, permite la extraccin de los agregados y, por consiguiente, del color
violeta.

Al ser tratadas con fucsina o safranina, las bacterias Gram (-) tomarn el color del
contracolorante.
FUNDAMENTO DE LA COLORACION GRAM
En esta coloracin, el paso crtico es la decoloracin, ya que si se prolonga
demasiado resultarn decoloradas an las bacterias Gram (+).

Debe tenerse en cuenta asimismo, que como la integridad de las envolturas
celulares resulta fundamental para lograr una buena diferenciacin, debe trabajarse
en lo posible con cultivos jvenes.

Es importante mencionar, que la clasificacin en Gram (+) y Gram (-) no puede
aplicarse a todas las bacterias ya que hay algunas que no pueden colorearse con
esta tcnica o para las cuales no tiene sentido esta clasificacin.

Tcnica.
1- Extender, secar y fijar a la llama.
2- Cubrir durante 2 minutos con solucin de cristal violeta al 1%.
3- Escurrir y cubrir con solucin de Lugol* durante 30 segundos.
4- Escurrir y cubrir nuevamente con Lugol durante 30 segundos.
5- Decolorar con alcohol acetona y lavar con abundante agua.
6- Cubrir con solucin diluda de fucsina 0,1 % o safranina 0,5 % durante 2 minutos.
7- Dejar secar o secar entre papeles de filtro y observar con objetivo de inmersin.

*Lugol: Iodo, 1g; KI, 2g; agua, 300 ml.


FUNDAMENTO DE LA COLOPRACION GRAM
Papel de la membrana externa
Acta como tamiz molecular, que permite la difusin
nicamente de molculas relativamente pequeas. Esto
supone una proteccin frente a muchos agentes
antibacterianos: colorantes, cidos biliares, antibiticos,
enzimas (lisozima).
Las porinas slo permiten el paso de sustancias hidroflicas
por debajo del tamao especificado por el dimetro de los
canales.
PERIPLASMA. Cumple una funcin de osmorregulacin:
Es una solucin densa, con alta concentracin de
macromolculas, y que participa en la regulacin de la
osmolaridad celular
Papel de la membrana externa
Esta diferencia afecta a algunas caractersticas de las
bacterias como su susceptibilidad a los antibiticos.

Las grampositivas son ms susceptibles a algunos
antibiticos que las gramnegativas

Sus paredes son digeridas rpidamente por la lisozima, una
enzima que se encuentra en las secreciones nasales,
saliva y otros fluidos corporales.

Muchos patgenos importantes pertenecen al grupo de
bacterias gramnegativas, por ejemplo el causante de la
gonorrea Neisseria gonorrhoeae, y Haemophilus influenzae
que produce infecciones en las vas respiratorias, odo y
meningitis
b. Cpsula
Es una envoltura externa, ubicada por fuera de la pared celular,
mucosa, que forma un gel que se adhiere a la clula.
Es una estructura variable que la pueden producir tanto bacterias
Gram positivas como Gram negativas. La gran mayora son
polisacardicas.
No es una estructura vital para la clula, su prdida no se
relaciona con la prdida de viabilidad de la clula, pero s se
relaciona con cambios en la morfologa colonial y en la prdida
de la virulencia bacteriana.
La virulencia de algunos patgenos se correlaciona con la
presencia de cpsula, como por ejemplo: Streptococcus
pneumoniae y Haemophilus influenzae tipo b.
La cpsula protege a la bacteria de la fagocitosis, principal
mecanismo de defensa que pone en juego el husped ante la
presencia de bacterias capsuladas.
Bacterias
encapsuladas.
c. Apndices
Flagelos y pelos: sirven a la movilidad de las bacterias.

FLAGELO. Es un nico apndice, compuesto de flagelina.
Protena que forma una triple hlice con una zona central
hueca.

El mecanismo del flagelo bacteriano es rotatorio, con un
motor reversible (funciona en los dos sentidos de giro).

PILI, armados a partir de monmeros de una protena
llamada pilina, son ms cortos y ms finos que los flagelos
y a menudo existen en gran cantidad, sirven para unir las
bacterias a fuentes alimenticias.

FLAGELOS
Los flagelos bacterianos son apndices
celulares que estn asociados a funciones
de locomocin.
En cuanto a su estructura y composicin
qumica, son similares en una gran
variedad de bacterias.

FLAGELOS
Estos apndices, estn unidos a la
clula a travs de un cuerpo basal
conectado a un gancho, que se
contina con un filamento
helicoidal.
El cuerpo basal est constituido
por un cilindro central y 2 4
anillos segn se trate de bacterias
Gram (+) o Gram (-)
respectivamente.
Qumicamente, el cuerpo basal y
el gancho estn compuestos por
una variedad de polipptidos pero
el filamento est formado por
subunidades proteicas de flagelina
que se disponen formando una
helice alrededor de un centro
hueco.

FLAGELOS: disposiciones
La coloracin de flagelos se
realiza fundamentalmente en los
casos de bacterias mviles para
las cuales la determinacin del
nmero y posicin de estos
apndices contribuya a su
identificacin.
En la figura se ilustran las
diferentes disposiciones
encontradas.

FLAGELOS
Funciones de reproduccin en bacterias
Normalmente las bacterias se reproducen asexualmente por
biparticin, formndose un tabique transversal que divide la
clula madre en dos clulas hijas.

En ocasiones, el tabique no es completo y las clulas
permanecen unidas durante mucho tiempo.

En algunos grupos la reproduccin asexual se lleva a cabo por
gemacin.

Hacia el ao 1952 se descubri que las bacterias tambin
podan reproducirse sexualmente, comportndose uno de los
ejemplares como macho y el otro como hembra.


Reproduccin Sexual
Este comportamiento sexual, que implica transferencia de
material gentico de una bacteria a otra, se puede realizar por
tres mtodos distintos:

* Conjugacin: Las bacterias se unen a travs de un puente
por el que se produce el paso del material gentico. Las
bacterias donantes se consideran machos y las receptoras,
hembras.
* Transformacin: Se produce en bacterias capaces de
captar un DNA exgeno procedente de otra bacteria.
* Transduccin: La transferencia del material gentico de una
a otra bacteria se produce a travs de un vector que
normalmente es un virus.


Conjugacin
La cantidad de AND cromosmico que es transferida depende
de cuanto tiempo permanezcan las dos bacterias en contacto.
En cadenas corrientes de laboratorio de Escherichia coli la
transferencia del cromosoma bacterial crompleto demora
alrededor de 100 minutos.
La transferencia de ADN puede ser integrado en el genoma
receptor por recombinacin homloga
Conjugacin
Esquema de la conjugacin bacteriana.
1.La clula donante genera un pilus.
2. El pilus se adhiere a la clula receptora y ambas clulas
se aproximan.
3. El plsmido mvil se desarma y una de las cadenas de
ADN es transferida a la clula receptora.
4. Ambas clulas sintetizan la segunda cadena y regeneran
un plsmido completo. La clula receptora sintetiza el pilus.
Ahora ambas clulas son potenciales donantes
Transformacin
En biologa molecular , transformacin es la
alteracin gentica de una bacteria resultante de la
absorcin directa, incorporacin y expresin del
material gentico exgeno (ADN exgeno).
El ADN exgeno se encuentra en el ambiente y se
introduce a travs de la membrana de la clula
bacteriana.
La transformacin ocurre de forma natural en
algunas especies de bacterias, aunque tambin se
puede efectuar por medios artificiales.
La transformacin es uno de los tres procesos por
los que el material gentico exgeno se puede
introducir en una clula bacteriana.
Los otros dos son la conjugacin y la transduccin.
A la transformacin de clulas eucariotas se le
llama transfeccin.
Transformacin
Transduccin
Los genes tambin se pueden transferir por un proceso de transduccin mediante
el cual un bacterifago introduce ADN extrao en el cromosoma bacteriano.
Reproduccin
Asexual
La mayora de
los procariotas
se reproducen
por divisin
celular
simple,
tambin
llamada fisin
binaria
ENDOESPORA BACTERIANA
Diversas bacterias gram(+) pueden formar una
estructura especial inactiva

Se desarrollan dentro de clulas bacterianas
vegetativas; gneros: bacillus, Clostridium
(bacilos),Sporosarcina (cocos)

Son resistentes a condiciones ambientales
estresantes: calor, radiacin UV, desinfectantes
qumicos y desecacin
ESPORULACION
Algunas bacterias, son capaces de producir formas de
resistencia a travs de un proceso llamado esporulacin.

Este proceso de diferenciacin, est codificado
genticamente y permite a los microorganismos sobrevivir
hasta que las condiciones exteriores sean favorables para el
desarrollo.

Los gneros de bacterias capaces de esporular hasta ahora
descriptos son Bacillus, Clostridium y Sporosarcina por lo cual
la presencia de esporos en una bacteria es de gran utilidad
taxonmica.
ESTRUCTURA DE UNA ENDOESPORA
Estructuralmente, los esporos bacterianos estn rodeados por gruesas envolturas
y tienen muy bajo contenido de agua.
El crtex o corteza, est compuesto por un peptidoglicano que contiene menos
enlaces cruzados que el correspondiente a la pared celular.
La cubierta est formada por una protena del tipo de la queratina con gran
cantidad de puentes disulfuro. Esta capa es fundamental para la resistencia del
esporo a los agentes fsicos y qumicos.
El exosporium es de naturaleza lipoproteica. Asimismo poseen en su
composicin qumica, una alta concentracin de dipicolinato de calcio, que es una
sustancia que no se encuentra en las clulas vegetativas, y que estara
involucrada en la eliminacin de agua durante el proceso de esporulacin.

ESPORULACIN O ESPOROGNESIS.
En la primera fase, el crecimiento de una invaginacin de la membrana
citoplasmtica llamada septo esporal aisla una pequea porcin del
citoplasma y un cromosoma bacteriano recin replicado. El septo
esporal se transforma en una membrana doble que rodea al
cromosoma y al citoplasma.
Esta estructura totalmente encerrada dentro de la clula original se
conoce como prespora. Entre las dos membranas se depositan capas
de pptidoglucano y a continuacin se forma una gruesa cubierta de la
espora de protena alrededor de la membrana ms externa.
Pueden permanecer latentes durante largos perodos de tiempo,
incluso cientos de aos y volver al estado vegetativo por un proceso
denominado germinacin.

15% peso seco de la espora
consiste en cido dipicolnico
que forma complejos con iones
calcio
La termorresistencia de las
endoesporas se debe
probablemente a varias
razones:
estabilizacin del DNA por
el dipicolinato clcico y
protenas cido solubles
deshidratacin del
protoplasto
mayor estabilidad de las
protenas celulares
Clasificacin
EUBACTERIAS (Manuel de Berger, 500 generos en 33
secciones)
Fototrofas anaerobias, - Purpura sulfurosas
Purpura no sulfurosas - Litotrofas nirtrificantes
Litotrofas oxidantes de Fe y S - Litotrofas oxidantes del H
Metanotrofas y metolotrofas - Reductoras de sulfato
Homoacetognicas - Rickettsias
Clamidias - Pseudomonas
Espirilos - Bacilos Gram(-).
Bacterias encapsuladas - Bacterias fijadoras del N
Bacterias del acido lactico - Gram (+) formadores de
esporas - Actinomycetos
Corineformes - Mycobacterium
ARQUEOBACTERIAS
ARQUEOBACTERIAS
Dentro de las arqueobacterias nos encontramos con dos reinos:
Euriotas y Crenotas.
Los euriotas estn adaptados a diferentes metabolismos y
ecosistemas, y son ms evolucionados. Comprenden las
metanobacterias, los halfitos extremos, Termoplasma y
Thermococcus.
Los crenotas son menos evolucionados y todas son hipertermfilas

Las arqueobacterias son organismos que pueden usar el azufre y
crecer a grandes temperaturas.
No tienen ncleo ni cido murmico en su pared celular.
Sus paredes celulares son, de hecho, muy variables, y pueden
contener estructuras de tipo proteico, lipoproteico y polisacardico.



ARQUEOBACTERIAS
Algunas tienen pseudopeptidoglicano: sin cido murmico y con L-
aminocidos en el puente peptdico.
Adems, los lpidos se forman con enlaces de tipo ter, los ribosomas
son 70S y tienen intrones en el ARN de transferencia.
Sus lpidos no tienen cidos grasos sino cadenas isoprenoides
ramificadas. Estas cadenas isoprenoides pueden estar unidas a dos
molculas de glicerol, una en cada extremo.
Pueden tener dos tipos de lpidos: glicerol diter y diglicerol tetrater.
La fluidez, que normalmente se regula por cidos grasos saturados e
insaturados, en este caso se controla por procesos de ciclacin, es
decir, vara la longitud de las cadenas isoprenoides.
Las membranas pueden estar formadas por una bicapa lipdica de
glicerol diter, una monocapa lipdica de diglicerol tetrater, o bien una
mezcla de ambas, que suele ser el caso ms frecuente.


CARACTERSTICAS GENERALES
Reciben este nombre por la gran variedad de hbitat que
ocupan y la diversidad de patrones metablicos que
presentan ( del griego eurus, amplio y archaios, antiguo o
primitivo )
Muchas de las especies que incluye habitan en ambientes
extremos
Incluye bacterias Metanognicas, anaerobias estrictas, y
Halobacterias , aerobias, muy ligadas desde el punto de vista
filogentico
Igualmente incluye bacterias Hipertermfilas y
Termoacidfilas
Existe un grupo de Euryarchaeota marinos no cultivables, que
son los mas evolucionados, como indica su posicin en las
ramas mas altas del rbol filogentico del Dominio.


CARCTERES COMUNES

CON EUKARYA
Paredes Celulares sin Peptidoglucano
Presentan varias ARN polimerasas no
sensibles a Rifampicina
La Metionina es el aminocido iniciador
en la sntesis de protenas.
No es inhibida por antibiticos y si lo es
por la toxina diftrica

CON BACTERIA
Presentan ARNm policistrnicos
Ausencia de orgnulos verdaderos
Modalidades especiales de
metabolismo:Quimiolitotrofa y fijacin de
Nitrgeno
CARCTERES DISTINTIVOS

Lpidos de membrana con enlace ter y sin cidos grasos.
Pared celular con pseudopeptidoglucano o de otra naturaleza
( Polisacrido, Protenas o Glucoprotenas)
Presencia de histonas
t-RNA iniciador con Metionina
Requieren factores de transcripcin
RNA polimerasas muy complejas

Archaea. Grupo variado en cuanto a morfologa,
reproduccin, fisiologa y ecologa.
Crecen en hbitats anaerobios, hipersalinos y de
elevadas temperaturas.
Diferencias estructurales con bacterias:
- composicin de la pared celular
- composicin de la membrana
- metabolismo
ARQUEOBACTERIAS
1. Diferencias en la pared celular
Las paredes celulares
arqueobacterianas no
contienen
peptidoglucano.
Pueden estar compuestas de
pseudomurena,
polisacridos,
glucoprotenas, o
protenas no modificadas.

Estructura de
pseudomureina
Los componentes
entre parentesis no
siempre estan
presentes
2. Diferencias en la membrana
Los lpidos difieren en la presencia de hidrocarburos de cadena ramificada
conectados a glicerol mediante enlaces ter.
Los lpidos eubacterianos y eucariticos contienen glicerol unido a cidos
grasos mediante enlaces ster.
Ester bacteria eter archea











R= Acidos grasos de cadena larga (bacterias)
R= rerivados de cadenas de isopreno (archea)
LNEA (FILUM) EURYARCHAEOTA: GRUPOS
FILUM EURYARCHAEOTA
TERRESTRES
HALFILOS EXTREMOS: Halobacterium, Halococcus Natronococcus
METANGENOS: Methanobrevibacter, Methanosarcina, Methanobacterium,
Methanocaldococcus
TERMOACIDFILOS: Thermoplasma, Ferroplasma, Picrphilus
HIPERTERMFILOS: Thermococcus, Pyrococcus, Methanopyrus, Archaeglobus,
Ferroglobus
MARINOS ( NO CULTIVABLES)
FILUM CRENARCHAEOTA>
HIPERTERMFILOS
HBITAT TERRESTRES VOLCNICOS : Sulfolobus, Thermosphaera, Thermoproteus
HBITAT VOLCNICOS SUBMARINOS: Pyrodictium, Pyrolobus, Ignicoccus,
Desulfurococcus
PSICRFILOS MARINOS
FILUM KORARCHAETA
EURYARCHAEOTA HALFILOS
EXTREMOS : HALOBACTERIAS



CARACTERISTICAS GENERALES

Bacterias con diversa morfologa:cocos, bacilos, formas raras
Requieren elevadas concentraciones de NaCl (1,5M ) para crecer
Coloreadas por la presencia de Carotenoides
Viven a pH neutro y alcalino
Aerobios estrictos. Unas pocas especies son anaerobias
Quimiorganotrofos (Aminocidos o cidos orgnicos)
Algunas especies contienen Bacteriorrodopsina y usan la luz para obtener
energa
Gneros representativos: Halobacterium, Halococcus, Natronobacterium
Natronomonas..

MORFOLOGIA DE HALOBACTERIAS



Halobacterium salinarum

Halococcus morrhuae

PC glucoproteca

Halfilos alcalfilos
HBITAT HIPERSALINOS
NATURALES

Salinas


Depsitos de Carbonato Sdico en la
orilla


ARTIFICIALES

Superficie de alimentos en salazn
EURYARCHAEOTA METANGENOS

CARACTERISTICAS GENERALES
Morfologa diversa : formas cocoideas y bacilares
Anaerobios estrictos
Producen Metano a partir de diversos sustratos
Poseen enzimas y coenzimas nicos para dicho proceso
Contiene especies termfilas e hipertermfilas, entre ellas Methanopyrus, la
ms antigua de los Euryarchaeotas
Se encuentran en ambientes anaerobios ricos en materia orgnica: Sedimentos
marinos y de agua dulce, pantanos, cinagas, fuentes termales, rumen e
intestino de los animales..
Son uno de los principales grupos de microorganismos responsables de la
digestin anaerobia de fangos en las EDAR
De gran importancia prctica porque: el metano es una fuente de energa
excelente y poco contaminante
Favorecen el efecto invernadero
Gneros representativos: Methanospirillum, Methanobacterium, Methanopyrus,
Methanocaldococcus, Methanosarcina...

MORFOLOGA DE METANGENOS
SUSTRATOS PARA LA PRODUCCIN DE METANO


I. SUSTRATOS DE TIPO CO
2

DIXIDO DE CARBONO , CO
2
( H
2
)
FORMATO , HCOO
MONXIDO DE CARBONO, CO
II- SUSTRATOS METLICOS
METANOL, CH
3
OH
METILAMINA, CH
3
NH
3
+
DIMETILAMINA, (CH
3
)
2
NH
2
+

TRIMETILAMINA, (CH
3
)
3
NH
+

METILMERCAPTANO, CH
3
SH
SULFURO DE DIMETILO, (CH
3
)
2
S
III. SUSTRATOS ACETOTRFICOS
ACETATO, CH
3
COO
-

PIRUVATO, CH
3
COCOO
-


HBITAT DE LOS METANGENOS

I. SEDIMENTOS ANXICOS:
Fangos pantanosos
Sedimentos de lagos
II . TRACTO DIGESTIVO DE ANIMALES :
Rumen de vacas, ovejas, camellos etc ( Rumiantes)
Intestino grueso de animales monogstricos
Intestino de insectos celulolticos (termitas).
III.FUENTES HIDROTERMALES SUBMARINAS

IV.DIGESTORES DE FANGOS ACTIVADOS

V.ENDOSIMBIONTES DE PROTOZOOS ANAEROBIOS

EURYARCHAEOTA TERMOACIDFILOS
CARACTERSTICAS GENERALES

Incluye tres gneros que viven a elevada temperatura y pH cidos (acidez
extrema) : Ferroplasma , Picrophilus y Thermoplasma
Ferroplasma
Carece de Pared Celular
Quimiolitotrofo. Oxida el in ferroso a frrico
Acidfilo extremo
Crece en las minas de pirita junto a T. ferrooxidans y L. ferrooxidans generando
mayor acidez (Minas cidas)
Picrophilus
Posee una capa S
Es el mas acidfilo del grupo ( tolera pH 0,06) y muere a pH moderados
Presenta una distribucin atpica de los lpidos de membrana
Se encuentra en sulfataras


Thermoplasma :
CARACTERSTICAS Y HBITAT
Forma su propio linaje filogentico
Quimiorganotrofos
Aerobios facultativos
Crece a 60 C y pH 2
Genoma pequeo (1,5 mb)
DNA asociado a protenas similares a histonas
Recuerda a los Micoplasmas por la ausencia de
pared celular. En la MP contiene un Lpido
tetrater con Manosa y Glucosa.
Viven en pilas de carbn y de pirita
autocombustibles y Sulfataras volcnicas

EURYARCHAEOTA HIPERTERMFILOS

Contiene arqueas que se ramifican muy cerca de la base del rbol:
Pyrococcus, Thermococcus y Methanopyrus
Pyrococcus
Bola de fuego
Anaerobio
Fermentador
Requiere para crecer 106 C
Genoma pequeo, 1,73 mB
Proporciona Pfu (ADN Polimerasa )
Thermococcus
Anaerobio estricto. Azufre como aceptor de e-
Quimiorganotrofo (Protenas y azcares)
Crece a temperaturas entre 75-90 C
Vive en aguas termales anxicas
Methanopyrus

Es un Euryarchaeota hipertermfilo que produce Metano, slo a partir de H2 y
CO2
Su temperatura ptima de crecimiento son 100 C.
Contiene concentraciones elevadas de 2,3 difosfoglicerato disuelto en el
citoplasma
(Termoestabilidad)
M. kandleri posee en la membrana un tipo exclusivo de lpido, con enlace ter y
cadenas laterales insaturadas de geranilgeraniol (denota antigedad)
Vive en sedimentos submarinos y chimeneas negras (2000 m de profundidad)
Explica el origen de los hidrocarburos en sedimentos ocenicos con elevadas
temperaturas
OTROS EURYARCHAEOTAS HIPERTERMFILOS:
Archaeglobus y Ferroglobus
Archaeoglobus fuligdis
Hipertermfilo
Oxidante del in ferroso en anaerobiosis FeCO
3
+
NO
3
- Fe(OH)
3
+ NO
2
-
Reductor de Nitrato
Vive en chimeneas hidrotermales submarinas

Anaerobio, el sulfato es el receptor de electrones
(nico reductor de Sulfato)
Vive en sedimentos marinos caliente, 83 C
Contiene trazas de coenzimas de Metanognesis y
puede producir metano en cantidades pequeas
Filogenticamente muy relacionado con los
metangenos
Puente entre 2 mecanismos generadores de
energa: reduccin de azufre y Metanognesis
Su genoma contiene 2400 genes , muchos
parecidos a los metangenos, otros nicos


Metabolismo
caractersticas metablicas
Las Arqueobacterias presentan las siguientes
peculiaridades:
- No tienen gliclisis. En su lugar, siguen la ruta de Etner
Dondorof.
- Tienen ciclo de Krebs.
- DNA circular de pequeo tamao, cerca de la mitad del
de Escherichia coli.
- Genes organizados en operones.
- Las secuencias promotoras, es decir, aquellas que
controlan la expresin de un gen, poseen una mezcla de
caractersticas de bacterias y de eucariotas.


Metabolismo
Presenta diferencias en el catabolismo de la
glucosa, las vas de fijacin del CO
2
y la
capacidad de algunas bacterias de
sintetizar metano.
Las metanognicas
Hay por lo menos diez sustratos que se convierten en metano por la
accin de metangenos.
son los nicos seres vivos capaces de obtener energa acoplando la
oxidacin del hidrgeno molecular con el uso de CO
2
como aceptor
de electrones.
Los metangenos que crecen sobre H
2
+ CO
2
son autotrficos y el
CO
2
, sirve tanto de fuente de carbono como de aceptor de electrones.
Adems del CO
2,
hay una variedad de otros compuestos que algunas
especies metanognicas convierten en metano.
La formacin de metano a partir de H
2
+ CO
2
se considera del tipo
respiracin anaerbica, donde el CO
2
, es el aceptor de electrones.
Quimiolitotrofos:
4H2 + CO2 CH4 + 2H2O
Etapas involucradas en la formacin de
CH
4
a partir de CO
2
:

1. Activacin del CO
2

2. Reduccin a formil
3. Reduccin de hidroximetil-S-CoM a
metil-S-CoM
4. Formacin de metano
Bacterias metanognicas
Metanognicas:
Bacterias metanognicas
reductoras (auttrofos)
H
2,
CO
2

cido actico
(Acetato)
CO
2
CO
2

CH
4

Metanognicas:
Bacterias
metanognicas
acetoclasticas
Caractersticas de metanogenos
a) Methanospirillum hungatel (contraste de fases x2000) b)
Methanobrevibacter smithii d) Methanosarcina mazei e)
Mathenobacterium marismigri
Grupos archaea
Sulfolobus brierleyi: a) diametro aprox 1 um, capa
amorfa en lugar de pared, se observa la membrana
(M). SEM de sulfolobus en MoS2, a 60C y pH= 1.5-3.0
Thermoproteus tenax.