PEMBACAAN SADT

HARUN NURRACHMAT

Tahap-Tahap Pembuatan SADT dan Penilaiannya

1.Persiapan Kaca Objek
Untuk menghilangkan debu dan lemak :
-Digosok kuat-kuat dengan HCl 1N / H2SO4,atau
-Direndam beberapa jam(> 12 Jam) dalam campuran
ether dan alkohol sama banyak
2.Bahan Pemeriksaan
-Terbaik darah segar
-Darah yang dicampur dengan antikoagulan EDTA
(1,50 0,25 mg /ml darah )
3.Pembuatan hapusan (Two-Slides/Wedge Method)
-Letakkan 1 tts kecil darah, tengah kaca objek, sekitar 12 cm dari salah satu ujungnya
-Tanpa menunggu,letakkan kaca objek lain (kaca
pendorong) membentuk sudut sekitar 45 dengan kaca
objek

-Dorong ke belakang sehingga menyentuh tetesan darah

tadi.Tetesan darah akan menyebar sepanjang sepanjang
kaca pendorong.Pada saat ini,buat hapusan dengan
cepat namun halus (gerakan rata)
-Panjang hapusan yang baik sekitar 3-4 cm
-Ketebalan yang baik bila dibagian kepala:ertrosit
bertumpuk,namun ke arah ekor : eritrosit hanya
bersinggungan
4.Pengeringan
-Hapusan darah segera di keringkan pada suhu kamar
untuk mencegah distorsi eritrosit, jika pengeringan tidak
sempurna, partikel-partikel air akan terlihat setelah
pewarnaan.

5.Fiksasi
-Segera setelah kering,sediaan hapus segera
difiksasi.Bila hapusan dibiarkan tanpa fiksasi lebih dari 1
hari, maka plasma akan menyebabkan latar belakang
berwarna kebiruan
-Pastikan sediaan hapus benar-benar kering sebelum
memasukkannya kedalam larutan fiksasi
-Fiksasi dilakukan dengan merendam sediaan dalam
methanol selama 10-20 menit.Methanol yang digunakan
harus bebas dari aseton,karena aston akan
menyebabkan terbentuknya vakuola-vakuola pada
eritrosit

6.Pewarnaan
-Rutin yang dipakai adalah pewarnaan Romanowsky
-Komponen utama :
a.Azure B (trimethylthionin) yang bersifat basa
b.Eosin Y (tetrabromofluorescein) yang bersifat asam
Azur B akan mewarnai komponen sel yang bersifat
asam : kromatin,DNA dan RNA
Eosin akan mewarnai komponen sel yang bersifat basa :
granula eosinofil dan hemoglobin
-lamanya pengecatan 15-20 menit
-Pewarnaan yang terlalu lama akan menimbulkan
endapan,yang mempersulit melihat adanya benda-benda
inklusi dalam sel

Sediaan Apus Yang Baik

1.Permukaan licin,rata,tidak bergaris-garis,tidak
bergelombang dan tidak berlubang-lubang
2.Hapusan terakhir 1-2 cm sebelum ujung kaca objek
3.Leukosit tidak bertumpuk pada kepala maupun ekor
4.Lebih dari setengah hapusan harus cukup tipis, dimana
eritrosit hanya bersinggungan satu sama lain, namun
tidak bertumpukan
5.Pewarnaan
-Secara makroskopis sediaan berwarna pink
-Bebas dari endapan kelebihan zat warna
-Eritrosit berwarna orange/pink
-Granula:neutrofil keunguan/kebiruan, eosinofil orange sampai pink,
basofil biru tua/ungu
-Sitoplasma: neutrofil pink pucat, limfosit biru cerah, monosit biru
abu-abu pucat
-Inti : neutrofil dan limfosit biru keunguan tua, monosit ungu cerah
-Trombosit mengandung granul yang pusatnya berwarna merah
keunguan dikelilingi halo berwarna biru cerah

Pembacaan Preparat Apus Darah Tepi

Pembesaran 10 X (Obyektif)
1.Orientasi seluruh lapangan pandang
2.Periksa adanya sel-sel asing,parasit
3.Estimasi Jumlah Leukosit
Pembesaran 40 X (Obyektif)
1.Hitung Jenis Leukosit
2.Morfologi sel Darah
Pembesaran 100X (Obyektif)
1.Penegasan
2.Bangunan Khas
3.Estimasi jumlah Trombosit (Barbara Brown)

DIBEDAKAN 3 BAGIAN ( KEPALA, BADAN, & EKOR )

SELURUH BADAN DIBAGI 6 ZONE BERDASARKAN SUSUNAN
SDM.

ZONE I
: Z. IRREGULER, TAK TERATUR, PADAT
BERGEROMBOL ( 3 % )

ZONE II : Z. TIPIS, TAK RATA, OVER LAPING , BERDESAK

DESAKAN ( 14 % )

ZONE III : Z.TEBAL, BERGEROMBOL, ROULEAUX, LUAS ( 45 % )

ZONE IV : Z. TIPIS, SAMA Z. II ( 18 % )

ZONE V : Z. EVEN, REGULER, RATA , TIDAK BERTUMPUKAN ,

TIDAK BERDESAKAN , BENTUK MASIH ASLI / UTUH.(
11% )

ZONE VI : Z. SANGAT TIPIS , TIDAK PADAT, LEBIH LONGGAR

DIBANDING Z.II & Z. IV ( 9 % )

PEMILIHAN DAERAH PEMBACAAN

- ZONA IV & V
- PERTIMBANGAN DISTRIBUSI
JENIS SEL

AXIS
TEPI

Morfologi Eritrosit
1.Anisositosis
2.Poikilositosis
3.Warna
4.Benda Inklusi
5.Susunan

NORMOSIT

ANISOSITOSIS

POIKILOSITOSIS

PEWARNAAN ERITROSIT

KROMASI

BERDASARKAN DIAMETER CENTRAL PALLOR

(DAERAH PUCAT DI TENGAH)

NORMOKROM
NORMOKROM

CP < DIAMETER
ERITROSIT

HIPOKROM

POLIKROMASI

WARNA ERITROSIT
NORMAL + KEBIRUAN
(RETIKULOSIT)

RETIKULOSIT

MEGALOSIT

MIKROSIT

BENTUK ERITROSIT
OVALOSIT

ELIPTOSIT

TEAR DROP CELL

SEL BURR

SEL TARGET

AKANTOSIT

SFEROSIT

BLISTER CELL

STOMATOSIT

HELMET CELL

SEL CERUTU

FRAGMENTOSIT

SEL SICKLE (SABIT)

BENTUK NORMOSIT NORMAL

CENTRAL PALLOR
DIAMETER :1/3 DARI DIAMETER SEL

SEL TARGET

PENYAKIT HATI
POST SPLENECTOMI
THALASSEMIA

SFEROSIT

SFEROSIT HEREDITER
ANEMIA HEMOLITIK IMUN
KELAINAN HATI
DIC
PENGHANCURAN CEPAT DI RES

ELIPTOSIT

ELIPTOSITOSIS HEREDITER
DEFISIENSI BESI

SEL CERUTU
CIGAR CELL

AN. DEFISIENSI Fe

STOMATOSIT

STOMATOSITOSIS HEREDITER
ANEMIA HEMOLITIK IMUN
KELAINAN HATI
ALKOHOLISME

Sickle cell disorders

ACANTOSIT

KELAINAN PARENSIM HATI

POST SPLENECTOMI
ABETALIPOPROTEINEMIA
KERACUNAN ALKOHOL

SEL FRAGMENT
- ANEMIA HEMOLITIK MIKROANGIOPATI
( DIC, TTP )
- KATUB JANTUNG BUATAN
- COMBUTIO

SEL LEPUH (BLISTER )

- AN.HEMOLITIK MIKROANGIOPATI
- KATUB JANTUNG BUATAN
- COMBUTIO

AN. DEF. Fe
MYELOFIBROSIS

SEL BURR

UREMIA
ULCUS DENGAN PERDARAHAN
Ca LAMBUNG

SEL KRENASI

MENGKERUT ok CAIRAN HIPERTONIS

Benda Inklusi Eritrosit

BASOPHILIK STIPLING GRANULA GRANULA KEBIRUAN TERSEBAR

RATA
CAT PEARL: ( - )
INTOKSIKASI Pb
THALASSEMIA
AN. MEGALOBLASTIK

BENDA PAPPENHEIMER

GRANULA GRANULA SIDEROTIK,

WARNA GELAP KECIL,BULAT & JUMLAH 1-2.
CAT PEARL : (+)
AN. SIDEROBLASTIK
POST SPLENECTOMI

HOWELL JOLLY

BENDA HOWELL JOLY : SISA INTI NORMOBLAST

BENTUK SFERIS BULAT HITAM, 1-2 BUAH
AN.HEMOLITIK
POST SPLENECTOMI
AN.MEGALOBLASTIK
HEMOGLOBINOPATI

CINCIN CABOT

CINCIN CABOT : BENTUK SPT CINCIN, TALI LASO,8.

BENTUK SFERIS BULAT HITAM, 1-2 BUAH, SISA INTI
POST SPLENECTOMI
AN.HEMOLITIK
AN.MEGALOBLASTIK

BENDA HEINZ

BENDA SFERIS IRREGULER, EKSENTRIK

BCB : ( + )
TAK TERLIHAT dg CAT ROMANOVSKY

Susunan Eritrosit

AUTO AGLUTINASI

SALING BERGEROMBOL BATAS TAK JELAS

DILIHAT DI EKOR, ZONE VI, V
Pd: Cold Aglutinin

FORMASI ROULEAUX

TERSUSUN spt UANG LOGAM yg RUBUH,

BATAS JELAS
FORMASI ABNORMAL PADA ZONE V , VI
( NORMAL DI ZONE III )
Pd: Myeloma Multipel

MENILAI GAMBARAN LEKOSIT

Estimasi jumlah lekosit
Melakukan hitung jenis sel / 100 lekosit
Zona VI - IV
Normoblas dilaporkan / 100 lekosit
AMN Dilaporkan / 100 Lekosit
Pelaporan tentang adanya :

Granula toksik
Vakuolisasi
Hipersegmentasi (def. Vit. B12 / Asam Folat)
Hiposegmentasi (Anomali Pelger Huet)

PEMILIHAN DAERAH PEMBACAAN

- ZONA IV & V

Hitung Jenis Leukosit

Distribusi Sel (Preparat Apus)
-Limfosit
-Monosit
-Neutrofil

: Di Tengah
: Di Tepi/Ekor
: Di Tepi/Ekor

Neutrofil segmen darah tepi

Ciri-ciri

Ukuran sel: 14 - 20 m

Bentuk sel: oval atau bulat

Warna sitoplasma: pink

Granularitas: sedikit azurofilik

neutrofilik

Bentuk inti: berlobus(N < 5

lobus)

Tipe kromatin: padat

Ratio inti/sitoplasma: rendah

atau sangat rendah

Nukleolus: tak terlihat

Persentase:

darah: 50 - 70 %

sumsum tulang: 5 - 20 %
Fungsi
Pertahanan thd infeksi akut
fagositosis

Neutrofil batang dalam darah tepi

Ciri-ciri :

Ukuran sel: 14 - 20 m

Bentuk sel: oval atau bulat

Warna sitoplasma: pink

Granularitas: sedikit azurofilik

neutrofilik,

Bentuk inti: lonjong,

semicircular

Tipe kromatin: padat

Ratio inti/sitoplasma: rendah

atau sangat rendah

Nukleolus: tak terlihat

Persentase:
darah: 2 - 5%
sumsum tulang5
tulang5 - 20 %

Eosinofil matur dalam darah tepi

Ciri-ciri

Ukuran sel: 15 - 25 m

Bentuk sel: oval atau bulat

Warna sitoplasma: pucat,

ditutupi granul

Granularitas: eosinofilik
(orange-red)banyak

Bentuk inti: lobulated,

semicircular

Tipe kromatin: padat

Ratio inti/sitoplasma: rendah

atau sangat rendah

Nukleolus: tak tampak

Persentase
darah: 1 - 4 %
sumsum tulang < 2 %
Daya fagositosis & gerak lambat
Me pd : alergi, peny parasit

Eosinofil matur dalam darah tepi

Basofil dalam darah tepi

Ciri-ciri :

Ukuran sel: 12 - 18 m

Bentuk sel: bulat atau oval

Warna sitoplasma: merah

jambu, ditutupi granul dan
nukleus

Granularitas:
Granularitas: basofilik
gelap, ukuran bervariasi.
Menutup inti

Bentuk inti: bentuk oval

pada basofil muda dan
berbentuk lobular pada
basofil dewasa

Tipe kromatin: padat,

pucat

Ratio inti/sitoplasma:
rendah atau sangat rendah

Nukleolus: tak tampak

Persentase:
darah 0 - 1 %
sumsum tulang < 1 %

Fungsi tdk jelas, sifat fagositik (-), berisi heparin, sering ditemukan bersama eosinofil

Limfosit dalam darah tepi

Ciri-ciri :
- Ukuran: 10 - 15 m
- Bentuk: bulat, kadang-kadang oval
- Warna sitoplasma: biru
- Granularitas: tidak ada
- Bentuk inti: bulat atau agak oval
-Tipe kromatin: homogen, padat
-Rasio inti/sitoplasma: tinggi atau
sangat tinggi
- Nukleolus: tidak terlihat, kadangkadang hampir tidak terlihat , satu
nukleolus kecil
- Persentase:
- darah: 20 - 40 %
- sumsum tulang: 5 - 20 %

Gerak aktif
Peran faktor imunologik

Catatan: Limfosit kecil dalam darah.Juga ada satu skistosit.

Monosit dalam darah tepi

Ciri-ciri :
Sel besar
Bentuk tdk bulat
Sitoplasma ungu
/ biru halus,
bervakuola
Bentuk nukleus
tidak teratur
Daya fagositik
Daya imunologik

EOSINOFILIA
- ALERGI
- INVESTASI PARASIT

GRANULASI TOKSIK

HIPERSEGMENTASI NETROFIL

ANEMIA PENISIOSA

PELGER HUET

MENILAI GAMBARAN TROMBOSIT

ESTIMASI JUMLAH TROMBOSIT :
pembesaran objektif 100 x
X per lapangan pandang x 20.000
Normal : 8 20 trombosit /
lapangan pandang

TROMBOSIT BESAR /
GIANT

THROMBOCYTE

TROMBOSIT NORMAL

TROMBOSITOPENIA

TROMBOSITOSIS

TANPA AGREGASI

AGREGASI TROMBOSIT