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OBJETIVOS
Que el alumno aprenda las tcnicas de
preparacin de frotis, fijacin y
coloraciones ms utilizadas en el estudio
microbiolgico ya sea a partir de muestras
directas o de cultivos bacterianos.
Identifique las diferentes formas
bacterianas y de importancia clnica.
Conocer el fundamento de las respectivas
coloraciones asi como la aplicabilidad de
las mismas.
MUESTRA
COLORACION Y
OBSERVACION
MICROSCOPICA
CULTIVO
ANTIBIOGRAMA
IDENTIFICACION DEL
AGENTE PATOGENO Y
DETERMINACION DE SU
SUSCEPTIBILIDAD A
ANTIBIOTICOS
IMPORTANCIA
Gracias a las tinciones podemos examinar mejor la forma y el tamao de los microorganismos lo
cual es tarea difcil en una observacin directa.
Nos permite adems, por medio de tinciones especiales, estudiar diferentes estructuras de las
clulas tales como flagelos, esporas, cpsulas, paredes celulares
Estos pueden emplearse para distinguir entre tipos diferentes de clulas
Colorantes
COLORANTES: Tipos
a) Sales colorantes: ms comnmente usados
bsicos: Consisten en un catin coloreado unido a un
anin incoloro. Tien la clula bacteriana uniformemente
(cidos nucleicos y los polisacridos cidos )
(cromatina nuclear de pro y eucariotas)
(ms usados en citologa bacteriana).
Ej: clorhidrato (-) de azul de metileno (+). la safranina, la
fucsina bsica, el cristal violeta
COLORANTES: Tipos
b) Colorantes liposolubles
Se combinan con los componentes
lipdicos de la clula, usados para
revelar la localizacin de los depsitos
de grasa. Ej. Negro Sudn.
TIPOS DE TINCIONES
Pueden ser
SIMPLES
Un solo colorante
Tie o no la clula
Ej.:
Azul de Metileno
Safranina
Nigrosina
DIFERENCIALES
SELECTIVAS
Ms de un colorante
Uno o ms colorantes
Clulas con diferente Estructuras celulares
composicin qumica con distinta composicin
Importancia taxonmicaqumica
Ej.:
Ej.:
Tincin GRAM
Tincin de Esporas
Tincin AAR
Tincin de Flagelos
Tincin de Paredes Cel.
Tincin de Corpsculos
Metacromticos
TIPOS
CON CALOR (O MTODO DE KOCH)
FIJACIN QUMICA: alcohol metlico, formalina al 5 % (v/v), licor de Hoffman
(partes iguales de etanol absoluto y ter)
Metanol
Lunes
Frotis y fijacin
MUESTRA
Tincin
1.- Cubrir la preparacin con Azul de 2.- Lavar con agua, dejar secar y observar al
microscopio
Metileno 1
Micrococcus
luteus
Observacion de
levaduras en
muestras teidas
con coloracion
simple (colorante
acido Nigrosina)
Lunes
Tincin negativa.
cpsulas tanto bacterianas como de levaduras, esporas que se observan como cuerpos
refringentes y espiroquetas
Lunes
Tincin
MUESTRA
2.- Tomar la muestra
con el asa de siembra
1.- Cubrir la
preparacin con
Cristal Violeta 1
Coloracin Gram
Gram positiva
Gram negativa
Morfologa Bacteriana
cocos en cadena
Tetradas
Sarcinas
cocos en racimo
diplobacilo
bacilos en cadena
empalizadas
bacilos lado con lado
o en figuras X Y V
Bacilos Gram-positivos