Coleccin, conservacin y

transporte
de muestras
microbiolgicas
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Para desarrollar un estudio microbiolgico

es necesario que previamente se
conozcan:

El propsito del estudio

Los objetivos
Las metodologas
Las variables
Los procedimiectos de
anlisis
Las metas a alcanzar.

Mara Cecilia Arango Jaramillo

TIPOS DE ESTUDIOS

Los estudios microbiolgicos se

clasifican de acuerdo con sus objetivos
y el tiempo de ejecucin en tres tipos:

Estudios base
Estudios de monitoreo
Estudios de evaluacin
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Estudios base

Permite un conocimiento global del

sistema y de las comunidades de
microorganismos.
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Se considera que los ecosistemas

dulceacucolas tropicales manifiestan
cambios ambientales y biolgicos
considerables, dependientes de las
temporadas de sequa y lluvia.

Mara Cecilia Arango Jaramillo

CONDICIONES AMBIENTALES
FLUCTUANTES

Estrategia r
Mara Cecilia Arango Jaramillo

CONDICIONES AMBIENTALES
ESTABLES

Estrategia K
Mara Cecilia Arango Jaramillo

MONITOREO

Se extiende en el tiempo ( a travs de

los aos)
Su propsito: observar
peridicamente ecosistemas
susceptibles de cambios (positivos o
negativos), por alteraciones de
origen natural o antrpicas, tanto
puntuales como continuos.
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Permiten definir:
Si la capacidad ambiental de un
ecosistema se est superando
O
si los tensores estn siendo
asimilados adecuadamente por estos
(disolucin, dispersin, mezcla,
descomposicin, biodegradacin,
oxidacin u otros).

As mismo, su implementacin puede

darse para observar la recuperacin
de ecosistemas deteriorados.
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Los programas de monitoreo

pueden llevarse a cabo para:
Valorar planes de manejo
ambiental
Evaluar efectos ambientales
Seguimiento continuo a procesos
industriales.
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Muestreos no programados deben hacerse:

Cuando ocurran cambios importantes

En caso de presentarse condiciones
anmalas que puedan conducir a
variaciones en la calidad del medio
(positivas o negativas).

Mara Cecilia Arango Jaramillo

A lo largo del programa de monitoreo,

se debe mantener contacto
permanente con el ecosistema bajo
estudio
Para no llegar a conclusiones errneas
o falsas interpretaciones

Mara Cecilia Arango Jaramillo

El cotejo de resultados de un tiempo

con los ya existentes, permite inferir
cuales sern las condiciones futuras.

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Estudios de evaluacin

Estos estudios tienen lugar cuando

condiciones de contaminacin de
origen natural o antrpico, se
producen en forma espordica pero
en magnitudes importantes,
causando un cierto deterioro del
ecosistema con cambios en la
comunidad de microorganismos.
Mara Cecilia Arango Jaramillo

DISEO DE ESTUDIOS
MICROBIOLGICOS
Evaluacin

preliminar
Eleccin de los microorganismos a muestrear
Eleccin de variables fsico qumicas
Muestreo
Ubicacin de estaciones
Tipo y nmero de muestras
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Evaluacin preliminar

La evaluacin preliminar es
la etapa en la cual se
realiza la planificacin del
estudio y requiere del
tiempo necesario para
aclarar todos los
interrogantes que se
presenten.
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Paralelamente se debe llevar a cabo

un reconocimiento del rea con el
propsito de:
Precisar los principales gradientes
ambientales naturales
Las variables antropognicas
presentes
Un premuestreo es necesario para
definir los anlisis que se harn y los
equipos de muestreo
Definir el tratamiento numrico que
habr de implementarse con cada
variable Mara Cecilia Arango Jaramillo

La planeacin de
detallada del estudio
evitar resultados intiles,
sesgados o errneos,
errneos o
incrementos no
programados de esfuerzo,
costos y tiempo.

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Validez de los resultados del

anlisis de aguas
Dependen de
El nmero de muestras que
adecuadamente representen el cuerpo
de agua o el efluente.
Calidad estndar
Lmites permisibles

Sitios de muestreo y registros

previamente planeados y conocidos
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Recipientes para la toma de

muestras

Frascos de muestreo:
muestreo 125 ml
como mnimo, tapa metlica hermtica.

Limpieza:
1. Lavado con detergente y agua
caliente
2. Enjuague con agua caliente 3 veces
3. Enjuague con agua destilada
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Agente desclorinizador.
Para muestras tratatadas con cloro.
Tiosulfato de Na al 10%, 0,1 ml por
frasco de 125 mlsuficiente para
neutralizar 15 mg de cloro.

Cobertura del frasco:

frasco papel Kraft,
aluminio o pelcula plstica

Esterilizacin:
Autoclave: 121C por 15 minutos
Calor seco 170C por 2 horas
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Tcnicas de muestreo

Primero las muestras de

estaciones menos contaminadas
evitar contaminacin cruzada
Nunca muestras compuestas
Aguas profundas: Botella Kemerer

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Aguas superficiales: 15 - 30 cm de
profundidad
Siempre en contra de la corriente

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Abrir el frasco slo

en el momento del
muestreo

Llenado de frascos
hasta 2-3 cm antes
de la tapa para
agitar

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Identificacin y manejo de
muestras
Caractersticas de las etiquetas:
Limpias
Impermeables
Indelebles
Fijas, pero fciles de remover
Tamao suficiente para consignar los
datos
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Muestras sin
etiqueta o con
etiquetas deficientes
no son aceptadas
en el laboratorio.

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Nombre de la entidad o del estudio

Estacin Fecha Hora
Muestra No.
No.
Localizacin de la estacin Colector
Tipo de anlisis a practicar Preservativo
Tipo de muestra
Comentarios
Secretara de Salud Municipio de El Carmen
Estacin Fecha
Hora
Muestra No.
No. 4
11-08-01 13:00
2
Antes de la bocatoma Jairo Prez
Colimetra completa Preservativo:
Tiosulfato de Na 10%
Simple
Cultivos
abonados
con gallinaza hasta la
Mara Cecilia Arangoorilla
Jaramillo de la quebrada

Registro de datos de campo

Registro de datos de campo
Hoja No. Colectores:
Estacin Nmero Fecha de
Hora
de la coleccin Toma Entrega
muestra

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Otros

Registro de datos de campo

Hoja No. Colectores:
2/2
Javier Trujillo y Sandra Pelez
Estacin Nmero Fecha de
Hora
Otros
de la coleccin Toma
Entrega
muestra
Antes
1/3
28-08-01 8:00
14:35 Epoca de lluvia
de
la
Basuras en el
escuela
lecho
Alrededores
abonados con
gallinaza
Agua turbia
Riberas
erosionadas
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Seleccin de sitios de muestreo

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Lago o represa (recreacin)

D
Piscinas
diariamente
en
temporadas
de mximo
uso

B
Mara Cecilia Arango Jaramillo

C
E

Abastecimiento de agua
A

D
C, a la profundidad de la toma
D
D
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Ro de orden mayor

60 m

1K
m

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Muestreos en la red
Se necesita una
cobertura
sistemtica para:
Detectar averas
Contaminacin
cruzada

Frecuencia de la toma
de muestras:
Tablas de la EPA
Legislacin vigente
Standard Method

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Frecuencia del muestreo:

Decreto 475 de 1998, Calidad del agua potable

Poblacin servida

25 a 1.000
1.001 a 2.500
2.501 a 3.300

Nmero
mnimo de
muestras
por mes
1
2
3

Intervalo
mximo por
muestras
consecutivas
Mensual
Quincenal
C/10 das

180
450

6 por da
7 por da

330
360

11 por da
12 por da

450
480

15 por da
16 por da

320.001 a 450.000
450.001 a 600.000

1.230.001 a 1.520.000
1.230.001 a 1.520.000

3.020.001 a 3.960.000
3.960.001 o ms

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Toma de muestras en la red

Dejar correr
el agua

Flamear

Tomar la muestra
Si utiliza
preservativo, no
la deje rebosar
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Dnde tomar las muestras de la red?

Edificios municipales y pblicos

Parques
Escuelas
Estaciones de gasolina
Teatros
Aeropuertos
Restaurantes
Plantas industriales
Residencias privadas
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Transporte de muestras

Refrigeradas, evitar que

el hielo las cubra
Fijarlas para evitar roturas

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Almacenamiento de muestras

0C a 4C
6-12 horas en refrigeracin
30 horas aguas tratadas
< 6 horas aguas residuales

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Seguridad

Parte de la
confiabilidad
depende de la
vigilancia y
custodia de
las muestras

Ellas son la base

de obras o
acciones legales
Debe
demostrarse
posesin fsica o
registros

Mara Cecilia Arango Jaramillo

El colector
de las
muestras es
responsable
de ellas
hasta su
entrega en
el laboratorio

Mara Cecilia Arango Jaramillo

El laboratorio:

Es responsable de las
muestras que se le
entreguen
Debe registrar su
entrada y los
resultados del anlisis,
la fecha de entrega de
resultados y la de
destruccin de la
muestra

Mara Cecilia Arango Jaramillo

El laboratorio debe
utilizar mtodos estndar
de acuerdo a la legislacin vigente
Los laboratorios que analicen agua
para consumo humano debern llevar
un programa de aseguramiento de la
calidad que garantice los resultados
(Decreto 475/98)
Mara Cecilia Arango Jaramillo

El coordinador
del estudio debe
recibir copia del
registro de
laboratorio.
El original queda
archivado en el
laboratorio

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Para tener en cuenta

Manipule la muestra lo menos

posiblemuchos microorganismos
sufren estrs o mueren
Las muestras deben ser manejadas
por el menor nmero de personas
Mara Cecilia Arango Jaramillo
posible

Utilice tcnicas de muestreo estndar

Use cuaderno de campo para registrar
datos de cada muestra

Mara Cecilia Arango Jaramillo

La de la tapita oxidada era la

de la estacin 2 o 3?
La estar confundiendo con
la muestra 12 que tiene
la tapa rayada?

Fije las etiquetas en el

campo antes de tomar
la muestra

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Sitios de
muestreo y
polucin visible
deben ser
registrados con
fotos

Mara Cecilia Arango Jaramillo

El contacto con el laboratorio

Contacte un
laboratorio
especializado en
anlisis
microbiolgico de
aguas: garantiza
que tiene
estandarizados los
anlisis

Hable con las

personas
encargadas sobre el
tipo de anlisis que
necesitar, la
frecuencia de
muestreo, el
propsito y la
duracin del estudio

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Averige en el laboratorio:
Los das y horas en los que el laboratorio
recibe muestras para anlisis
microbiolgico.
El nmero de muestras que le pueden
recibir simultneamente
Los requerimientos del laboratorio para la
entrega y procesamiento de muestras
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Anlisis microbiolgicos
corrientes:

Microorganismos hetertrofos:ufc/100 ml
Su presencia se utiliza para indicar la
eficiencia en la reduccin de
microrganismos en procesos de
sedimentacin, cloracin, filtracin

Mara Cecilia Arango Jaramillo

NMP coliformes totales: No. /100 ml

Su presencia significa que hay que tratar
el agua, pero no significa necesariamente
contaminacin fecal.
Esta contaminacin puede provenir del
suelo, el agua, etc.

Mara Cecilia Arango Jaramillo

NMP coliformeds fecales : No. /100 ml

Significan contaminacin fecal de
origen humano o animal.
Se debe buscar el origen, pero en
ambos casos puede haber
patgenos
Su nmero es igual o menos que el
de los coliformes totales
Mara Cecilia Arango Jaramillo

NMP enterococos : No. /100 ml

Los estreptococos confirman
contaminacin fecal cercana y reciente
Los estreptococos menos que los
coliformes

Enterovirus : No. Ufc (calvas)/ml

En estudios limnolgicos se utiliza el

ndice de saprobidad

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Decreto 475 de 1998, Calidad del agua potable

Tcnica utilizada
Microorganismos Filtraci
Sustrato definido
Tubos mltiples de
indicadores
n por
fermentacin
membra
aceptable hasta el
na
ao 2000
Coliformes
0
UFC 0 microorganismos
<2
3
3
totales
/100 cm /100 cm
microorganismos
/100 cm3 negativo
Escherichhia coli 0
UFC 0 microorganismos Ninguna muestra
/100 cm3 /100 cm3
de agua potable
debe contenerla en
una muestra de100
cm3
independdienteme
nte del mtodo

Se recomienda
un valor mximo de 100 UFC /100 cm3, para
microorganismos mesfilos, como prueba
complementaria de calidad microbiolgica del agua
Mara Cecilia Arango Jaramillo

Control de calidad microbiolgica del

agua potable:
Libro de registro de calidad del agua
% Aceptabilidad = Na X 100
Nt
Na = Nmero de muestras
aceptables:
cumplen
con
requisitos Art 25
Nt = Nmero total de muestras
por mes: total de muestras
analizadas y registradas
Mara Cecilia Arango Jaramillo