Microscopio

Concepto
El microscopio es un
instrumento que, por
medio de lentes, amplifica
imgenes y permite
observar objetos y
organismos no visibles a
simple vista.
En la actualidad el
microscopio es un
instrumento de uso
cotidiano en los
laboratorios de diagnstico
e investigacin.

Historia
A ciencia cierta no se tiene
registro del primer microscopio de
la historia, pero se le atribuye al
ptico holands Zacharas
Janssen entre los aos de 1590 y
1600. As mismo, se dice que fue
Galileo Galilei quien
invent el microscopio
hacia el ao de 1610.

Fue Giovanni Faber de Bamberg

quin, en 1625 acua la palabra
microscopio por su similitud con
telescopio.
Para el ao de 1674, Anton van
Leeuwenhoek perfeccion el
microscopio usando lentes
pequeas, inventa el microscopio
simple.

 La necesidad de obtener mayor poder de

resolucin para el estudio de la ultraestructura
del material biolgico condujo a la bsqueda de
otros medios o fuentes luminosas de
longitudes de onda menores que incrementaran
esta capacidad.
La obtencin de radiaciones con longitud de
onda menor que la de la luz visible se
consigui tras los hallazgos de L. de Baglie
(1924), quien demostr el comportamiento de
los electrones, y los resultados de Brush
(1926), que prob que los electrones emitidos
por un filamento de tungsteno precalentado
podan enfocarse por campos magnticos.
As, en 1932 aparece el microscopio electrnico
gracias a Ruska y Knoll.

En 1981, Heinrich Rohrer y Gerd Binnig,

dos cientficos del laboratorio IBM de
Zrich, idearon el microscopio de efecto
tnel, y abrieron las puertas a este tipo
de manipulacin. Debido a su invento,
en 1986 fueron galardonados con el
premio Nobel de Fsica.
Por ltimo, en 1985 Binnig y Rohrer
desarrollan el microscopio de fuerza
atmica.

Tipos de microscopio
A grandes rasgos, se tienen dos
principales tipos de microscopios:
el microscopio fotnico y el
microscopio electrnico, cada uno
con subtipos especializados para
diversas funciones y aplicaciones.

Microscopia fotnica
Los microscopios se
clasifican en simples, es
decir, aquellos que estn
constituidos por una sola
lente, y compuestos, o
integrados por dos o ms
lentes.
Se conocen como
fotnicos o de luz a los
microscopios compuestos
que usan como fuente
luminosa luz blanca o
ultravioleta.

Se conocen varios tipos de

microscopios fotnicos segn sea
el tipo de luz e iluminacin que
utilicen; as estn disponibles el de
campo claro, campo oscuro,
contraste de fases, fluorescencia,
luz polarizada, estereoscpica e
interferencias de Nomarski y Jamin
Lebedeff.

El microscopio est formado por tres sistemas:

1. Sistema mecnico:
Base o pie
Brazo o columna
Platina (con perforacin central y pinzas o carro)
Tornillos macromtrico y micromtrico
Engranajes y cremallera
Portaobjetitos con mecanismo de revlver
Tubo de microscopio
Cabezal
2. Sistema ptico
Condensador
Objetivos
Prismas
Ocular
3. Sistema de iluminacin
Fuente luminosa
Restato
Filtros
Diafragma

Microscopios fotnicos
Microscopio de campo
claro
La imagen muestra
estructuras iluminadas
(clulas,
microorganismos y
otros) sobre un fondo
tambin iluminado. Se
utiliza sobre todo para la
observacin de muestras
teidas o contrastadas y
se es precisamente su
uso ms frecuente el
laboratorios.

Microscopio de campo oscuro

La imagen proyecta
estructuras brillantes e
iluminadas (clulas y
diversos microorganismos)
sobre un fondo oscuro
(negro). Se emplea para
analizar clulas sin teir,
probablemente vivas dado
que no es necesario
procesarlas.

Microscopio de contraste de
fases
La imagen de las estructuras
se observa en diferentes tonos
de claro y oscuro, de acuerdo
con las distintas densidades
que posea la muestra; el fondo
aparece poco iluminado y se
logra una imagen contrastada.
Es el microscopio ms usado
para observar clulas vivas;
sin teir permite observar
procesos tales como la mitosis
y otros de manera dinmica.

Microscopio de fluorescencia
La imagen de las zonas o puntos que
quedan marcados con fluorescencia es de
un color brillante. Por lo general, las
estructuras aparecen poco iluminadas, lo
cual permite que la marca fluorescente
resalte y permita observarse con facilidad.
Se emplea para detectar compuestos
fluorescentes que se hallen el los tejidos.
Su ejemplo ms difundido es el de fines
diagnsticos y de investigacin.

Microscopio de luz polarizada

El empleo de este tipo de luz permite
diferenciar en la muestra zonas
isotropas, que se muestran en la imagen
como zonas oscuras, de anisotropas y
aparecen en la imagen como zonas
claras. Permite tambin detectar la
presencia de cristales. Empleada en
ciencias biomdicas.

Microscopio de interferencia
de Nomarsky
Este tipo de microscopio
permite observar una
imagen de relieve de las
estructuras como su
caracterstica principal.
Es un sistema poco
empleado por su costo.

Microscopio de interferencia
de Jamin Lebedeff
La principal caracterstica
de la imagen de este
microscopio es que se
observa en colores,
aunque la muestra no se
haya teido. Se utiliza
para el anlisis de la
composicin y el peso
celular, pero es de uso
restringido.

Microscopio estereoscpico
Esta variedad de
microscopio forma
imgenes amplificadas y
tridimensionales de las
estructuras en
observacin. El nmero de
aumentos que proporciona
suele ser menor que el
conseguido con el
microscopio de campo
claro. Se utiliza con mayor
frecuencia para la
observacin de fragmentos
de rganos u rganos
completos, como auxiliar
en la diseccin de
estructuras pequeas.

Microscopia
electrnica
Microscopio electrnico de
transmisin
El desarrollo del microscopio
electrnico lo iniciaron en 1932
Knoll y Ruska, quienes
publicaron una descripcin del
primer microscopio electrnico
de transmisin (MET), que
puede considerarse el prototipo
de los modernos instrumentos.
Con l se alcanzan aumentos
de 1000 a 450000 veces, dado
que la longitud de onda de sus
radiaciones no es una distancia
constante, sino que se
correlaciona con velocidad a la
que viajan sus partculas y que
depende del voltaje aplicado al
microscopio.

En esencia, el MET es un tubo

de rayos catdicos en el que se
crea un vaco mediante bombeo
constante. Los electrones se
generan en el can, desde el
ctodo, que es un filamento de
tungsteno calentado por
corriente elctrica; luego se
emiten electrones, atrados y
acelerados mediante una
diferencia de potencial elevada,
lo que origina un haz
monoenergtico y
monocromtico. Este haz se
enfoca mediante campos
electromagnticos que actan
como una lente condensadora.

La corriente que pasa a travs de los

lentes modifica el campo
electromagntico en el interior de la
columna y ello hace posible controlar el
enfoque. Al chocar los electrones con la
muestra unos se dispersan del haz y
otros no. Los que no lo hacen
siguen el trayecto hacia la
lente objetivo, que obtiene la
correspondiente imagen
aumentada y los electrones
prosiguen su curso a travs de
una o dos lentes
electromagnticas proyectoras; stas
suministran imgenes an mayores que
se proyectan sobre una pantalla
fluorescente cubierta con cadmio y zinc,
que emite radiaciones de onda mayor
para poder visualizar la imagen.

Microscopio electrnico de barrido

El MEB se utiliza en biologa desde
1960. Tiene utilidad para observar
la superficie de la muestra y
reconocer el tamao, forma y
organizacin del espcimen. La
capacidad de amplificacin es de
20 a 50000 y la profundidad de
campo 300 veces mayor en
comparacin con el MET.

 El MEB es similar al
MET, con la
diferencia de que el
haz de electrones no
pasa a travs de la
muestra, sino que
interacciona con su
superficie y a travs
de sta rebotan los
electrones. Por
consiguiente, el haz
de electrones barre
la superficie de la
muestra y libera
electrones captados
por un centellador de
carga positiva. La
imagen observada
sobre este tubo es
tridimensional.

Microscopio de efecto tnel

Este sistema basa su funcionamiento en
un efecto cuntico, denominado efecto
tnel, que se da en distancias menores a
la milmillonsima parte de un metro (109m = 1 nm, un nanmetro). El control de
este tipo de fenmeno es lo que nos
permite hacer topografa de superficies a
nivel atmico.