Qu es la Citogentica?

Una parte de la Gentica

que se encarga del estudio
de los cromosomas
humanos.
Finalidad de identificar las
alteraciones cromosmicas
numricas y estructurales.

EUCROMATINA:
Cromatina laxa, menos
condensada que vuelve al
estado disperso.

HETEROCROMATINA:
El 10% del material
cromosmico en la mayora
de las clulas permanece en
forma condensada durante la
interfase.
Esta cromatina condensada
se observa se observa en la
periferia del ncleo.

H. CONSTITUTIVA:
Permanece en estado condensado
en todas las clulas y en todo
momento, por lo tanto representa el
ADN permanentemente silencioso.
El ADN consta principalmente de
secuencias altamente repetitivas y al
parecer est desprovisto de genes
que codifican protenas.

H. FACULTATIVA:
Es una cromatina especficamente
inactivada durante ciertas fases de la
vida de un organismo.
Inactivacin del cromosoma X.

Cromatina Nuclear
La Heterocromatina Facultativa

El ADN en los
cromosomas
metafsicos debe
acortarse unas 10.000
veces por un sistema
empaquetamiento
muy eficiente.

Organizacin Molecular de los Cromosomas Humanos

Nucleosoma: El menor nivel
de organizacin de los
Cromosomas.
El empaquetamiento ordenado
del ADN eucariota depende de
Histonas.
A principios de 1970 se
descubri que el tratamiento
de la cromatina con Nucleasas
daban lugar a fragmentos de
200 pb de longitud.
1974: Roger Kornberg, de la
Univ. Harvard, sugiri que el
ADN y las histonas se organizaban en unidades repetitivas
llamadas nucleosomas.

Organizacin Molecular de los Cromosomas Humanos

EL NUCLEOSOMA: es la

subunidad fundamental de DNA e

histonas en los cromosomas en
interfase, o cromatina.
Un nucleosoma presenta alrededor
de 146 pb de DNA enroscados dos
veces alrededor de un octmero de
histonas.
El octmero de histonas forma un
cilindro de 11 nm de dimetro y 6
nm de altura.

Organizacin Molecular de los Cromosomas Humanos

. Las histonas son protenas con
una alta proporcin de carga
positiva (lisina y arginina), lo
que les permite unirse con
firmeza a las cargas negativas de
la doble cadena del DNA.
. Desde el punto de vista evolutivo
la conservacin de las histonas es
muy significativa.
. Hay una relacin espacial en
particular estrecha entre el DNA y
las histonas en las regiones ricas en
A+T de los surcos menores. All, la
doble hlice del DNA se dobla con
ms facilidad.

Organizacin Molecular de los Cromosomas Humanos

Organizacin Molecular de los Cromosomas Humanos

Las partes ms hidrofbicas,
partes no cargadas de las
histonas, ocupan el centro del
nucleosoma y por lo tanto
promueven su agregacin en
un ncleo apretado.
La interaccin entre histonas
y ADN es principalmente
estructural y relativamente
independiente de la secuencia
de nucletidos.
.

Organizacin Molecular de los Cromosomas Humanos

Las microfotografas electrnicas demuestran que la
cromatina nuclear presenta
numerosos puntos
pequeos
de unos 30 nm de dimetro
que representan a las Fibras
de 30 nm.
La estructura del filamento
de 30 nm incrementa la relacin de empaquetamiento del
ADN unas 6 veces ms.
Modelo de Solenoide explica
la forma de plegarse la fibra
de 10 nm para formar la fibra
de cromatina de 30 nm

Organizacin Molecular de los Cromosomas Humanos

El siguiente nivel de
empaquetamiento es el
Modelo propuesto por
Marsdem y Lammli.
Ocurre cuando los filamentos de
cromatina de 30nm se organizan en
una serie de asas amplias
superenrrolladas.
Se estima que cada asa contiene
entre 10 a 150 Kb de ADN.
Las asas de ADN pueden actuar
para dividir el genoma en
dominios que contengan un solo
gen o un pequeo conjunto de
genes enlazados expresados por un
mecanismo regulador comn

Cromosomas Eucariticos
La fibra de 30 nm constituida por los nucleosomas empaquetados se
pliega formando bucles sobre un armazn de protenas no histonas
dando lugar a la fibra de cromatina (300 nm).

Cromosomas Eucariticos
La fibra de cromatina sufre un
enrollamiento helicoidal para
formar la estructura que se
observa en metafase: la

cromtida (700 nm)

. Los cromosomas se ven como estructuras separadas slo durante la mitosis.

En la interfase no
pueden diferenciarse dentro de la cromatina. En los cromosomas metafsicos el empaquetamiento
del DNA es alrededor de 10,000 veces ms denso que en la interfase

Cromosomas Humanos
ELEMENTOS BASICOS DEL CROMOSOMA
1. Centrmeros
2. Telmeros
3. Origenes de Replicacin

.- El centrmero y los Telmeros

contienen DNA con secuencias
repetitivas, conservadas evolutivamente porque son importantes
para la estabilidad del cromosoma.
.- En las bandas G claras el DNA
forma bucles en los que se ubican
los genes codificadores de
protenas.

Cromosomas Humanos

. Un modelo tridimensional de
un segmento de un cromosoma
en interfase muestra que en la
regin del centrmero la
heterocromatina constitutiva
(banda C) est plegada con gran
firmeza.
. En las bandas G clara la
eucromatina est empaquetada
en forma relativamente laxa, y en
las oscuras, de alguna forma est
plegada con ms fuerza.

Cromosomas Humanos
El DNA de los TELOMEROS
presenta secuencias en tndem
ricas en G:
Invertebrados: 5TTAGGG3
Levaduras: 5TGTGGG3
Protozoos: 5TTGGGG3.
Los extremos salientes de las
hebras G son importantes para
la proteccin de los telmeros
mediante la formacin de un
bucle de DNA de cadena doble
(dplex)

Cromosomas Humanos

TELOMEROS
Estructuras especializadas que
forman los extremos de los
cromosomas eucariotas
El ADN telomrico son regiones no
codificantes
Repetidos (TTAGGG)n en tandem:
-10Kb en clulas somticas
- 20Kb en clulas placenta

La longitud de las repeticiones est

.
relacionada con el envejecimiento y
dao celular.
Un Telmero normal, no solo es
estable, sino que Ancla ese extremo
al armazn nuclear.

Cromosomas Humanos
ESTRUCTURA DE LOS
TELOMEROS:
Una de las cadenas de ADN tiene una
extensin mayor que la otra en 12pb
Se producen uniones tipo Hoogsteen
formando un bucle cerrado.
La cadena sobreextendida es rica en G
y va en direccin 5- 3 hacia el extremo
del Telmero (forma el extremo 3 del
ADN cromosmico)

Cromosomas Humanos
FUNCION DE LOS TELOMEROS
1. Mantenimiento de la estabilidad cromosmica formando estructuras
que evitan la fusin de cromosomas o la actuacin de mecanismos
degradativos, evitando as la muerte celular y la prdida de genes
importantes para la vida de la clula.
2. Su importancia en la mitosis. La longitud de los telmeros es uno de
los parmetros que determinan el nmero de divisiones de una clula
y por tanto la duracin de su vida.
3. Sirven como un reloj mittico.
4. Su importancia en la meiosis ya que facilitan el reconocimiento de
cromosomas homlogos. Intervienen en el apareamiento de los
cromosomas homlogos y el entrecruzamiento durante la profase en la
Meiosis I.
5. La activacin o desactivacin de la telomerasa influye en el desarrollo
y el envejecimiento de los tejidos de un organismo.
6. La telomerasa juega un importante papel en alteraciones fisiolgicas
como el desarrollo de carcinognesis o la infeccin por el VIH.

Cromosomas Humanos
TELOMERASA
Enzima ribonucleca
compleja mayor 300 Kd.

2 Subunidades:
Subunidad cataltica o Tert
(Telomerase reverse
transcriptase).
Una molcula de ARN o Terc
(Telomerase ARN component)
de alrededor de 500
nucletidos, poseen secuencias
(AAUCCC) compleementaria al
ADN extremo del Telmero.

Cromosomas Humanos
FUNCION DE LOS TELOMEROS

Las secuencias del telmero presentan

alrededor de 250 a 1500 repeticiones ricas
en G (unos 9 Kb), que estn muy
conservadas entre las diferentes especies.

Los telmeros y la telomerasa son factores

centrales en la biologa del cncer, en las
clulas madre, en el envejecimiento y en la
disqueratosis congnita. La relacin inicial
entre la telomerasa y el cncer se estableci
cuando se observ que en la mayora de los
tumores humanos se sobre-expresaba la
enzima, cosa que no ocurra en los tejidos
sanos y en los cultivos de clulas normales.

Centrmero

Telmeros

Cromosomas Humanos
CENTROMERO
Constriccin Primaria
El ADN alfoide es el
principal componente de
todos los centromeros de los
cromosomas humanos
ADN alfoide: Repeticiones
en tandem de 171 pb.
Caja de CENP-B:
secuencia de 17 pb que se
une especficamente al
CENP-B
Estn ntimamente
asociados a las Cromtides
hermanas y los cinetocros.

Cromosomas Humanos
Los centrmeros humanos son secuencias ricas en repeticiones de DNA,
conocido como alfa satlite, las cuales estn basados en monmeros de 171
pb organizados en tndem, con una longitud variable de 0,2 5 Mb.

PROTEINAS CENTROMERICAS
El ADN en la regin centromrica est asociaddo con protenas
especficas. Estas protenas han podido estudiarse gracias a los Acs contra
ellas en enfermos con Esclerodermia tipo CREST, lograndose aislar y
purificar al menos 6 protenas centromricas o CENPs

La regin centromrica
comprende:
El centrmero propiamente
dicho o constriccin primaria, y
que esta asociada ntimamente a
las cromtides hermanas ; y
Los Cinetocoros que son
elementos cupuliformes que se
observan en la mitosis y en los
cuales se insertan los
microtbulos.

Cromosomas Humanos
CINETOCORO
Acta como sitio de
fijacin del cromosoma a
los microtbulos del huso
mittico.
Sitio donde residen algunas
protenas motoras.
Desempean un papel
clave en el movimiento de
los cromosomas durante la
mitosis.

Funcin de los cinetocoros

Atrapar
Unin de los extremos de los microtbulos a los cromosomas, generan
fuerza para mover a los cromosomas a lo largo de los microtbulos y
regulan la separacin de los cromosomas y su translocacin a los polos.

FUNCION
CINETOCORO
Anclaje a los microtbulos
del huso: aneuplodia
Verificacin de esos anclajes
Deteccin y correccin de
errores: checkpoint de mitosis
Generacin de fuerzas:
motores moleculares

Anclaje de los cromosomas a los

microtbulos del huso mittico

CAPTURA DE MICROTUBULOS (MTs)

Los microtbulos que localizan un cinetocoro se estabilizan, mientras
que aquellos que no lo encuentran se despolimeriza rpidamente.
Como los cromosomas presentan 2 cinetocoros asociados, cuando uno
de ellos se engancha a los MTs generado por uno de los polos celulares, el
cinetocoro de la cromatide hermana queda expuesta hacia el otro polo

Verificacin de los anclajes al huso

Esquema de las diferentes configuraciones de anclaje de los

cromosomas al huso mittico.

ORIGENES DE REPLICACION (OR)

Slo 1/10 parte son

usados para constituir los
Replicones o unidades de
replicacin del ADN.
Genoma Humano (46 Xs)
hay alrededor de 20,000
replicones con una
longitud promedio de 150
Kb de ADN cada uno, y con
una velocidad de la
horquilla de replicacin de
alrededor de 1 Kb por
minuto.
Los replicones slo actan
durante el momento
preciso del ciclo celular
(inicio de fase S).
Las bandas R se replican
antes que las bandas G y
stas antes que las bandas
C.
Todo segmento de ADN
estable de un organismo
debe poseer un OR.

OR en levaduras

Elementos caractersticos del cromosoma (metafsico)

Organizacin Molecular de los Cromosomas Humanos