ACIZII NUCLEICI

ROL BIOLOGIC,
STRUCTURA SI
ORGANIZARE

1
ROLUL BIOLOGIC SI
STRUCTURA

Genetic molecular

SUMAR

Fiecare specie posed un set fundamental de gene, care i asigur

unicitatea genomul speciei

Genomul unei specii este alctuit din una sau mai multe molecule de
ADN, organizate n cromosomi la eucariote

Genomul la procariote este reprezentat de regul, de o unic molecul

de ADN, cel mai adesea circular cromosomul bacterian

Genomul la eucariote este alctuit din unul sau dou seturi de

cromosomi liniari, grupai la nivelul unui organit special nucleul

Gena reprezint un segment de ADN care este transcris ntr-o

molecul funcional de ARN

Intronii secvene non-informaionale, ntrerup secvena

informaional la majoritatea genelor de la eucariote
Genetic molecular

DEFINIII
Genom setul unic de gene aparinnd unui organism
Cromosom structur alctuit dintr-o macromolecul de ADN, de regul
asociat cu ARN i proteine, coninnd un set specific de gene
Plasmid ADN extra-cromosomial cu replicare autonom
Transformare modificarea direct a unui genom, prin introducerea de
ADN provenit dintr-o celul cu un alt genotip

Genetic molecular

DOVEZI PRIVIND NATURA CHIMIC

A MATERIALULUI GENETIC
Transformarea (preluarea de ADN strin) la
procariote i eucariote, demonstreaz c ADN-ul
reprezint materialul genetic
Griffith (1928) reuete s transforme stabil o
tulpin nevirulent de Pneumococcus ntr-una
virulent, utiliznd un extract obinut dintr-o cultur
de celule virulente distruse cu ajutorul cldurii

Genetic molecular

Avery (1944) reuete s demonstreze c

principiul transformant este reprezentat de
ADN
Metoda: Distrugerea selectiv a majoritii
componentelor extractului acelular i
testarea capacitii sale transformante, n
vederea evidenierii componentului
responsabil de transformare
A devenit o rutin astzi, utilizarea ADN-ului
purificat, pentru transformarea celulelor
Genetic molecular

ROLUL ADN-ULUI

ADN-ul trebuie s se replice cu mare acuratee,

nainte de fiecare diviziune
ADN-ul codific toate proteinele necesare
celulei
ADN-ul este capabil de a suferi mutaii, oferind
baza material a transformrilor evolutive
ADN-ul stocheaz stabil informaia genetic

Genetic molecular

MOLECULA DE ADN

Genetic molecular

NUCLEOTIDELE
Crmizile din care este format ADN-ul
N
(i ARN-ul)
baz
Dezoxiriboza (pentoza), cu gruparea OH
la carbonul 3 al pentozei
Fosfatul (la carbonul 5 al pentozei)
N
Bazele azotate
5
C
purine
P
O
adenina
guanina
zahr
pirimidine
timina
citozina
OH

3
Genetic molecular

Genetic molecular

ADN-ul este alctuit de regul, din dou catene polipeptidice,

antiparalele

scheletul glucido-fosforic
Legturi fosfodiesterice
Polaritatea legturilor este 5 spre 3
Complementaritatea bazelor azotate
A T
G C
legturile de hidrogen
2 per A T
3 per G C
5

5 3 polaritatea catenei
Incizurile majore i minore
Genetic molecular

3
5-AATTGGCCGATC-3
3-TTAACCGGCTAG-5

3
5

Genetic molecular

ROLUL ADN-ULUI

Replicarea: fiecare caten servete ca matri pentru sinteza unei catene

complementare, pe baza principiului complementaritii bazelor azotate
Stocarea informaiei: este asigurat de secvena specific de nucleotide;
aceasta poate fi copiat n ARN
Modificare prin mutaie: substituia, deleia sau inseria de nucleotide
modific secvena nucleotidic

Genetic molecular

STRUCTURA GENEI

Genele codific molecule funcionale de ARN, n principal ARNm, dar

i alte specii (ARNt, ARNr etc.)
regiune
reglatoare

ADN care codific un ARN funcional

Transcript ARN primar

Gene reprezint o parte funcional a cromosomului, care este

transcris n ARN n momentul i locul potrivit, pe parcursul ciclului
celular

Gena include n structura sa si una sau mai multe regiuni adiacente,

cu funcie reglatoare
Genetic molecular

GENA LA PROCARIOTE

Genetic molecular

GENA LA EUCARIOTE

Genetic molecular

EUCARIOTELE: INTRONI I EXONI

Intron: regiune necodificatoare a unei gene, care va fi eliminat pe

parcursul proceselor de modificare post-transcripional a
transcriptului ARN primar. Numrul lor variaz de la zero la foarte
multe, au lungime variabil, iar funcia lor este de regul,
necunoscut

Exon: regiune codificatoare a unei gene (care va fi inclus n

transcriptul matur)
transcript

E1

I1

E2 I2 E3

primar
transcript matur

E1

Genetic molecular

E2 E3

I3

modificri posttranscripionale

E4

E4

Genetic molecular

Genetic molecular

REGIUNILE ADIACENTE
SECVENELOR GENICE

La procariote, genele sunt aranjate de regul n tandem, cu foarte

puin spaiu (nucleotide) ntre ele. Cel mai frecvente, secvenele de
spaiere lipsesc.

La eucariote, exist regiuni de dimensiuni considerabile, cu rol de

spaiere, ntre gene:
Unele dintre aceste secvene sunt reprezentate de ADN repetitiv,
format din uniti identice sau aproape identice care se repet,
plasate dispersat sau alturat (n tandem)
Unele regiuni de spaiere sunt provenite din secvena unor
elemente genetice mobile

Genetic molecular

Genetic molecular

2
STRUCTURA GENOMULUI
STRUCTURA
CROMOSOMILOR

SUMAR

Fiecare specie conine un set unic de informaie genetic = genomul

speciei

Genomul este alctuit din una sau mai multe molecule de acizi
nucleici, fiecare molecula fiind organizata sub forma unui cromozom

Genomul la procariote este reprezentat de un unic cromozom

Genomul la eucariote este format din unul sau dou seturi de

cromozomi liniari, plasai n nucleu

Genomul viral poate fi circular, mono sau dublucatenar i poate fi

format fie din ADN, fie din ARN

Genetic molecular

NATURA GENOMURILOR

Genomic : studiul structurii / funciilor genomului

Dimensiunea genomului: variabil; numarul de gene nu prezint un
indicator absolut al gradului de evolutie al speciei

Genetic molecular

Genetic molecular

GENOMURILE MICI

Plasmidele
Molecule de ADN simbionte; neesentiale pentru viabilitatea celulara
Replicarea lor este controlata de gazda
La procariote, majoritatea plasmidelor sunt circulare
De multe ori codifica rezistenta la antibiotice, sau alte functii care
confera gazdei avantaj selectiv

ADN-ul din organite

cloroplastidial, mitocondrial
Numeroase copii / organit si desigur, numeroase organite / celula
Cantitatea totala de ADN din organite poate fi destul de mare
Genele lor au functii foarte specifice
Au aparut prin endosimbioze dintr-un ancestor procariot

Genetic molecular

ADN plasmidial / ADNmt

Genetic molecular

GENOMURILE VIRALE

Particule nevii
Utilizeaza echipamentul de sinteza celular in vederea propriei
reproduceri
La procariote, virusurile care infecteaza celulele se numesc bacteriofagi
Au genom format din acizi nucleici
Poseda un invelis proteic

Genom ADN sau ARN

Mono sau dublucatenar
Liniar sau circular

Genomurile sunt compacte, cu putin ADN spatiator

Genetic molecular

GENOMUL PROCARIOT

De regula, genomul este dublu-catenar, circular

Cu cat sunt secventiate mai multe genomuri bacteriene, se constata
ca exista si numeroase specii cu genom liniar
Ocupa o regiune numita nucleoid
Este atasat la membrana celulara
Genele nu sunt separate de secvente extinse de spatiere
Operonul
Reprezinta grupuri de gene plasate in tandem, a caror functionare
este reglata coordonat
Se transcriu ca un singur ARNm
Intronii sunt extrem de rari
ADN-ul este extrem de bine impachetat

Genetic molecular

GENOMUL NUCLEAR EUCARIOT

Fiecare specie are un numar caracteristic de cromosomi

La diploizi, cromozomii formeaza perechi (omologi)

Sunt similari structural
Au aceeasi secventa genica
Pot contine alele diferite

Ploidia se refera la numarul de seturi complete de cromosomi

Haploidie (1n): un singur set complet de gene
Diploidie (2n) (celulele somatice la om contin 2n = 46)
Poliploidie (3n)

Genele reprezinta segmente din ADN-ul cromozomial

Genetic molecular

CROMOSOMII OMOLOGI

gene A

gene B

gene A

gene B

gene C

gene C

Fiecare membru a unei perechi de omologi este similar cu partenerul sau,

in privinta dimensiunii si secventei genice
Fiecare gena are aceeasi pozitie relativa
Genetic molecular

Genetic molecular

CROMOSOMUL EUCARIOT (1)

citogenetica: studiul microscopic al cromosomilor

combina citologia si genetica
Diferente considerabile ca dimensiuni si numar de gene intre cromosomi
Centromerul are pozitie variabila
telocentric: centromer plasat terminal
acrocentric: centromer plasat in apropierea unui capat
metacentric: centromerul este plasat la mijloc
Bratul p este bratul scurt, bratul q este bratul lung
Telomer: capatul cromosomului
Organizatorul nucleolar (ARNr)
Situsul sintezei ARNr; genele ARNr sunt plasate in tandem

Genetic molecular

Genetic molecular

CROMOSOMUL EUCARIOT (2)

Heterocromatina
Regiuni intens colorabile de ADN extrem de compact
Eucromatina: regiuni care se coloreaza slab, mai putin compacte,
continand gene care se transcriu activ
Pattern-ul de benzi (a cromosomilor metafazici)
Regiuni care se coloreaza diferit
Benzile G, obtinute prin colorare Giemsa (bogate in A/T)
Benzile R, revers-Giemsa (bogate in G/C)
Cromosomii politenici
Cromosomi replicati dar fara separarea cromatidelor
Sunt prezenti in anumite tesuturi la diptere

Genetic molecular

CARIOTIPUL UMAN

Pattern-ul de benzi G in
cariotipul uman
(46, XX)

Genetic molecular

ARHITECTURA CROMOSOMILOR

Fiecare cromozom
consta este format dintr-o
singura macromolecula
ADNdc

O celula umana contine

2 metri de ADN
Este foarte bine
impachetat

Genetic molecular

INTERFAZA vs METAFAZA

Genetic molecular

ADN NUCLEAR

Inalt organizat, cu diverse grade de impachetare

Nucleosomul
Unitatea fundamentala a cromatinei
ADN-ul se infasoara in jurul unui miez de proteine histonice (un
octamer)
Histonele sunt proteine inalt conservate
H2A, H2B, H3, H4
Fibra de 10 nm
Solenoidul, fibra de 30 nm
Impachetarea ordonata
Bucle ale solenoidului se cupleaza la scheletul proteic al
cromozomului
Acest matrix contine topoizomeraza II
Se formeaza fibre cu grosime mai mare

Genetic molecular

Genetic molecular

Genetic molecular

Genetic molecular

Genetic molecular

GENOMICA COMPARATIVA

Studiaza diferentele si asemanarile dintre diferitele genomuri

Numeroase gene se regasesc la toate organismele vii sau la

grupuri relativ inrudite de specii

Studierea genelor la organismele model ofera informatii

valoroase privind genele de la diferite organisme

Genomurile de dimensiuni mari ofera o cantitate considerabila de

informatie
analiza computerizata

Genetic molecular

Compararea genelor inductoare de cancer

la om si gene omoloage de la Drosophila,
Caenorhabditis si levuri

F = Drosophila
W = Caenorhabditis elegans
Y= yeast (S. cerevisiae)
Albastru inchis = secventa inalt omoloaga
Albastru deschis/purpuriu = similitudine
relativ redusa
Alb = lipsa de omologie

Genetic molecular

ORGANIZAREA GENOMULUI UMAN

other intergenic
regions 600 Mb
intergenic DNA
2000 Mb

unique
510 Mb
micro-satellites
90 Mb

genome-wide
repeats 1400 Mb
human genome
3200 Mb

introns
UTRs
genes and generelated sequences
1200 Mb

related sequences
1152 Mb

psuedogenes
genes
48 Mb

Genetic molecular

gene
fragments