Escuela de Tecnologa Mdica

Citogentica bsica

POR QU ES NECESARIO
CALENTAR SUAVEMENTE LAS
RAICILLAS CON LA
ORCENA-ACTICA?
Docente:

T.M. Eduardo Pizarro M.

Integrantes: Francisca Arcos & M Fernanda Segovia.

La Serena,

6 de Septiembre de 2016

PROTOCOLO DE OBSERVACIN
Cromosomas en clulas vegetales
1.Cortar con la navaja los ltimos 5
milmetros de las raicillas,
depositndolas en un vaso de
precipitado

2. Cubrir la muestra con el fijador:

metanol + cido actico,
aproximadamente 2 ml.

5. Tomar el vidrio de reloj por los

bordes con una pinza y se calienta
suavemente en mechero, evitando
la ebullicin y esperar hasta que
emitan vapores tenues.

6. Tomar con las pinzas una raicilla,

colocndose sobre un
portaobjetos, se corta el pice de
las raicillas de 2 milmetros de
longitud.

9.Observar al microscopio.

3. Dejar que actu el fijador

durante 10 minutos.

4. Colocar en un vidrio de reloj y

se cubre la muestra con Orcena
actica durante 10 minutos.

7. Colocar el cubreobjetos a la
muestra y se hace una almohadilla
con papel filtro sobre la cual se
ejerce presin con el dedo pulgar,
primero suave, despus ms
intensa, para aplastar la muestra,
tcnica conocida como squash.

8. Aspirar con el papel filtro el

exceso de colorante.

ORCENA
Es un colorante rojo violceo (prpura) que
se extrae de forma natural de diversos
lquenes.
LaCour, en 1941, encontr un nuevo
uso para la orcena, la tcnica de la
aceto-orcena para fijar y colorear los
cromosomas y estudiar el cariotipo:
nmero, forma, defectos y
deformidades de los cromosomas.

La tcnica se sigue usando en

citogentica animal y vegetal.

ORCENA-ACTICA
Orcena A

Orcena B

Reblandece
las
membranas
celulares.
Mata las
clulas.
Detiene el
proceso de
divisin.

Completa el
proceso de
tincin.

Acido
actico
Conserva la
cromatina.
Retrae los
tejidos.
Es ms un
conservante
que un
fijador.

Cariotipo
de cebolla

MEMBRANA
PLASMTICA
La membrana plasmtica se
encarga de:
Aislar selectivamente el
contenido de la clula del
ambiente externo.
Regular el intercambio de
sustancias entre el interior y
exterior celular (lo que entra
y sale de la clula).
Comunicacin intercelular.

FUNCIN DE LA MEMBRANA
La naturaleza semi-permeable de la membrana celular posibilita su funcin ms
importante, que es la de proteger a la clula y sus organelos del ambiente exterior.
La fluidez de la membrana celular permite que la clula crezca y responda a
diversos cambios ambientales, incluyendo los cambios de temperatura.
Difusin simple

Difusin facilitada

EFECTO DE LA TEMPERATURA EN LAS

MEMBRANAS CELULARES
Las colas de cidos grasos de la bicapa
fosfolpida pueden "derretirse" a altas
temperaturas, lo que significa que se
vuelven ms fluidas, posibilitando un
mayor movimiento.

Las protenas perifricas y

transmembrana, pueden tambin verse
daadas por las altas temperaturas, que
causan una desnaturalizacin de las
protenas o su desmembramiento.

Esto modifica la permeabilidad de la

clula, lo que puede permitir el ingreso de
molculas que no deberan ingresar y, por
ello, daar a la clula.

Tambin pueden producir una aceleracin

de las reacciones que suceden en el seno
de la clula, lo que en algn punto podra
ser aceptable, hasta que la temperatura
se vuelva demasiado alta, momento en el
cual se produce la destruccin de la
protena, las reacciones y las clulas.

EFECTO DE LA TEMPERATURA EN LA
TINCIN
SIN TINCIN

CON TINCIN

TINCIN CON CALOR

P
per rdida
de
me
a
b
ili
sele
ctiv dad
a.

REFERENCIAS
http://www.efn.uncor.edu/departamentos/divbioeco/anatocom/Biologia/Index_archivos
/celula/mosaicfluido.jpg
Barcat, Juan Antonio. (2003). Orcena y fibras elsticas.Medicina (Buenos
Aires),63(5), 353-356. Recuperado en 05 de septiembre de 2016, de
http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0025-768020030005
00015&lng=es&tlng=es
.
http://www.euita.upv.es/varios/biologia/tecnicas_de_histologia_vegetal/Documentos
/Colorantes.htm
vlab.amrita.edu,. (2011). Mitosis in Onion Root Tips. Retrieved 6 September 2016,
from vlab.amrita.edu/?sub=3&brch=188&sim=1102&cnt=2
PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA:
https://www.youtube.com/watch?v=AFmzEJ2daFQ

ORCENA ACTICA
Formulacin

Ruiz apuesta por una formulacin

diferente en concentracin:

Composicin:
Orcena--------------------1-2 g
Acido actico--------------45 ml
Se disuelve la orcena en caliente a 60C en
cido actico, tomando las mismas
precauciones que en el proceso de
preparacin del carmn, para evitar la
evaporacin del actico. Una vez enfriada la
disolucin, aadir 100 ml de Agua
destilada.

Composicin:
Orcena----------------------1-2 g
Acido actico (45%)-------100 ml
Disolver en cido actico caliente,
enfriar a temperatura ambiente,
finalmente filtrar en papel de filtro
Whatman #1.