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Es el conjunto de procesos
analticos que tienen por objeto el
aislamiento , identificacin y
determinacin cuantitativa de los
txicos, tanto en el sujeto vivo como
en el cadver, con el fin de permitir
el diagnstico de intoxicacin y el
esclarecimiento de los hechos.
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2.-MTODOS CUANTITATIVOS
FIALES.- Una vez que se sospeche de
la presencia de una sustancia por los
tests anteriores, su presencia debe
confirmarse y cuantificarse al menos
por dos tcnicas analticas
independientes, basadas en principios
qumicos diferentes.
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TIEMPO APROXIMADO DE
ANLISIS.
Se define como el intervalo ante la
llegada de la muestra al laboratorio en
que se puede ofrecer el resultado
analtico.
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INTERPRETACIN DE LOS
RESULTADOS
La interpretacin requiere tener en
cuenta, todas las circunstancias
implicadas en el caso. La resolucin del
problema debe hacerse para cada caso
en particular por una discusin razonada
de todos los hechos y todas las partes
que de alguna forma intervienen en la
investigacin medico-legal.
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IMPLICACIONES
ANALTICAS DE LA
BIOTRANSFORMACIN DE
LOS TXICOS.
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GENERALIDADES
Desde el momento en que un toxico penetra en
el organismo recorre necesariamente un
camino mas o menos intrincado hasta
alcanzar los lugares donde va a actuar
acabando finalmente por se eliminado.
Este movimiento del toxico por el organismo
esta representado por los procesos de la
absorcin, distribucin, biotransformacin y
eliminacin.
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Absorcin
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1.- VA DE ENTRADA.
El metabolismo de un txico depende la
va de entrada, en particular cuando la
administracin se hace por va oral o
intravenosa. Esto puede influir en los
niveles de la sustancia y sus metabolitos
en sangre, tejidos y excretas.
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En la administracin INTRAVENOSA el
compuesto llega al torrente circulatorio
directamente y evita el metabolismo en
el tracto gastrointestinal, a menos que
posteriormente sea excretado por la
bilis.
Los siguientes son algunos de los
ejemplos que ilustran la importancia de
la va de entrada:
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2.- pH urinario.
Algunos txicos originan en su
metabolismo productos de conjugacin
muy polares, como glucornidos, sulfatos
y derivados de aminocidos, que son
cidos fuertes, casi totalmente ionizados
al pH corporal y fcilmente excretados
por el rin por una combinacin de
filtracin glomerular, secrecin tubular
activa y poca o nula reabsorcin pasiva.
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CUESTIONAMIENTO PARA
EL ANALISIS
TOXICOLOGICO.
En esencia son 3, que pueden resumirse de la
siguiente manera:
1.- Qu buscar?
2.- Dnde buscar?
3.- Cmo buscar?
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QUE BUSCAR?
En funcin del tipo de metabolismo, un
txico puede aparecer en los fluidos o
tejidos en su forma original o como
producto de transformacin (metabolito)
libre o conjugado con diferentes
compuestos. En el caso de que haya
varios metabolitos es importante saber
cual de ellos es el ms representativo
en cuanto a la toxicidad del compuesto
en cuestin.
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DONDE BUSCAR?
Las propiedades fisicoqumicas del toxico
y su metabolitos pueden ser muy
distintas, a veces incluso entre los
metabolitos de un mismo compuesto. Ello
determina una distribucin caracterstica
segn los casos y la conveniencia de
realizar la investigacin en orina, sangre,
bilis, etc.
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COMO BUSCAR?
Ya que se sabe qu y donde buscar, se
pueden elegir las condiciones optimas
para su extraccin.
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Un resultado negativo en el
screening del toxico partiendo
de esta muestra puede indicar
que el toxico no entre por esta
va o ya ha transcurrido un
tiempo excesivo desde la
ingesta, lo cual no descarta la
posibilidad de una intoxicacin.
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SANGRE
Es una de las muestras mas tiles
para la identificacin de txicos y
especialmente para el anlisis
cuantitativo. No hay que olvidar, sin
embargo, que los txicos orgnicos
bsicos alcanzan concentraciones
muy bajas en esta muestra, siendo
muchas veces difcil su deteccin
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ORINA
La orina representa una
muestra idnea para realizar
una gran variedad de ensayos
preliminares en el screening
de txicos.
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VENTAJAS
De estas muestras son que la
concentracin de un txico en este
fluido puede llegar a ser 100 veces
mayor que en la sangre y, adems, la
orina est exenta de protenas, por lo
que las interferencias son mnimas.
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DESVENTAJAS
Es que muchos txicos se eliminan
prcticamente en su totalidad como
metabolitos que a veces son
comunes, ya que en numerosas
ocasiones pertenecen al mismo
grupo farmacolgico (ejem.
Benzodiazepinas).
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Es aconsejable no aadir
conservadores que podra interferir en
el anlisis, debiendo conservarse en
fro hasta su anlisis. En casos
necesarios puede usarse fluoruro
sdico o azida sdica.
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HUMOR VTREO
Su fcil accesibilidad, volumen suficiente
(casi 2 ml en cada ojo), no contener
demasiadas protenas, estar protegido
de la circulacin general, poseer pocas
enzimas y ser mas resistente a la
contaminacin bacteriana son factores
que hacen a esta muestra muy til para
el anlisis de alcohol y drogas.
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HGADO
Los niveles de txicos en este tejido
son en general superiores a los de la
sangre. En ocasiones el hgado
puede ser el nico tejido donde se
encuentre una sustancia toxica en
concentracin adecuada para su
identificacin y cuantificacin.
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CEREBRO
Es til cuando se trata de muertes por
inhalacin de disolventes ( tolueno,
cloroformo, etc.) debido a las altas
concentraciones que alcanzan esta
sustancias en el tejido cerebral,
donde, adems son retenidas tras la
muerte.
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RION
Es el tejido de eleccin en
intoxicaciones por metales y otros
txicos que se acumulan
especficamente en l.
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BILIS
Es til para el anlisis de sustancias que
se eliminan por va biliar,
particularmente en las muertes por
sobredosis de opiceos, ya que
contiene altas concentraciones de los
glucornidos de dichos compuestos.
Debe extraerse la vescula intacta y
remitirse por separado de un recipiente.
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PELO
til para el anlisis toxicolgico de
txicos minerales, as como para la
deteccin de drogas de abuso, en
consumidores crnicos.
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ENVASADO Y CONSERVACIN
DE LA MUESTRA
Todas estas muestras deben ser
introducidas en recipientes
adecuados a ser posible de un solo
uso, para evitar la contaminacin. De
no ser as, deben estar
perfectamente limpios y secos.
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ALMACENAMIENTO DE LAS
MUESTRAS.
Descomposicin qumica y biolgica.
Un txico presente en una muestra
biolgica
puede
descomponerse
durante el almacenamiento, por lo que
ya no ser detectado en el anlisis.
Este hecho es importante cuando no
se conoce la identidad del txico o no
se sabe si realmente existe algn
toxico en una muestra.
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LUZ
Los alcaloides del cornezuelo del centeno y las
Fenotiacinas son fotolbiles. Aunque en
muestras slidas como el hgado u opacas
como la sangre suelen estar protegidas, como
norma general deben protegerse de la luz.
Las muestras de orinas y las soluciones
acuosas de txico fotolbiles son muy sensibles
a la luz, siendo recomendable recubrir con papel
aluminio los envases e incluso los recipientes
utilizados durante el anlisis.
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OXIDACIN
Sustancias como las catecolaminas,
barbitricos, son compuestos fcilmente
oxidables, por lo que los envases deben
estar llenos y perfectamente cerrados
para excluir el oxgeno atmosfrico.
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HIDRLISIS.
Muchos txicos son steres, como los
anestsicos locales, herona; pueden ser
fcilmente
hidrolizados
durante
el
almacenamiento a temperatura ambiente e
incluso a bajas temperaturas por las estearasas
presentes en la sangre y tejidos. De la misma
manera, el pH alcalino durante la extraccin
puede promover la hidrlisis de algunos
compuestos.
La actividad estearsica puede contrarrestarse
con la adicin de fluoruro sdico al 1 %, p/v.
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TEMPERATURA
Las
bajas
temperaturas
favorecen
la
conservacin de las muestras para el anlisis
toxicolgicos.
En trminos generales se recomienda
almacenar a 4C. siempre que vayan a ser
analizadas en unos pocos das.
Si van a almacenarse por mas tiempo, deben
congelarse a -20C, pero teniendo la precaucin
de descongelarlas una sola vez antes de ser
analizadas.
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