PRUEBA DE ANTIGLOBULINA

HUMANA O DE COOMBS
Es la prueba ms eficiente y de
mayor valor en el Banco de
sangre, para demostrar la
presencia de antgenos o
anticuerpos de grupos
sanguneos.
 1.908 la prueba fue descrita por
Moreshi
En 1.946 Coombs, Mourant,
Race la utilizaron para el estudio
de los grupos sanguneos y
anticuerpos.
1.957 Dacie y colaboradores,
detectan la accin del
complemento sobre los Glbulos
rojos.
 PREPARACION DEL REACTIVO

Gamaglobulina humana Complemento C3

Suero antiglobulina humana Anti C3

Anti Ig G Anti C3d

FUNDAMENTO
Los Anticuerpos y el complemento
humano son globulinas y adems son
diferentes de otras especies.
Si un animal, es inyectado con globulinas
humanas purificadas o suero total, las
reconoce como extraas y elabora
anticuerpos.
El suero antiglobulina humana es
especfico.
Suero de Coombs Poliespecfico

Suero de Coombs monoespecfico Anti-

IgG

Suero de Coombs monoespecfico Anti-

C3d
 COOMBS DIRECTO
La prueba de Coombs Directo o
prueba de antiglobulina directa
(PAD) se emplea para determinar la
existencia de glbulos rojos
recubiertos con inmunoglobulinas
y/o complemento en vivo.
COOMBS DIRECTO POSITIVO
 PROCEMIMIENTO

1. Marcar dos tubos asi: Test y Control.

2. Colocar dos gotas de sangre del
paciente (diluida del 3-5 %) en cada
tubo.
3. Realizar 3 lavados con salina.
Centrifugar y decantar muy bien
despus de cada lavado.
4. Aadir dos gotas de suero de Coombs
Poliespecfico al tubo marcado test.
5. Aadir 2 gotas de solucin salina al tubo marcado
control.
6. Mezclar. Centrifugar 30 segundos en la serfuga y
observar por aglutinacin.
7. Si no se observa aglutinacin , aadir 1 gota de
Control de Coombs a ambos tubos.
8. Centrifugar y examinar la aglutinacin, debe dar
2-3 + de aglutinacin en el tubo marcado test.
 LECTURA POR AGLUTINACION

4+ 3+ 2+ 1+ NEGATIVO
INTERPRETACION
Test Control Interpretacin

0 0 Negativo

+ 0 Positivo

+0 + Mala tcnica o
mal reactivo
 COOMBS DIRECTO POSITIVO

Qu tipo de proteina se ha fijado a la

membrana de los globulos rojos?

Ig G
Ig G y complemento
Complemento
 NOTA IMPORTANTE
Los Sueros Poliespecficos tienen
suficiente actividad Anti Ig G, pero muchos
de ellos poseen escasa o ninguna actividad
Anti C3d.
El 30% de los casos de Anemia Hemoltica
Autoinmune, slo fijan complemento a la
membrana del glbulo rojo.
Si el reactivo no tiene adecuada actividad
Anti C3d, nos conduce a falsos negativos.
COOMBS DIRECTO POSITIVO

Indica el Diagnstico de:

ANEMIA HEMOLITICA AUTOINMUNE

EXTRAVASCULAR INTRAVASCULAR
 HEMOLISIS
EXTRAVASCULAR
Monocito Mediada
Ig G
por accin
Fc de la Ig G

Glbulo rojo Anticuerpos

calientes

Bazo
 HEMOLISIS
EXTRAVASCULAR
Mediada por Ig G.
Anticuerpos calientes
Los Glbulos rojos sensibilizados
son destruidos en el bazo.
Se determina con Suero de
Coombs monoespecfico para Ig
G.
 DIAGNOSTICO
Anemia Hemoltica del Recin nacido.
Anemia Hemoltica autoinmune
mediada por Ig G.
Reacciones transfusionales por Acs
calientes.
Acs contra drogas fijados a la
membrana del glbulo rojo.
 HEMOLISIS INTRAVASCULAR

Ig M

C3d Hemolisis
Glbulo Rojo
Mediada Anticuerpos
Por fros
Ig M
HEMOLISIS INTRAVASCULAR

Mediada por Ig M.
Anticuerpos fros.
Los Glbulos rojos son destruidos
dentro de los vasos sanguneos.
Se utiliza suero de Coombs
Monoespecfico Anti C3d.
 DIAGNOSTICO
Anemia Hemoltica por
anticuerpos fros.
Reacciones transfusionales pos
anticuerpos fros.
Hemoglobinuria paroxstica
nocturna.
 Coombs directo

Metildopa
Penicilina
Cefalosporinas
Quininas

Ausencia o debilidda de
aglutininas ABO

Quimioterapia inmunosupresora
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CONTROL DEL SUERO DE COOMBS

1. Correcto lavado de las clulas antes

de la adicin del suero de Coombs.
2. Confirma que se haya agregado el
Suero de Coombs.
3. El Suero de Coombs contiene Anti Ig
G.
 PRINCIPIO
Ig G

ANTI D

Grupo: O
Rh: Positivo
 PREPARACION
1. 4 Gotas de anti D
2. 4 gotas de Solucin Salina
3. 4 gotas de Clulas del Grupo O
Rh Positivo.
4. Mezclar, incubar por 1 hora a 37 C
5. Lavar 4 5 veces
6. Hacer una dilucin al 5%