GENOMA ,GENES

E INGENIERIA GENETICA

JULIO LUCERO VILLALOBOS

PROFESOR DE BIOLOGIA Y
CIENCIAS
 CONTENIDOS
Capitulo 1 : La Naturaleza de la Informacin
Gentica
Capitulo 2 : La Estructura del ADN
Capitulo 3 : La replicacin de la Informacin
Gentica
Capitulo 4 : Cmo se expresan los genes?
Capitulo 5 : Biotecnologa
 Recordando Conocimientos

1.-Gregorio Mendel :
- Informacin hereditaria existe en forma
de unidades discretas.
- Conceptualizacion de genes y teora
particulada de la herencia.

2-Fenotipo
 3.-Principios del Siglo XX :
- Los genes ocupan determinados lugares

CROMOSOMAS
4.- Ciclo Celular
 Que es el Material Hereditario?
Los cromosomas estn hechos de

Protenas ADN

Cul es el Material Hereditario ?

 Evidencias del ADN como
Material Hereditario
- Experimento de Griffith

- Experimento de Avery

- Experimentos de Harshey y Chase

 Experimento de Griffith
Griffith trabajaba en preparar vacunas
contra la neumona.
Investigo la factibilidad de utilizar
neumococos virulentos muertos por calor
para inmunizar animales de
experimentacin.
Los resultados indican que algo de la cepa
virulenta se traspaso a la cepa no
virulenta.
Experimento de Griffith
 Experimento de Avery
Obtuvo distintos tipos de molculas de la
cepa virulenta y observo si transformaban
a la cepa no virulenta.
. En vez de inocular cepas de bacterias,
inocularon distintas muestras de la cepa
no virulenta con diferentes sustancias
aisladas de la cepa virulenta.
. El principio transformante resulto ser el
ADN
 Experimento de Avery

 Expermento de Hershey y Chase
Estudiaron el mecanismo de infeccin del
virus T2 en la bacteria E.coli.
El objetivo era descubrir cual de los 2
componentes virales, protenas o ADN era
el que portaba la informacin gnica.
Emplearon tomos radiactivos :
- En las protenas utilizaron S-35
- En el ADN utilizaron P-32
 Incubaron separadamente bacterias con virus
que tenan sus protenas marcadas o su ADN
marcado y estudiaron la distribucin de la marca
radiactiva.
Las bacterias incubadas junto a bacterifagos
con su ADN marcado tenan la marca radiactiva
en su interior.
Las bacterias incubadas con virus con protenas
marcadas no presentaban marca radiactiva
Experimento de Hershey y Chase
 En forma paralela continuaron las
investigaciones cientficas acerca de la
naturaleza qumica del ADN.
Erwin Chargaff y sus colaboradores
establecieron 4 postulados :
1.- Las muestras de ADN de diferentes
tejidos, pero de una misma especie ,
tienen la misma composicin de bases
nitrogenadas.
 2.- La composicin de bases del ADN
varia de una especie a otra.
3.- La composicin de bases del ADN de
un organismo no varia con la edad, con
las condiciones nutricionales, ni con las
variaciones del ambiente.
4.- En el ADN de cualquier especie, el
numero de bases A es equivalente al de T
y el numero de C es equivalente al de G
 EL ADN
Una vez identificada la macromolcula
que almacena la informacin hereditaria
la pregunta es :
Cual es la estructura qumica del ADN ?
. La respuesta a esta pregunta la daran en
1953 el genetista norteamericano James
Watson y el fsico ingles Francis Crick
 Modelo de Watson y Crick
El ADN consiste en 2 cadenas helicoidales
enrolladas de izquierda a derecha en
torno a un eje comn imaginario.
El modelo organiza los 3 componentes del
ADN : - grupos fosfatos
- pentosa
- base nitrogenada.
 Las unidades de azcar y fosfatos se
orientan hacia el exterior formando un
esqueleto.
Hacia el interior estn las bases
nitrogenadas formando un Angulo recto
con el esqueleto de la molcula
La unin de un grupo fosfato, una pentosa
y una base nitrogenada se denomina
nucletido
 Cada hebra de la doble hlice esta
formada por muchos nucletidos por lo
que se dice que es una cadena
polinucleotidica.
Las bases pirimidicas de una de las
cadenas se aparean con las bases puricas
de la otra cadena.
A/ T C/ G
 NUCLEOTIDO
UNIDAD BASICA DEL ADN
Modelo de ADN
DESOXIRRIBOSA
ADENINA
GUANINA
CITOSINA
TIMINA
 Distribucin de los componentes qumicos de la cadena
esquematizada en la figura
. El grupo fosfato (rojo) y el azcar (verde) constituyen la
"columna vertebral" de la macromolcula (sombreado
celeste).
Los fosfatos ligan el carbono 5' de la desoxirribosa de
un nucletido con el carbono 3' de la adyacente.
La informacin gentica se codifica a travs de
secuencia de las cuatro bases nitrogenadas que se
muestran en la figura (negro).
El sombreado amarillo indica los puentes de hidrgeno
que unirn dos cadenas complementarias.
 CONCEPTO MOLECULAR DEL
GEN
Gracias a trabajos de genetistas
moleculares se estableci el lugar fsico
de los genes.
Beadle y Tatum -------Neurospora crassa
Cada gen contiene la informacin para la
sntesis de una enzima.
Cada gen codifica para la sintesis de un
polipeptido.
 ARQUITECTURA DE LA
MOLECULA DE ADN
Modelo de Watson y Crick ADNB
Se conocen 2 formas mas de ADN A y Z
ADN Longitud Diametro Giro
A corto ancho derecha
B largo angosto derecha
Z largo angosto izquierda
 LOS NUCLEOTIDOS
Son las unidades bsicas del ADN
En cada nucletido, el grupo fosfato se
une al carbono 5 de la pentosa y la base
nitrogenada lo hace en el carbono 1.
Los nucletidos de una misma cadena se
unen a travs de un enlace fosfodiester.
En este enlace participan los carbonos 3
del azcar de un nucletido y el numero 5
de la pentosa del nucletido siguiente.
 Las bases nitrogenadas de cadena se
unen a travs de enlaces llamados
puentes de hidrogeno. ( 2 y 3 )
La base nitrogenada es el nico
componente del nucletido que codifica la
informacin gentica.
.
 DOGMA CENTRAL DE LA
GENETICA MOLECULAR
El dogma central de la Gentica Molecular
sintetiza los procesos que permiten la
duplicacin de ADN.
Se distinguen 3 procesos :
- Replicacin
- Transcripcin
- Traduccin
 REPLICACION DEL ADN
Es el proceso que permite la formacin de
nuevas copias de la informacin gentica
a partir de una molcula patrn de ADN.
Es un proceso bioqumico regulado en
forma precisa por numerosas protenas y
enzimas.
Segn Watson y Crick cada hebra de ADN
acta como patrn para la formacin de
hebras hijas complementarias.
 Los investigadores Matthew Meselson y
Franklin Stahl desarrollaron un modelo
experimental que consiste en :
- marcar selectivamente las hebras de
ADN con nitrgeno radiactivo.
- analizar la distribucin del nitrgeno
marcado en las hebras producidas en
diferentes generaciones bacterianas.
 Este mtodo permiti demostrar que las
dobles hlices sintetizadas incluan una
hebra parental marcada y una hebra
nueva no marcada.

Se llego a la conclusin que la replicacin

de ADN es semiconservativa
 Investigaciones posteriores mostraron que
sus conclusiones eran igualmente validas
para las clulas eucariontes.
El conocimiento bioquimico que
disponemos hoy sobre el proceso de
replicacin se debe a los estudios de
un notable investigador : Arthur Kornberg
 Kornberg llamo DNA polimerasa I a la enzima
responsable de la sntesis de ADN en las
siguientes condiciones :
- La DNA polimerasa cataliza la unin de
nucletidos.
- utiliza los grupos fosfatos y las pentosas
de la cadena.
- La enzima sintetiza ADN en direccin
5 -------- 3
 Replicacin del ADN |
Una vez que se comprob que el ADN era
el material hereditario y se descifr su
estructura, lo que quedaba era determinar
como el ADN copiaba su informacin y
como la misma se expresaba en el
fenotipo.
 . Matthew Meselson y Franklin W. Stahl
disearon el experimento para determinar
el mtodo de la replicacion del ADN.
. Se conocen 3 tipos de replicacin :
- Conservativa
- Semiconservativa
- Dispersiva
1. Replicacin conservativa durante la cual se producira un ADN completamente nuevo durante la replicacin.
 2. En la replicacin semiconservativa se
originan dos molculas de ADN, cada una
de ellas compuesta de una hebra de el
ADN original y de una hebra
complementaria nueva .
 . En otras palabras el ADN se forma de
una hebra vieja y otra nueva. Es decir que
las hebras existentes sirven de molde
complementario a las nuevas.
 3. La replicacin dispersiva implicara la
ruptura de las hebras de origen durante la
replicacin que, de alguna manera se
reordenaran en una molcula con una
mezcla de fragmentos nuevos y viejos en
cada hebra de ADN
 Para que ocurra la replicacin se requiere
que la doble hlice se abra.

protena dna b + helicasa

protena SSB mantiene despegada cada

hebra.
 Hebra 3 5
- duplica en proceso continuo
- se llama hebra conductora

. Hebra 5 3
- duplica en proceso discontinuo
- se llama hebra retardada
 Las enzimas que participan en la
replicacin son :

Primasa que inicia el proceso y facilita la

funcin de :

DNA polimerasa que lleva a cabo el

proceso
 TRANSCRIPCION
La expresin gentica requiere que el
mensaje contenido en el ADN se copie en
una molcula semejante llamada ARN.

Este proceso se denomina transcripcin.

Entre ARN y ADN hay diferencias

estructurales
 La transcripcin ocurre en 4 etapas :
- iniciacin
- elongacin
- termino
- maduracin
 En la iniciacin la enzima ARN polimerasa
se une al sector de ADN que ser copiado
en un tipo de ARN.
Hay 3 tipos de ARN :
- ARN mensajero (ARNm)
- ARN ribosomal (ARNr)
- ARN transferencia (ARNt)
 El ARNm contiene la informacin gentica
que dirige la sntesis de un polipptido.
El ARNr es un componente estructural de
los ribosomas
El ARNt interviene en el proceso de
sntesis de protenas
 Cuando la enzima se une en sectores
especficos del ADN comienza la sntesis.
Aumenta la longitud de la molcula de
ARN , es decir la fase de elongacin.
La enzima ARN polimerasa enfrenta a
secuencia especificas de ADN se produce
la etapa de termino y la sntesis de ARN
se detiene
 En la etapa de maduracin el ARN
sintetizado sufre algunas modificaciones
qumicas. Esto depende del tipo de clula
 TRADUCCION
Es el proceso que traduce la informacin
del ARNm .
Intervienen :
- protenas citoplasmticas
- enzimas
- ARNm ARNr ARNt
- ribosomas
 Se une un aminocido a una molcula de
ARNt
El proceso es catalizado por la enzima
aminoacil-ARNt-sintetasa con gasto ATP
El ARNt se une en un sitio especifico del
ribosoma llamado sitio A.
Al mismo tiempo una molecula de ARNm
se une al ribosoma.
 Un segundo ARNt con un aminocido se
une al complejo.
El sitio en donde se coloca el segundo
ARNt con el ribosoma se llama sitio P.
Posteriormente la enzima
peptidiltransferasa une los 2 aminocidos
por un enlace peptdico
Se produce un desplazamiento del
ribosoma a lo largo del ARNm
 Como resultado el sitio A queda disponible
para el ingreso de un nuevo ARN t
activado.
El ARNm cumple un papel importante en
el proceso de sntesis de protenas.
La secuencia de bases nitrogenadas de
esta molcula controla el inicio de proceso
y determina el orden en que deben unirse
al ribosoma los ARNt.
 En la sntesis de protenas participan los
ribosomas ARNm,ARNt y una serie de
protenas especificas.
El ribosoma esta formada por 2
subunidades : una pequea y otra grande.
Cuando ambas se unen forman 2
espacios llamados sitio aminoacil o A y
sitio peptidil o P
 CODIGO GENETICO
Es el diccionario usado para lograr la
traduccin de la informacin gentica,
escrita en lenguaje nucleotidico de 4
bases nitrogenadas a un idioma
aminoacidico escrito con un abecedario
de 20 letras.
 Los 20 aminocidos que encontramos
formando parte de las protenas de un
ser vivo, estn representados en el cdigo
gentico de la agrupacin de 3 bases
nucleotidicas ( triplete o codon ) de las 4
existentes.
 Cada triplete constituye un codon.
Existen en total 64 codones
61 de ellos codifican aminocidos.
3 son codones de termino para el cese
de la traduccin.
El cdigo gentico es :
- universal
- degenerado
 REGULACION DE LA
EXPRESION GENICA
Se produce en diferentes niveles.
A) Clulas Procariontes :
- La organizacin del material gnico es
simple.
- Uno de los mecanismos es el de los
operones o modelo operon lactosa
 El modelo fue propuesto por los cientficos
Jacob y Monod en estudios con la E.coli.
El modelo postula la existencia de 3 genes
estructurales : y z a y un gen
regulador llamado gen i.
 El gen y determina la sntesis de una
protena llamada permeasa que permite
el ingreso de lactosa a la clula.
El gen z controla la produccin de la
enzima B-galactosidasa que degrada la
lactosa en glucosa y galactosa
El gen a produce la enzima transacetilasa
que a la metabolizacion de la lactosa.
 El gen i regula la sntesis de una protena
llamada represor, que controla la
expresin de los genes estructurales.
El funcionamiento de este modelo
depende de la presencia o ausencia de
glucosa y lactosa.
 En presencia de glucosa y ausencia de lactosa :
- el represor se activa y se une a la zona O del
ADN.
- se evita la expresin de los 3 genes
estructurales.
- la bacteria metaboliza la glucosa disponible y no
sintetiza las enzimas involucradas en la degrada
cin de la lactosa ahorrando energa
 En presencia de lactosa y ausencia de
glucosa :
- el represor se une a la lactosa y se
inactiva.
- Los genes estructurales se expresan y se
sintetizan las enzimas que degradan la
lactosa para que la clula obtenga energa
 Jacob y Monod plantearon que existan 2
tipos de genes :
- estructurales
- reguladores.
Los estructurales controlan la sntesis de
las protenas encargadas del proceso de
desdoblamiento de la lactosa.
 Los reguladores determinan la sntesis de
protenas que controlan la actividad de los
genes estructurales y que se conocen
como protenas represoras.
 B) Clulas Eucariontes :
Es un proceso complejo
Participan los llamados promotores y los
potenciadores.
Los promotores son segmentos de ADN
ubicados antes del inicio de un gen y
necesarios para el comienzo de la
transcripcin.
 El segmento de ADN contiene unas 100
bases con la secuencia formada por T/A.
Los potenciadores son secuencias de
ADN que se ubican a gran distancia del
gen, pero que son capaces de aumentar
su expresin.