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Facultad de Ciencias
Departamento de Biologa, Microbiologa y Biotecnologa
Gentica
Historia del ADN
Blga. Pesq. Eliana Zelada Mzmela
Blgo. Acuic. Carmen Izsiga Barrera
La Gentica como ciencia
Bateson (1905) engendrar transmisin de caracteres
hereditarios
Ciencia de potencialidades informacin se transfiere de
padres a hijos
Ciencia que responde a cuatro interrogantes:
- dnde se encuentra y cmo se organiza?
- cmo se transmite y recombina?
- cmo se expresa?
- cmo cambia y cmo afecta ese cambio en la evolucin
Transferencia y reacciones del genotipo
Objetivo: Definido por Bateson: la investigacin de los fenmenos de la
herencia y variacin
semejanzas Entre los tipos de desarrollo de
Estudiar las causas
diferencias diferentes organismos
Aspectos Histricos: Origen de la Vida
a) Teora creacionista.
b) Teora de la generacin espontnea (abiognesis).
c) Teora de Oparn-Haldane.
d) Teora de la panspermia
Teora creacionista: Los primeros seres vivos se explican
como producto del impulso creativo de una fuerza
sobrenatural (Dios) cuyo estudio por definicin, no puede
abordarse en trminos cientficos.
Teora de la generacin espontnea (abiognesis). Idea vitalista, que
dur 2000 aos, domin el pensamiento hasta el siglo XVII. Propone
que la aparicin de seres vivos es a partir de algo no vivo. apoyada por
Aristteles. Decan que para producir materia viva a partir de materia
inorgnica, se almacenaban camisas sudadas y trigo en un lugar oscuro
para producir ratones.
En 1668, Francesco Redi: experiencia con carne descompuesta.
En 1862, Pasteur descubri que las bacterias, levaduras y protozoarios
eran la causa de la descomposicin de la materia orgnica.
Experiencia de Redi
c)Teora de Oparn-Haldane. Oparn, propuso en 1924 que la
atmsfera primitiva debi contener cantidades importantes de
metano, amonaco, hidrgeno, vapor de agua y carecer de oxgeno
libre
De acuerdo con Haldane, la tierra tena una atmsfera formada por
bixido de carbono, amonaco y agua pero carente de oxgeno libre; al
interaccionar la radiacin ultravioleta de origen solar, se form una
gran cantidad de compuestos orgnicos, como azcares y AA, que al
acumularse en los mares primitivos, formaron la llamada sopa
primigenia, donde surgieron los primeros organismos.
c) Teora de la panspermia. Propone que la vida es eterna y se halla
presente en cualquier rincn del universo. Segn Svante August
Arrhenius en 1906 dice que la vida se desarroll a partir de una
espora o una bacteria que lleg del espacio exterior y que se
desprendi de un planeta en el que hubiese vida.
1868: Darwin todo lo referente a la herencia es maravilloso
La vida slo engendra vida no a la generacin espontnea
Los animales generan animales
1) Teora de la Preformacin
- En 1694: Hartsoecker homnculo
- Swammerdan deca: En la naturaleza no hay generacin,
sino solamente el desarrollo de partes. As se explica el
pecado original, todos los hombres estaban contenidos en
los rganos de Adn y Eva. Cuando su depsito de vulos se
agote, la raza humana dejar de existir.
A comienzos del siglo XVIII, esta doctrina gozaba de gran aceptacin: la
controversia era si los embriones en miniatura preformados estaban en
los vulos o en los espermatozoos. Lo absurdo era el inmenso nmero de
huevos o semillas con que haban de estar dotados los animales primitivos.
En 1772 se hizo el clculo de que, incluso tomando como base la edad
atribuida al mundo en la Biblia, de alrededor de seis mil aos, el nmero
de conejos contenidos por el primer conejo deba estar alrededor de los
cien mil. Ni siquiera esta consideracin bast para disuadir a muchos
bilogos prominentes de aquel tiempo.
2) Epignesis
El avance de los microscopios homnculo fruto de la
imaginacin.
Wolff y K.E. Von Baer gametos eran gotas de lquidos. El
desarrollo es algo ms que un simple crecimiento el cuerpo en
desarrollo pasa por una serie de transformaciones radicales donde se
forman rganos inexistentes anteriormente.
sangre sangre
Por blanco Por negro
4) Herencia de los caracteres adquiridos
Existen dos series de hechos:
a) Primero: Que los organismos son modificados por el ambiente
b) Segundo: Que la descendencia se parece a los progenitores
las
Si se relacionan estas dos series de hechos
modificaciones inducidas en los padres por el ambiente,
se transmitirn a la descendencia que la hereda
Lamarck: HCA es el mecanismo ms importante en la evolucin
5) Teora del Plasma Germinal
Propuesta por A. Weismann en 1842
Hizo experiencias en ratones
Consider a tejidos reproductores: germoplasma
Supuso separado y diferente
Informacin Posicional
Material gentico
La Lgica Qumica de la Vida
Todas las propiedades de los organismos vivos resultan de las
propiedades de las protenas que contienen.
Las propiedades que posee una protena dada, resulta de la
secuencia de sus aminocidos.
La secuencia de aminocidos de una protena, est determinada
por la secuencia de nucletidos de los cidos nucleicos.
Los cidos nucleicos constituyen el material hereditario que cada
organismo pasa a la siguiente generacin y es el mismo en todos
los organismos.
Historia del ADN
Cifra ms grande
CHON = 50 500AA X = 300 AA 20300 que el N total de
partculas
fundamentales 1080
Hasta 1930: cido timonucleico: animales.
ARN : cido zimonucleico: vegetales
Griffith (1914): Existencia de una sustancia transformante
2) 1944 1960:
Avery: ADN es la sustancia gentica y se acept que el ADN
era algo ms que la simple repeticin de un tetranucletido
Feulgen: descubri una tcnica para teir ADN
Bouvin & Vendrely, Mirsky & Ros: en 1948 demostraron que
la concentracin de ADN era igual en todas las clulas de un
individuo y en todos los individuos de la misma sp.
Hershey & Chase: Se inyecta ADN y no CHON
ADN dirige su propia replicacin y la sntesis de las CHON.
Watson & Crick: estructura secundaria del ADN. R, T, T.
Cantidad de ADN (ugx10-6)
Eritrocito Hepatocito Espermatozoide
Sbalo 1,97 2,01 0,91
Carpa 3,49 3,33 1,64
Trucha 5,79 -.- 2,67
Rana 15,00 15,70 -.-
Sapo 7,33 -.- 3,70
Hay un principio
transformante
Experiencia de Avery
. Cubierta
polisacrida
. Cpsula
proteica
. ADN
. ARN
Experiencia del bacterifago marcado: Hershey & Chase
(1952)
Alfred Hershey y Martha Chase
Experiencia de Fraenkel-Conrat y Singer (1957)
Requisitos que debe de cumplir una molcula hereditaria
6
1 5 7
8
2 4
9
3
4
3 5
2 6
1
O NH2 O
CH3
O O O
pirimidina imidazol
NH2 O
NH2
Azcar
4 1
2
3
Radical Fosfato
Base nitrogenada Azcar
Nuclesido
Nucletido
Ribosa
ARN
Adenina, guanina, citosina, uracilo
Radical fosfato
ApAp 3 5
OH P
La presencia de un grupo
OH en posicin 2 de la
ribosa, hace que el
polinuceltido sea menos
estable: el OH se encuentra
adecuadamente situado para
atacar el P en presencia de
iones OH - , causando la
rotura de la unin
fosfodister y formar un
enlace cclico 2, 3
Fosfonucletido 5
Fosfonucletido 3
Estructura Secundaria
2 3
Presencia de grupos cetnicos y
amnicos: lo que ofrece la oportunidad
para formar enlaces H
Espectro de difraccin de
Cetnico: T, U Forman un puente rayos X: Wilkins y Atsbury
Amnico: A
Amnico Cetnico: C, G Forman dos puentes
L.Pauling
(Caltech)
M.Wilkins y R.E.Franklin
(Londres)
J.D.Watson y F.H.C.Crick
(Cambridge)
Periodicidad a 0,34 nm Estructura helicoidal
(forma en X)
Periodicidad
a 3,4 nm
James Watson y Francis Crick
Para determinar la estructura tridimensional o disposicin
espacial de las molculas de ADN, se hace incidir un haz de rayos
X sobre fibras de ADN y se recoge la difraccin de los rayos
sobre una pelcula fotogrfica. La pelcula se impresiona en
aquellos puntos donde inciden los rayos X, produciendo al
revelarse, manchas. El ngulo de difraccin presentado por cada
una de las manchas en la pelcula suministra informacin sobre la
posicin en la molcula de ADN de cada tomo o grupo de tomos.
Mediante esta tcnica de difraccin de rayos X se obtuvieron los
siguientes resultados:
Las bases pricas y pirimidnicas se encuentran unas sobre
otras, apiladas a lo largo del eje del polinucletido a una distancia
de 3,4 Las bases son estructuras planas orientadas de forma
perpendicular al eje (Astbury, 1947).
El dimetro del polinucletido es de 20 A y est enrollado
helicoidalmente alrededor de su eje. Cada 34 A se produce una
vuelta completa de la hlice.
Existe ms de una cadena polinucleotdica enrollada
helicoidalmente (Wilkins et al. 1953, Frankling y Gosling, 1953).
Regla de la Equivalencia
El modelo secundario descrito requiere cantidades
equivalentes de A y T y de C y G.
Demostrado por Chargaff por cromatografa antes que
Watson y Crick propusieran el modelo:
CG GC
4/2 = 2 2/4 = 0,5 1/5 = 0,2 5/1 = 5
TA C- G
AT CG
33,3 % 83,3 %
G-C G-C
las hebras
Una hebra se
orienta en
sentido 5 3
y la otra en
sentido 3 5,
es decir son Diapositiva 69
antiparalelas
http://www.arrakis.es/~ibrabida/vigadn2.html
3 5
Resumen de las caractersticas del modelo
Modelo Z
El 'ADN zurdo' sirve para 'editar' el mensaje de los genes.
Fuente: The New York Times.
Cuando en 1979 los cientficos vieron de verdad por primera vez la
molcula de la vida, el ADN, no se trataba de la espiral curvilnea
que Francis Crick y James D. Watson haban descubierto ms de
25 aos antes. Sus observaciones correspondan a una molcula que
se curvaba hacia la derecha. Sin embargo, lo que revel la
cristalizacin de la molcula en 1979 fue una extraa y
zigzagueante molcula espiral que giraba hacia la izquierda. Se
denomin ADN zurdo, o ADN-Z, y los bilogos lo tacharon de
casualidad, probablemente nada ms que basura molecular. Pero
Alexander Rich, bilogo molecular del Instituto Tecnolgico de
Massachusetts (EE UU) que fue el primero en ver el ADN zurdo,
nunca lo abandon. Ahora Rich y sus colegas han demostrado que el
ADN-Z es ms que una rareza. En la investigacin descrita
recientemente en la revista Science, descubrieron que la
naturaleza elabora y utiliza un ADN zurdo, y puede que su papel a
la hora de regular la qumica de la vida sea bastante importante.
Inicialmente se crea que el ADN era simplemente pasivo, un
cdigo que leer. Pero ahora, con ste y otros ejemplos que se
estn estudiando, parece que el ADN es activo, y puede cambiar
su propio mensaje escrito segn se va leyendo. La forma del
ADN, tanto si es diestro como zurdo, ayuda a determinar la
forma en que se lee este mensaje. Cuando aparece la versin
zurda, salta la molcula editora , se adhiere al ADN-Z, y altera
el mensaje que se est leyendo. Como consecuencia, resulta que
existe ms de una forma de leer el mensaje del ADN, la forma
normal y la forma editada . Las protenas producidas por clulas
con ADN editado resultan importantes en la vida. Segn Rich,
una de ellas se utiliza como una de las principales molculas
receptoras del cerebro. Sin ella, los animales tienden a
desarrollar epilepsia y muchas veces mueren. Otra molcula
editada es un receptor de serotonina. La versin editada de la
molcula proporciona una respuesta ms tamizada a la serotonina
y, por tanto, permite unas reacciones mezcladas, ms afinadas,
en vez de slo las reacciones que se producen con la versin sin
editar.
ADN triple hlice o ADN-H: In vitro es posible obtener
tramos de triple hlice intercalando oligonucletidos cortos
constituidos solamente por pirimidinas (timinas y citosinas) en
el surco mayor de una doble hlice. Este oligonucletido se une
a pares de bases A-T y G-C mediante enlaces de hidrgeno
tipo Hoogsteen que se establecen entre la T o la C del
oligonucletido y los pares A-T y G-C de la doble hlice. No se
sabe la funcin biolgica del ADN-H aunque se ha detectado en
cromosomas eucariticos.
ADN cuadruplexo: "In vitro" se han obtenido cuartetos de
Guanina (ADN cuadruplexo) unidas mediante enlaces tipo
Hoogsteen, empleando polinucletidos que solamente contienen
Guanina (G). Los extremos de los cromosomas eucariticos
(telmeros) tienen una estructura especial con un extremo 3' OH
de cadena sencilla (monocatenario) en el que se repite muchas
veces en tandem una secuencia rica en Guaninas. Se piensa que el
ADN cuadruplexo telomrico servira para proteger los extremos
cromosmicos de la degradacin enzimtica. Ejemplo de secuencia
telomrica rica en guaninas (G):
5P TTGGGTTGGGGTTGGGG...............TTGGGG 3'OH
Palndromos: Es una figura gramatical que se lee igual en los dos
sentidos, por ejemplo: DABALE ARROZ A LA ZORRA EL ABAD. En el
palndromo de doble cadena la secuencia de bases se lee igual en
direccin 5 P 3OH en ambas cadenas.
Regin palindrmica en un DNA de doble hebra
Lectura 5 3TTAGCACGTGCTAA
Lectura 5 3TTAGCACGTGCTAA
5 T T A G C A C G T G C T A A 3
3 A A T C G T G C A C G A T T 5
eje binario de simetra
(rotacional)
5 T T A G C A C G T G C T A A 3
3 A A T C G T G C A C G A T T 5
Estructura Terciaria
Se refiere a como se almacena el
ADN en un volumen reducido.
Vara segn se trate de
organismos procariotes o
eucariotes:
a) En procariontes se pliega como una
super-hlice en forma,
generalmente, circular y asociada
a una pequea cantidad de
protenas, no histonas. Lo mismo
ocurre en las mitocondrias y en los
plastos.
b) En los eucariotas est unido a
protenas del tipo histonas,
constituyendo la cromatina
Propiedades del ADN
1 vuelta 34 A 10 pb
10000 X
A260 A260
DNA = 1,8 RNA = 2,0
A280 A280
b) Interacciones Inicas: Debido a la presencia del gran
nmero de fosfatos hacia su superficie, el ADN se comporta
como un fuerte polianin: polianin, que le permite reaccionar
con molculas positivas
c) Viscosidad: Es directamente proporcional a la resistencia de
sus componentes a flotar:
- ADN duplexo: fuertemente viscoso
d) Sedimentacin en centrifugacin: Se usa para separar cidos
nucleicos. Hay dos tcnicas:
En gradiente de densidad preformada: La posicin del ADN en
el tubo depende del tiempo de exposicin y del tamao de la
molcula
En cloruro de cesio: Cuando la concentracin de ClCs es la
misma en todo el tubo, las molculas de ADN se separan en la
base de su propia densidad relativa, que no depende slo de su
tamao sino de su conformacin. Cuando la concentracin es
diferente lo hace en base a su tamao
EtBr
Bienvenidos al mundo
del ADN