ESPECTROMETRA DE ABSORCIN MOLECULAR

Tema 4. Anlisis Instrumental

Parte I. Mtodos pticos.
Espectrometra de absorcin molecular ultravioleta visible Especies moleculares absorbentes Aplicaciones cuantitativas y cualitativas Mtodos automatizados Espectroscopa de absorcin molecular infrarroja Aplicaciones cuantitativas y cualitativas

ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN MOLECULAR UV-VISIBLE

Espectro caracterstico: bandas de absorcin electrnicas compuestas de varias lneas muy juntas. Corresponden a los numerosos estados de energa vibracional y rotacional Estado gaseoso Transiciones electrnicas, vibratorias y rotacionales Absorbancia

Solvente no polar Transiciones electrnicas

Solvente polar Fuerzas moleculares intensas Un solo pico: absorcin mxima y uniforme
400 500 550 600
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Longitud de onda

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Absorcin por compuestos orgnicos  Interaccin de los fotones y electrones que participan en la formacin de enlaces o se localizan en torno a tomos (oxgeno, azufre, nitrgeno, halgenos)  La longitud de onda de la absorcin depender de los enlaces de la molcula.  Enlaces simples (C-C, C-H): <180nm, dificultades experimentales  Enlaces dobles y triples: menor fuerza y mayor facilidad de excitacin.  Cromforos: grupos funcionales orgnicos no saturados que absorben en las regiones UV-visible.  Identificacin intensidad y posicin de pico, pero: Modificaciones debidas al disolvente Conjugacin entre dos o ms cromforos: desviaciones a > Aumento de los picos de absorcin por efectos vibratorios  Compuestos orgnicos saturados con heterotomos: excitacin de e- a 250 nm 170-

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Caractersticas de absorcin de algunos cromforos orgnicos
Cromforo Alqueno Alqueno conjugado Alquino Carbonilo Ejemplo C6H13CH=CH2 CH2=CHCH=CH2 C5H11C C-CH3 O CH3CCH3 O CH3CH n-hexano 180 293 Grande 12 Disolvente n-heptano n-heptano n-heptano n-hexano
max,

nm

max

177 217 178 186 280

13000 21000 10000 1000 16

Absorcin por compuestos orgnicos que contienen heterotomos no saturados

Compuesto CH3OH (CH3)2O CH3Cl CH3I (CH3)2S
max,

nm

max

167 184 173 258 229

1480 2520 200 265 140

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Absorcin por especies inorgnicas  Iones y complejos de las dos primeras series de transicin: Absorben bandas amplias de radiacin visible coloreados  Transiciones entre orbitales d  Posicin del pico depende de:  Posicin del elemento en la tabla peridica  Estado oxidacin  Naturaleza del ligando  Series de transicin de lantnidos y actnidos  Transiciones entre orbitales f  Bandas estrechas no afectadas por los ligandos Absorcin por transferencia de carga  Altas absortividades molares alta sensibilidad  Complejos de naturaleza orgnica e inorgnica  Complejo de transferencia de carga: grupo donador de e- enlazado con un aceptor de e Estado excitado proceso de oxidacin-reduccin interno  Ejemplos: complejos fenlicos de hierro, complejo 1,10-fenantrolina de hierrro(II), yoduro y yodo molecular, complejo ferrocianuro frrico
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Aplicaciones cualitativas  Deteccin de grupos cromforos: complementar con otros datos  Caractersticas del disolvente:  Transparente en la regin de absorcin del soluto  Disolver cantidad suficiente para un espectro bien definido  Considerar interacciones con la especie de inters  Considerar la polaridad: cambios de los mximos  Medir los espectros con una anchura de corte mnima  Considerar el efecto de la radiacin dispersa en los extremos de longitudes de onda de un espectrofotmetro Disolventes para las regiones uv-visible
Disolvente Lmite inferior de , nm Agua 180 Etanol 220 Hexano 200 Ciclohexano 200 Tetracloruro de carbono 260 ter de dietilo 210 Acetona 330

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Aplicaciones cuantitativas  Caractersticas de los mtodos - Aplicabilidad: 90% anlisis en laboratorios clnicos - Alta sensibilidad: 10-4-10-5 - Selectividad moderada a alta: correcciones con medidas a otras - Buena exactitud: errores entre el 1% y el 5% - Facilidad y comodidad: posible automatizarlos  Aplicacin a especies absorbentes - Compuestos orgnicos, inorgnicos  Aplicacin a especies no absorbentes - Reaccionando con grupos cromforos
Cromforo inorgnico In tiocianato Anin del perxido de hidrgeno In yoduro Analito Fe, Co, Mo Ti, V, Cr Bi, Pd, Te Cromforo orgnico Dietilditiocarbamato Difeniltiocarbazona 1,10-fenantrolina 10Dimetildiglioxima Analito Cu Pb Fe Ni

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Detalles del procedimiento  Seleccin de la longitud de onda en un mximo de absorcin  Variables que influyen en la absorbancia: naturaleza del disolvente, el pH de la disolucin, la T, las concentraciones altas de electrolito y la presencia de sustancias interferentes  Determinacin de la relacin entre absorbancia y concentracin: patrones lo ms aproximado posible a la composicin final de las muestras reales  Mtodo de las adiciones estndar: Vx: alcuotas de la disolucin desconocida con concentracin cx Vt: volumen final Vs: volumen aadido de un patrn con concentracin cs Ley de Beer: As = mVs + b
As ! I b Vs c s I b Vx c x  ! kVs cs  kVx c x Vt Vt

m = kcs y b = kVxcx
sc c s
2 2

kc s m ! b kV x c x
2

cx !

bc s mVx

Varianza del resultado:

s s ! m  b m b

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Actividades: Mtodo de las adiciones estndar 1. Se transfieren con una pipeta alcuotas de 10 mL de muestras de agua natural a matraces volumtricos de 50,00 mL. A cada matraz se le agregan 0,00; 5,00; 10,00;15,00 y 20,00 mL de una solucin estndar que contiene 11,1 ppm de Fe3+ y a continuacin un exceso de in tiocianato para obtener el complejo rojo Fe(SCN)2+. Despus de la dilucin hasta el volumen del matraz se observ que las absorbancias de las cinco disoluciones medidas con un fotmetro equipado con filtro verde fueron 0,240; 0,437; 0,621; 0,809 y 1,009, respectivamente (celdas de 0,982 cm) Cul era la concentracin de Fe3+ en la muestra de agua? 2.

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 Anlisis de mezclas  La absorbancia total de una disolucin a una determinada longitud de onda es igual a la suma de las absorbancias de sus componentes.
M+N
Absorbancia

 Clculo de absortividades molares (ley de Beer)  Medida de A a 1 y 2

N

A 1= A 2=

M, 1bcM M,

+ 2bcM +

N, 1bcN

N, 2bcN

M
1 2

Longitud de onda

1. El paladio (II) y el oro (III) se determinan de forma simultnea al reaccionar con metiomeprazina (C19H24N2S2). El mximo de absorcin del complejo de paladio se da a 480 nm, mientras que el del complejo del oro se presenta a 635 nm. Los datos de absortividad molar a esas longitudes de onda son: Pd( 1)=3,55103, Pd( 2)=5,64102, Au( 1)=2,96103, Au( 1)=1,45104. Se trata una muestra de 25 mL con exceso de metiomeprazina y se diluye a 50 mL. Calcule las concentraciones molares de Pd y Au en la muestra si la absorbancia de la disolucin diluida es de 0,533 a 480 nm y de 0,590 a 635 nm cuando se mide en una celda de 1,00 cm
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Valoraciones fotomtricas y espectrofotomtricas  Requiere que uno o ms de los reactivos o productos absorban algn tipo de radiacin, o bien, que se agregue algn tipo de indicador de absorcin.  Curva de valoracin: grfica de absorbancia en funcin del volumen de valorante
A= P=0 A= T=0 p>0

Absorbancia

T>0

p= T=0 A>0

T> P>0 A=0 p> T>0

Absortividades molares p: producto T: valorante A: analito valorado

A> P>0 T=0

A=0

Volumen del valorante

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Valoraciones fotomtricas y espectrofotomtricas  Espectrmetro o fotmetro modificado: recipiente inmvil en el trayecto del haz de radiacin  Valores relativos de absorbancia  Potencia de la fuente y respuesta del detector deben ser constantes  Resultados ms exactos que las determinaciones fotomtricas directas  Valoraciones de oxidacin-reduccin, cido-base, EDTA, formacin de complejos y de precipitacin.
Punto final del Cu

Absorbancia

Valoracin sucesiva de Cu y Bi = 745 nm

Punto final del Bi

Volumen EDTA

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Mtodos espectrofotomtricos y fotomtricos automatizados.  Disolucin bombeada mediante una bomba peristltica: flujo continuo  Inyeccin de la muestra: Rpida, un pulso lquido, no alterar el flujo. Vlvula de inyeccin

Bomba peristltica Anlisis espectrofotomtrico de nitratos por inyeccin en flujo

81 Q L M R1 R2 R3
1,3 1,0 1,0 1,0

TR1 (V.I.) 0,5 m

Cd TR2 2m TR3 1m (D.) 543 nm Desecho

R1: cloruro amnico y AEDT R2: sulfanilamida R3: disolucin de N-1naftil-etilendiamina

mL/min (B.P.)

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ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN MOLECULAR UV-VISIBLE

Fuentes utilizadas en los instrumentos de absorcin molecular - lmparas de Deuterio o hidrgeno: 160-375 nm - lmparas de filamento de Tungsteno: 350-2500 nm - lmparas de arco de xenn: 250-600 nm Tipos de instrumentos para mediciones de absorcin molecular - Fotmetros - convenientes, robustos y fciles de mantener y utilizar - diseos de doble haz y de un solo haz - importancia de la eleccin del filtro - para regin visible y uv - Espectrofotmetros - generalmente de un solo haz - sencillos, robustos,baratos y fciles de transportar - anlisis cuantitativo - uso en uv y visible

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ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN INFRARROJA

Generalidades  Identificacin de compuestos orgnicos e inorgnicos puros  Menos satisfactoria para anlisis cuantitativo  Desviaciones ley de Beer  Menor sensibilidad  Menor precisin Espectros  Slo presenta transiciones vibracionales y rotacionales  Bandas de absorcin estrechas  Muestras lquidas: se obstaculiza la rotacin  Formas de vibracin relacionadas con el nmero de enlaces

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ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN INFRARROJA

Instrumentacin  Instrumentos de dispersin  Similares a los de de doble haz temporal  Diferencia en la situacin del compartimento de celda  Fuentes: slidos calentados  Detectores trmicos  Componentes fabricados con slidos pulidos (ClNa, BrK)  Espectrmetros de transformada de Fourier Ventajas: sensibilidad inusualmente alta, resolucin y rapidez de adquisicin de datos  Interfermetro de Michelson: se detectan y se miden todas las longitudes de onda de forma simultnea. Modular la fuente y hacerla pasar por la muestra: interferograma.  La decodificacin del interferograma se realiza mediante el anlisis de transformada de Fourier.  Fotmetros de filtro  Vigilancia concentracin de contaminantes atmosfricos

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ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN INFRARROJA

Aplicaciones cualitativas.  Bandas de absorcin tiles para la identificacin de grupos funcionales 8,5 m  Comparar el espectro con el de compuestos conocidos Algunos picos caractersticos de absorcin en IR
Grupo funcional O-H C-H C-H C N C CCOOR COOH C=O CONH2 C=CAliftico y aromtico Aromtico Aliftico Nitrilo Alquino ster Acido carboxilico Aldehidos y cetonas Amidas Alqueno Nmero de onda 3600-3100 3150-3000 3000-2850 2400-2200 2260-2100 1750-1700 1740-1670 1740-1660 1720-1640 1670-1610 Longitud de onda 2,8-3,2 3,2-3,3 3,3,-3,5 4,2-4,6 4,4-4,8 5,7-5,9 5,7-6,0 5,7-6,0 5,8-6,1 6,0-6,2
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= 2,5-

ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN INFRARROJA

Aplicaciones cuantitativas Diferencias con UV-visible debido a: Mayor complejidad de los espectros Estrechez de las bandas de absorcin La instrumentacin No utilizan disolvente de referencia Alto grado de especificidad anlisis de mezclas de compuestos orgnicos  Determinacin de contaminantes atmosfricos Ejemplo de anlisis de vapor por infrarrojos segn OSHA
Compuesto Bisulfuro de carbono Cloropreno Diborano Etilendiamina Cianuro de hidrgeno Metilmercaptano Nitrobenceno Piridina Dixido de azufre Cloruro de vinilo Exposicin permisible (ppm) 4 10 0,1 10 4,7 0,5 1 5 2 1 Longitud de onda ( m) 4,54 11,4 3,9 13,0 3,04 3,38 11,8 14,2 8,6 10,9 Concentracin detectable mnima (ppm) 0,5 4 0,05 0,4 0,4 0,4 0,2 0,2 0,5 0,3

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